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结核分枝杆菌RD1区编码蛋白在结核病诊断中的潜在价值被引量：4: 1; 作者杜凤娇陈曦 +1 位作者刘菲张宗德《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期511-515,共5页; RD1区编码的9个蛋白,是结核分枝杆菌在长期传代过程中丢失的重要保护性抗原,仅存在于致病性分枝杆菌中,在卡介苗及环境分枝杆菌中缺失;其有较强的免疫原性,在结核病的诊断中发挥重要作用。本文主要介绍应用RD1区编码蛋白作为抗原在活动... 展开更多; 关键词 RD1区结核分枝杆菌活动性肺结核结核性胸膜炎; 在线阅读下载PDF 职称材料

酶联免疫斑点检测和结核菌素试验在初治肺结核中的辅助诊断价值被引量：25: 2; 作者刘菲张宗德 +5 位作者操敏马丽萍高孟秋吴晓光朱莉贞马玙《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期443-448,共6页; 目的比较酶联免疫斑点检测(ELISPOT)和结核菌素试验(TST),探讨ELISPOT在初治肺结核中的辅助诊断价值。方法选取初治肺结核123例和非结核疾病病例102例作为结核组和对照组,应用6kD早期分泌靶向抗原/10kD培养滤过蛋白融合蛋白(ESAT-6/CFP-... 展开更多; 关键词酶联免疫斑点技术结核菌素试验辅助诊断初治肺结核; 在线阅读下载PDF 职称材料

复苏因子E-DNA疫苗对BALB/C小鼠免疫效应的研究被引量：4: 3; 作者邢爱英刘忠泉 +7 位作者贾红彦李自慧郑晓静曹廷明杜风娇杜博平古淑香张宗德《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第23期4259-4261,共3页; 目的:探索复苏因子E(RpfE)-DNA疫苗的小鼠免疫效果。方法:利用真核表达载体PCDNA3.1构建PCDNA3.1-RpfE重组质粒。将SPF级BALB/C小鼠随机分为5组,即空质粒组、RpfE质粒组、BCG组、生理盐水组、空白对照组,于0、3、6周先后3次免疫小鼠,在... 展开更多; 关键词疫苗 DNA RpfE 免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

结核分枝杆菌休眠菌的复苏培养与初始菌量的关系被引量：1: 4; 作者刘忠泉邢爱英 +2 位作者古淑香贾红彦张宗德《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期423-426,共4页; 目的探讨复苏因子对结核分枝杆菌休眠菌复苏作用与初始菌量的关系。方法取培养100d的陈旧结核分枝杆菌(休眠菌),用7H9稀释成麦氏比浊1mg/ml,之后倍比稀释成0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125mg/ml。取12支无菌培养管,加入5ml7H9培养基... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌复苏因子培养; 在线阅读下载PDF 职称材料

结核分枝杆菌特异性分泌蛋白的原核表达、纯化和免疫原性分析: 5; 作者陈曦古淑香 +7 位作者贾红彦李自慧郑晓静刘忠泉邢爱英杜博平张继增张宗德《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期396-402,共7页; 目的构建结核分枝杆菌rv1837c、rv3803c基因原核表达重组质粒,进行表达、纯化,并分析其免疫原性。方法PCR扩增结核分枝杆菌H37Rv rv1837c、rv3803c基因,并克隆入pTA2质粒。测序正确后,再亚克隆入pET30a(+)质粒,构建pET30a(+):rv1837c、p... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌 rv1837c基因 rv3803c基因 Rv1837c重组蛋白 Rv3803c重组蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

噬菌体硝酸盐还原实验方法的建立与评估: 6; 作者邢爱英刘忠泉 +2 位作者贾红彦古淑香张宗德《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期413-416,I0001,共5页; 目的采用噬菌体与硝酸盐还原实验结合的技术,以期建立一种新的快速、简易、廉价的结核杆菌药敏检测方法。方法对49株结核杆菌的临床分离株以噬菌体硝酸盐还原实验(PhaB-NRA法)与改良罗氏绝对浓度法对结核杆菌进行利福平、异烟肼药物敏... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌分枝杆菌噬菌体硝酸盐还原实验抗结核药物药物敏感性实验; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结核分枝杆菌RD1区编码蛋白在结核病诊断中的潜在价值被引量：4: 1; 作者杜凤娇陈曦刘菲张宗德; 机构北京市结核病胸部肿瘤研究所结核病分子生物学研究室; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期511-515,共5页; 文摘 RD1区编码的9个蛋白,是结核分枝杆菌在长期传代过程中丢失的重要保护性抗原,仅存在于致病性分枝杆菌中,在卡介苗及环境分枝杆菌中缺失;其有较强的免疫原性,在结核病的诊断中发挥重要作用。本文主要介绍应用RD1区编码蛋白作为抗原在活动性肺结核病和结核性胸膜炎诊断中的潜在价值。; 关键词 RD1区结核分枝杆菌活动性肺结核结核性胸膜炎; Keywords RD1 region Mycobacterium tuberculosis active tuberculosis tuberculous pleurisy; 分类号 R52 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名酶联免疫斑点检测和结核菌素试验在初治肺结核中的辅助诊断价值被引量：25: 2; 作者刘菲张宗德操敏马丽萍高孟秋吴晓光朱莉贞马玙; 机构北京市结核病胸部肿瘤研究所结核科北京市结核病胸部肿瘤研究所结核病分子生物学研究室; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期443-448,共6页; 文摘目的比较酶联免疫斑点检测(ELISPOT)和结核菌素试验(TST),探讨ELISPOT在初治肺结核中的辅助诊断价值。方法选取初治肺结核123例和非结核疾病病例102例作为结核组和对照组,应用6kD早期分泌靶向抗原/10kD培养滤过蛋白融合蛋白(ESAT-6/CFP-10)作为抗原对受试者外周血单个核细胞进行ELISPOT(即ESAT-6/CFP-10-ELISPOT),检测斑点形成细胞(SFCs)的数量;同时对受试者行TST。结果结核组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT形成的SFCs数显著高于对照组(P=0.000)。结核组中ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度91.1%(111/123)、特异度80.4%(82/102)、阳性似然比4.60、阴性似然比0.12、阳性预测值0.85、阴性预测值0.87,TST的敏感度65.6%(59/90)、特异度45.1%(46/102)、阳性似然比1.31、阴性似然比0.76、阳性预测值0.51、阴性预测值0.60。ESAT-6/CFP-10-ELIS-POT的敏感度和特异度显著高于TST(均P=0.000)。菌阳肺结核组和菌阴肺结核组间ESAT-6/CFP-10-ELISPOT形成SFCs数量差异无显著性(P=0.166),两组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度分别为91.8%(67/73)和88.0%(44/50),二者比较差异无显著性(P=0.448)。结论ESAT-6/CFP-10-ELISPOT有可能作为辅助诊断初治肺结核的较为准确方法,并为菌阴肺结核提供一定的诊断依据,但诊断的特异度可能受结核潜伏感染影响。TST对初治肺结核的诊断价值较小。; 关键词酶联免疫斑点技术结核菌素试验辅助诊断初治肺结核; Keywords enzyme-linked immunospot assay tuberculin skin test auxiliary diagnosis initial pulmonary tuberculosis; 分类号 R521.04 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名复苏因子E-DNA疫苗对BALB/C小鼠免疫效应的研究被引量：4: 3; 作者邢爱英刘忠泉贾红彦李自慧郑晓静曹廷明杜风娇杜博平古淑香张宗德; 机构北京市结核病胸部肿瘤研究所结核病分子生物学研究室; 出处《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第23期4259-4261,共3页; 基金国家"十一五"重大科技专项(编号:2008ZX10003-001); 文摘目的:探索复苏因子E(RpfE)-DNA疫苗的小鼠免疫效果。方法:利用真核表达载体PCDNA3.1构建PCDNA3.1-RpfE重组质粒。将SPF级BALB/C小鼠随机分为5组,即空质粒组、RpfE质粒组、BCG组、生理盐水组、空白对照组,于0、3、6周先后3次免疫小鼠,在第3次免疫后3周,心脏取血ELISA方法检测血清RpfE IgG抗体效价、干扰素γ(IFNγ)水平;并行脾淋巴细胞培养,以RpfE蛋白刺激淋巴细胞,CCK-8法检测淋巴细胞增殖指数、ELISA方法检测上清诱导IFNγ和白介素12(IL-12)产生水平,乳酸脱氢酶试验检测小鼠脾细胞毒性T淋巴(CTL)杀伤效应。结果:(1)RpfE质粒组小鼠血清中RpfE抗体水平明显高于其他各组(P<0.001);RpfE质粒组IFNγ水平明显高于空质粒组、生理盐水组、空白对照组和BCG组(P<0.01或P<0.05)。(2)RpfE质粒组具有较强的刺激淋巴细胞增殖作用,CCK-8实验表明其增殖指数高于其他各组(P<0.05);上清ELISA检测表明IFNγ和IL-12产生水平也高于其他各组(P<0.05)。(3)RpfE质粒组脾淋巴细胞特异性CTL杀伤性与其他各组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:RpfE-DNA疫苗可诱导小鼠的免疫应答,具有良好的体液和细胞免疫原性。; 关键词疫苗 DNA RpfE 免疫; Keywords Vaccines DNA RpfE Immunity; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结核分枝杆菌休眠菌的复苏培养与初始菌量的关系被引量：1: 4; 作者刘忠泉邢爱英古淑香贾红彦张宗德; 机构北京市结核病胸部肿瘤研究所结核病分子生物学研究室; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期423-426,共4页; 基金北京市自然科学基金(7052014)~~; 文摘目的探讨复苏因子对结核分枝杆菌休眠菌复苏作用与初始菌量的关系。方法取培养100d的陈旧结核分枝杆菌(休眠菌),用7H9稀释成麦氏比浊1mg/ml,之后倍比稀释成0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125mg/ml。取12支无菌培养管,加入5ml7H9培养基并分为2组,每组依次加入上述各浓度结核分枝杆菌,第1组加入复苏因子蛋白质,第2组作为对照加入等体积7H9,37℃培养,分别在15、25、30、35d检测光密度值,并取1μl培养液涂7H11平板培养,进行菌落计数。重复上述实验。结果0、15、25、30、35d分光光度计检测光密度(OD)值结果显示:各浓度组间细菌增殖呈直线正相关性(P<0.05,P<0.01),即复苏因子对不同稀释浓度的复苏作用相同。7H11培养结果和OD值检测结果显示:各组两种方法检测结果呈直线相关性(P<0.05,P<0.01),即两种方法检测结果有一致性。结论复苏因子对结核分枝杆菌休眠菌的复苏作用与初始菌量无关。; 关键词结核分枝杆菌复苏因子培养; Keywords Mycobacterium tuberculosis resuscitation promoting factor culture; 分类号 Q93 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结核分枝杆菌特异性分泌蛋白的原核表达、纯化和免疫原性分析: 5; 作者陈曦古淑香贾红彦李自慧郑晓静刘忠泉邢爱英杜博平张继增张宗德; 机构北京市结核病胸部肿瘤研究所结核病分子生物学研究室; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期396-402,共7页; 文摘目的构建结核分枝杆菌rv1837c、rv3803c基因原核表达重组质粒,进行表达、纯化,并分析其免疫原性。方法PCR扩增结核分枝杆菌H37Rv rv1837c、rv3803c基因,并克隆入pTA2质粒。测序正确后,再亚克隆入pET30a(+)质粒,构建pET30a(+):rv1837c、pET30a(+):rv3803c重组体。然后转化入表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),经0.4mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导;分别与组氨酸标签单克隆抗体及结核患者血清进行Western blot,鉴定Rv1837c、Rv3803c重组蛋白。经镍离子螯和氮川乙酸-组氨酸标签亲和树脂纯化,将纯化的重组蛋白分别免疫家兔,取兔血清与纯化蛋白通过Western blot方法,检测家兔血清中的抗体。结果pET30a(+):rv1837c、pET30a(+):rv3803c重组体表达相对分子质量为92000及38000的重组蛋白,表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中,表达量分别占全菌蛋白质的30%及50%。获得纯度为90%的重组蛋白。纯化蛋白通过Western blot鉴定证实为目的蛋白,有较强的免疫原性。结论成功构建原核表达重组质粒pET30a(+):rv1837c、pET30a(+):rv3803c,并获得Rv1837c及Rv3803c重组蛋白,为血清学诊断活动性结核病奠定了基础。; 关键词结核分枝杆菌 rv1837c基因 rv3803c基因 Rv1837c重组蛋白 Rv3803c重组蛋白; Keywords Mycobacterium tuberculosis rv1837c gene rv3803c gene recombinant Rv1837c recombinant Rv3803c; 分类号 R378.911 [医药卫生—病原生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名噬菌体硝酸盐还原实验方法的建立与评估: 6; 作者邢爱英刘忠泉贾红彦古淑香张宗德; 机构北京市结核病胸部肿瘤研究所结核病分子生物学研究室; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期413-416,I0001,共5页; 文摘目的采用噬菌体与硝酸盐还原实验结合的技术,以期建立一种新的快速、简易、廉价的结核杆菌药敏检测方法。方法对49株结核杆菌的临床分离株以噬菌体硝酸盐还原实验(PhaB-NRA法)与改良罗氏绝对浓度法对结核杆菌进行利福平、异烟肼药物敏感性测定,以绝对浓度法作为参照标准判定PhaB-NRA法的敏感性、特异性、准确性及其可行性。结果PhaB-NRA法对利福平进行药物敏感性测定的敏感性、特异性、准确性分别为89.1%、91.67%、89.8%;对异烟肼进行药物敏感性测定的敏感性、特异性、准确性分别为86.21%、90.0%、87.8%。它们与绝对浓度法的符合率分别为利福平:0.746;异烟肼:0.750。结论PhaB-NRA法简化了实验步骤、缩短了药敏检测时间,且无需昂贵的仪器,有望成为快速结核杆菌药物敏感性测定的初筛方法。; 关键词结核分枝杆菌分枝杆菌噬菌体硝酸盐还原实验抗结核药物药物敏感性实验; Keywords Mycobacterium tuberculosis mycobacteriophage nitrate reductase antituberculosis drug drug susceptibility test; 分类号 R378.991 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	结核分枝杆菌RD1区编码蛋白在结核病诊断中的潜在价值	杜凤娇陈曦刘菲张宗德	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	酶联免疫斑点检测和结核菌素试验在初治肺结核中的辅助诊断价值	刘菲张宗德操敏马丽萍高孟秋吴晓光朱莉贞马玙	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	25	在线阅读下载PDF 职称材料
3	复苏因子E-DNA疫苗对BALB/C小鼠免疫效应的研究	邢爱英刘忠泉贾红彦李自慧郑晓静曹廷明杜风娇杜博平古淑香张宗德	《实用医学杂志》 CAS 北大核心	2010	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	结核分枝杆菌休眠菌的复苏培养与初始菌量的关系	刘忠泉邢爱英古淑香贾红彦张宗德	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	结核分枝杆菌特异性分泌蛋白的原核表达、纯化和免疫原性分析	陈曦古淑香贾红彦李自慧郑晓静刘忠泉邢爱英杜博平张继增张宗德	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	噬菌体硝酸盐还原实验方法的建立与评估	邢爱英刘忠泉贾红彦古淑香张宗德	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料