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应用多肽芯片研究非小细胞肺癌患者血清中的EGFR自身抗体 被引量:2
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作者 李元 岳文涛 +3 位作者 王玥 张丽娜 顾勐 许绍发 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第7期727-730,共4页
背景与目的自身抗体作为新的肿瘤标志物在肺癌的早期诊断和预后评价中可能发挥重要作用,本研究利用多肽芯片检测非小细胞肺癌患者血清中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的自身抗体,并筛选自身抗体识别的抗原... 背景与目的自身抗体作为新的肿瘤标志物在肺癌的早期诊断和预后评价中可能发挥重要作用,本研究利用多肽芯片检测非小细胞肺癌患者血清中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的自身抗体,并筛选自身抗体识别的抗原表位。方法使用Intavis公司ASPSL多肽芯片合成仪合成EGFR多肽芯片,利用多肽芯片检测非小细胞肺癌患者血清中EGFR自身抗体,并筛选自身抗体识别的抗原表位。结果使用EGFR多肽芯片检测了20例非小细胞肺癌患者,结果有6例阳性,阳性率为30%,在该6例阳性患者中发现了9个高频位点,并且有8个高频位点集中在EGFR胞外段的第III和第IV结构域。结论本研究为我们进一步研究EGFR和EGFR自身抗体的功能提供了新的线索。 展开更多
关键词 肺肿瘤 EGFR 多肽芯片 自身抗体
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Ⅰ、Ⅱ相药物代谢酶遗传多态性与晚期非小细胞肺癌化疗疗效的关系 被引量:3
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作者 李伟英 岳文涛 +2 位作者 杨学惠 张春彦 王玥 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第11期858-864,共7页
背景与目的目前药物代谢酶遗传多态性与化疗疗效关系的研究结果多不一致,本研究旨在探讨细胞色素P4501A1(cytochrome P450 1A1,CYP1A1)、2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)、2D6(cytochrome P450 2D6,CYP2D6)和谷胱甘肽硫转移酶M1(glutat... 背景与目的目前药物代谢酶遗传多态性与化疗疗效关系的研究结果多不一致,本研究旨在探讨细胞色素P4501A1(cytochrome P450 1A1,CYP1A1)、2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)、2D6(cytochrome P450 2D6,CYP2D6)和谷胱甘肽硫转移酶M1(glutathione S-transferase M1,GSTM1)基因多态性与晚期非小细胞肺癌化疗疗效以及与肺癌患者预后的关系。方法采用PCR和PCR-RFLP技术对肺癌患者4种药物代谢酶基因分型,并对他们进行5年跟踪随访。结果携带B型CYP1A1和缺陷性GSTM1肺癌患者比其它基因型患者化疗疗效好(P<0.001)。携带A型CYP1A1肺癌患者接受非铂类化疗药物治疗比B型和C型患者疗效好(P=0.041);携带缺陷性GSTM1肺癌患者接受铂类化疗药物治疗疗效比功能型患者疗效好(P=0.011)。4种酶对晚期非小细胞肺癌患者总生存期(overall survival,OS)没有明显影响(P>0.05)。结论 A型CYP1A1肺癌患者接受非铂类化疗药物治疗比B型和C型患者疗效好;缺陷性GSTM1肺癌患者接受铂类化疗药物治疗比功能型患者疗效好。4种酶基因多态对晚期非小细胞肺癌患者OS影响没有明显统计学差异。 展开更多
关键词 肺肿瘤 药物代谢酶 化疗效果 预后
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非小细胞肺癌T7噬菌体展示文库的构建 被引量:3
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作者 岳文涛 王子彤 +1 位作者 王钥 张丽娜 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第5期686-690,共5页
背景与目的SEREX(Serological analysis of recombinant expression libraries)是近年来发展起来的一种寻找肿瘤相关抗原的方法,通过与噬菌体展示技术结合,可以有效和快速的筛选肿瘤相关抗原。本研究拟构建人肺鳞癌和肺腺癌T7噬菌体展示... 背景与目的SEREX(Serological analysis of recombinant expression libraries)是近年来发展起来的一种寻找肿瘤相关抗原的方法,通过与噬菌体展示技术结合,可以有效和快速的筛选肿瘤相关抗原。本研究拟构建人肺鳞癌和肺腺癌T7噬菌体展示cDNA文库,为进一步筛选和鉴定非小细胞肺癌相关抗原打下基础。方法诊断明确的肺鳞癌和腺癌患者手术标本各5例,Trizol试剂提取总RNA,Straight A's系统分离鳞癌和腺癌mRNA,逆转录合成双链cDNA后,与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到人肺鳞癌和腺癌T7噬菌体展示cDNA文库。结果构建肺鳞癌和肺腺癌T7噬菌体展示cDNA文库各一个,原始文库重组克隆数分别为鳞癌1.8×106pfu,腺癌5×106pfu。扩增后滴度为3.2×1010pfu/mL和2.5×1010pfu/mL。随机从2个文库中各抽取24个克隆PCR扩增插入片断,电泳结果显示肺腺癌文库所有克隆均有插入片段,肺鳞癌文库插入率超过95%(23/24)。两个文库插入片断大小均在(300-1500)bp之间。结论成功构建了人肺鳞癌和腺癌T7噬菌体展示cDNA文库,为下一步筛选和鉴定非小细胞肺癌相关基因奠定基础。 展开更多
关键词 噬菌体展示 CDNA文库 肺肿瘤 SEREX
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一种检测非小细胞肺癌患者血清中p53自身抗体的新方法 被引量:1
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作者 唐恺 岳文涛 +2 位作者 王玥 张丽娜 许绍发 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第9期969-974,共6页
背景与目的多肽阵列是近年来发展起来的一种研究分子之间相互作用的方法。本研究拟建立多肽阵列检测非小细胞肺癌患者血清中p53自身抗体的方法,筛选p53自身抗体识别的抗原决定簇序列。方法利用点合成技术(SPOT synthesis technique)合... 背景与目的多肽阵列是近年来发展起来的一种研究分子之间相互作用的方法。本研究拟建立多肽阵列检测非小细胞肺癌患者血清中p53自身抗体的方法,筛选p53自身抗体识别的抗原决定簇序列。方法利用点合成技术(SPOT synthesis technique)合成覆盖p53多肽链全部序列的多肽阵列;分别用ELISA和多肽阵列检测血清中的p53自身抗体,确定p53自身抗体识别的抗原决定簇序列。结果将包含p53多肽链全部序列的重叠肽段合成到硝酸纤维素膜上。多肽阵列检测30例非小细胞肺癌患者血清中的p53自身抗体,有7例为阳性;30例健康对照者均为阴性,与ELISA检测结果相同。P53自身抗体识别p53多肽链上某些共同的抗原表位。结论多肽阵列不仅可以用来检测肺癌患者血清中的自身抗体,还可以筛选这些自身抗体识别的抗原表位,为下一步研究自身抗体与非小细胞肺癌的早期诊断和预后的关系奠定基础。 展开更多
关键词 肺肿瘤 P53 抗原决定簇
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p53调控的肺癌细胞顺铂敏感性相关基因片段的分离和克隆
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作者 张洪涛 汪惠 +2 位作者 赖百塘 张春燕 杨学惠 《中国肺癌杂志》 CAS 2003年第3期172-175,共4页
目的 克隆野生型 p5 3 (wtp5 3 )影响人大细胞肺癌 80 1 D细胞系顺铂敏感性相关基因片段。 方法 采用转基因方法补偿 80 1 D细胞p5 3功能 ,分别提取经IC50 浓度顺铂刺激的转染wtp5 3细胞、空载细胞和未经顺铂作用的转wtp5 3细胞RNA ,... 目的 克隆野生型 p5 3 (wtp5 3 )影响人大细胞肺癌 80 1 D细胞系顺铂敏感性相关基因片段。 方法 采用转基因方法补偿 80 1 D细胞p5 3功能 ,分别提取经IC50 浓度顺铂刺激的转染wtp5 3细胞、空载细胞和未经顺铂作用的转wtp5 3细胞RNA ,用银染mRNA差异显示方法分离差异表达基因 ,反转录点杂交和巢式PCR进行确证。阳性片段进行克隆及序列分析。结果 获得 6条阳性片段 ,2条含有开放阅读框架(ORF) ,其中 1条片段部分与核糖核苷还原酶α链有 5 6%同源性 ,另一片段D1含有一个长ORF ,与已知cDNA序列同源率低。结论 p5 3对 80 1 D细胞顺铂敏感性的影响有明显的基因水平改变 ,可能诱导了相关基因表达。 展开更多
关键词 肺肿瘤 P53基因 顺铂 药物敏感性 基因片段 克隆 肺癌
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