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帕金森病大鼠纹状体神经元及黑质网状部神经递质变化的研究 被引量：6
1
作者 傅文玉 张进禄 +4 位作者 黄岩 张圣明 徐群渊 张启东 李锋杰 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期123-126,共4页
本研究采用免疫细胞化学方法和形态计量学技术，观察了由6－OHDA单侧微量注射制成的帕金森病大鼠纹状体头部P物质神经元和体部GABA能神经元的变化，以及黑质网状部突触岛内P物质终末数和GABA终末数及终未总数的改变，以探讨神经递质在... 本研究采用免疫细胞化学方法和形态计量学技术，观察了由6－OHDA单侧微量注射制成的帕金森病大鼠纹状体头部P物质神经元和体部GABA能神经元的变化，以及黑质网状部突触岛内P物质终末数和GABA终末数及终未总数的改变，以探讨神经递质在帕金森病发病中的作用。结果显示：6－OHDA注射侧纹状体面积、纹状体P物质神经元和GABA能神经元数量均较正常对照侧明显减少；注射侧黑质网状部突触岛单位树突膜长度内终末总数较正常侧减少54％；P物质终末数和GABA终末数亦分别减少44％和33％。本研究表明帕金森病大鼠黑质与纹状体之间团有的神经递质失衡，这可能是帕金森病发病的重要因素之一。 展开更多
关键词 突触岛 免疫细胞化学 帕金森病 纹状体 大鼠
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外源性Nurr1基因过表达增强SK-N-SH细胞对神经毒素6-OHDA敏感性的研究 被引量：3
2
作者 刘扬 赵咏梅 +2 位作者 张海燕 李卫红 徐群渊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1171-1176,共6页
目的 通过比较自身不表达Nurrl基因的人神经母细胞瘤细胞SK—N—SH和过表达外源性Null基因的SK—N—SH／Nurrl细胞对神经毒素6-羟多巴胺（6-OHDA）损伤的敏感程度，探讨Null基因与6一OHDA引起的多巴胺（DA）能神经元特异性损伤的相关性... 目的 通过比较自身不表达Nurrl基因的人神经母细胞瘤细胞SK—N—SH和过表达外源性Null基因的SK—N—SH／Nurrl细胞对神经毒素6-羟多巴胺（6-OHDA）损伤的敏感程度，探讨Null基因与6一OHDA引起的多巴胺（DA）能神经元特异性损伤的相关性。方法①绘制SK—N—SH细胞及SK—N—SH／Nurrl细胞的生长曲线，比较外源性Null基因过表达对细胞增殖率的影响。②用不同浓度的6-OHDA（5—100μmol·L^-1）分别作用两株细胞1—24h，倒置相差显微镜下观察细胞形态变化，MTT测定法比较两株细胞的存活率。③用75μmol·L^-1的6-OHDA作用12h，经Hoechst33342染色，荧光显微镜观察细胞核形态，比较两株细胞的凋亡情况。结果①生长曲线结果显示，SK—N—SH／Null细胞增殖数目低于SK—N—SH细胞一②MTT结果显示，6-OHDA对两株细胞的存活均有抑制作用，但SK—N—SH／Null细胞存活率下降更为明显。③Hoechst33342染色结果显示，用75μmol·L^-1的6-OHDA作用12h后SK—N—SH细胞核没有出现明显的凋亡形态改变，而部分SK—N—SH／Null细胞的细胞核出现了染色质凝聚、碎裂等凋亡形态改变，比例约为22％-24％。结论外源性Null基因过表达抑制SK—N—SH细胞增殖，增强SK—N—SH细胞对6-OHDA的敏感性并有可能促进6-OHDA诱导的细胞凋亡。Null基因可能作为易感因子参与多巴胺能神经元的特异性损伤。 展开更多
关键词 NULL 过表达 6-OHDA 凋亡
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人神经前体细胞分化过程中p27^(Kip1)的作用及其调节机制研究 被引量：1
3
作者 许秋岩 张海燕 +3 位作者 李卫红 刘扬 徐群渊 赵咏梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1011-1014,共4页
目的研究视黄酸(RA)诱导人神经前体细胞(hNPCs)分化的过程中,细胞周期调节蛋白p27Kip1的变化及其调节机制,以掌握hNPCs的增殖分化特性。方法取原代hNPCs体外培养,在细胞进入对数生长期时给予RA诱导,在诱导d3、5、7收集细胞,用流式细胞... 目的研究视黄酸(RA)诱导人神经前体细胞(hNPCs)分化的过程中,细胞周期调节蛋白p27Kip1的变化及其调节机制,以掌握hNPCs的增殖分化特性。方法取原代hNPCs体外培养,在细胞进入对数生长期时给予RA诱导,在诱导d3、5、7收集细胞,用流式细胞分析术观察细胞周期的变化、用Westernblot法观察p27Kip1及其相关的细胞周期调节蛋白p21Cip1、cdk2的变化,以及参与p27Kip1泛素-蛋白酶降解途径的重要因子skp2的变化。结果RA诱导d3,hNPCs细胞G0/G1期的比例由诱导前的65.20%上升至80.72%;而S期的比例由诱导前的28.39%下降到8.62%;p27Kip1蛋白表达在RA诱导d3增加,并在d5达到高峰;p21Cip1和cdk2的表达在RA诱导前后变化不明显,但反映cdk2活性的p-cdk2蛋白的表达在RA诱导后明显下降;skp2的表达在RA诱导后明显下降。结论在RA诱导hNPCs分化的过程中,p27Kip1蛋白泛素降解途径受阻,致使其含量增加,并通过抑制cdk2的活性而发挥了促进hNPCs分化的作用。 展开更多
关键词 P27KIP1 人神经前体细胞 RA 神经元分化
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氧化过氧化反应结合法显示单胺氧化酶阳性神经元的研究
4
作者 鲁强 赵春礼 张国风 《首都医学院学报》 1992年第2期92-96,共5页
以氧化过氧化反应结合法显示中枢神经系统内单胺氧化酶(MAO)阳性神经元,在显示胞体、突起和纤维走行的清晰程度上优于四唑盐法。利用Clorgyline和Deprenyl分别抑制A型和B型MAO,可以选择性显示两种不同类型MAO在中枢的分布。本研究还探... 以氧化过氧化反应结合法显示中枢神经系统内单胺氧化酶(MAO)阳性神经元,在显示胞体、突起和纤维走行的清晰程度上优于四唑盐法。利用Clorgyline和Deprenyl分别抑制A型和B型MAO,可以选择性显示两种不同类型MAO在中枢的分布。本研究还探讨了孵育液内HRP和盐酸酪胺浓度与呈色反应的关系。 展开更多
关键词 抑制剂 组织化学 单胺氧化酶
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p27^Kip1在RA诱导人神经前体细胞分化中的作用 被引量：3
5
作者 许秋岩 赵咏梅 +4 位作者 王一松 李卫红 刘扬 徐群渊 张海燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期219-222,共4页
目的观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用。方法取12wk的人胚胎前脑纹... 目的观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用。方法取12wk的人胚胎前脑纹状体,原代培养人神经前体细胞。在细胞进入对数生长期时给予1μmol·L-1RA诱导。在诱导的d1、3、7,用相差显微镜观察细胞形态的变化;用免疫细胞化学染色、RT-PCR等方法检测p27Kip1、p21Cip1及其相关的cdk2、cyclinE的变化。结果在RA诱导d3,人神经前体细胞形态发生变化,至d7时已接近成熟神经元形态。免疫细胞化学染色结果显示p27Kip1的表达在RA诱导d3增加,在RA诱导d7时明显增加,与未经RA诱导的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,p27Kip1 mRNA的表达在RA诱导d3增加,并在RA诱导d5达到高峰,而p21Cip1 mRNA的表达在RA诱导后略呈下降趋势。cdk2、cy-clinE的mRNA水平在RA诱导前后没有明显变化。结论p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中具有重要作用,并且其表达增加是通过转录水平调节的。 展开更多
关键词 P27^KIP1 人神经前体细胞 RA 神经元分化
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脑源性神经营养因子在脑室注射脂多糖大鼠黑质多巴胺能神经元变性中的作用 被引量：3
6
作者 赵咏梅 吕风月 徐群渊 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第5期648-652,共5页
目的观察脑室内注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对大鼠黑质多巴胺能神经元的长时程毒性作用,探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在黑质多巴胺能神经元慢性变性过程中的作用。方法健康雄性SD大鼠48只,... 目的观察脑室内注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对大鼠黑质多巴胺能神经元的长时程毒性作用,探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在黑质多巴胺能神经元慢性变性过程中的作用。方法健康雄性SD大鼠48只,采用抽签法将大鼠随机分为LPS实验组和0.9%氯化钠注射液(NS)对照组,经大鼠右侧脑室一次性注射LPS20μL(1.25g/L)或0.9%氯化钠注射液20μL。给药后2周、4周、12周、24周用酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组织化学染色观察黑质多巴胺能神经元的变化,免疫组化及酶联免疫吸附实验(enzyme immunoassay system,ELISA)检测黑质纹状体系统BDNF表达的变化。结果①TH免疫组织化学染色结果显示,大鼠黑质多巴胺能神经元数目在LPS给药后期减少,24周时LPS实验组大鼠黑质TH阳性神经元数量为NS对照组的75.4%(P<0.01);②BDNF免疫组化结果显示,LPS实验组大鼠4周时黑质部位BDNF阳性细胞的表达较NS对照组高,而到12周和24周时其表达比NS对照组明显下降。ELISA检测结果显示,LPS实验组大鼠4周时黑质纹状体内BDNF表达是NS对照组的186.3%(P<0.01),而12周和24周时分别是NS对照组的42.3%(P<0.01)和61.0%(P<0.05)。结论脑室内注射LPS可导致大鼠黑质多巴胺能神经元变性,这一病变过程呈慢性迟发性。该模型大鼠黑质TH阳性神经元变性丢失前即出现黑质纹状体系统BDNF表达减少,提示BDNF表达减少可能是黑质多巴胺能神经元变性丢失的原因之一。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 多巴胺能神经元 变性 脂多糖 大鼠
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冰冻保存肾上腺髓质组织适宜条件的研究
7
作者 张国风 王红 +5 位作者 王元身 鲁强 焦守恕 王卫 李楠 蔡青 《首都医学院学报》 1989年第2期101-105,共5页
研究了冷冻溶液种类、冰冻速率、组织块体积、保护剂种类、储存时间及从动物死亡至冰冻储存的时间间隔对冰冻后肾上腺髓质组织存活的影响。证实冰冻速率、冷冻溶液和保护剂种类与冰冻储存的肾上腺髓质组织的存活紧密相关。用羊水为冷冻... 研究了冷冻溶液种类、冰冻速率、组织块体积、保护剂种类、储存时间及从动物死亡至冰冻储存的时间间隔对冰冻后肾上腺髓质组织存活的影响。证实冰冻速率、冷冻溶液和保护剂种类与冰冻储存的肾上腺髓质组织的存活紧密相关。用羊水为冷冻溶液、DMSO作保护剂,以1～2C/min的速率冰冻可获得最好结果。 展开更多
关键词 冰冻 肾上腺髓质 保护剂 储存
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GDNF在人脑胶质瘤细胞中表达的检测及其cDNA的克隆
8
作者 段德义 孙成三 +3 位作者 杨有文 于凤山 张进禄 徐群渊 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期6-10,共5页
为研究人脑胶质细胞源性神经营养因子在脑胶质瘤中的表达及其在治疗神经系统疾病中的作用 ,本研究克隆了其前体蛋白及其成熟多肽的 c DNA序列 ,将之用于真核及原核细胞表达。提取我国自建的脑胶质瘤细胞系 BT32 5总 RNA,设计两对引物用... 为研究人脑胶质细胞源性神经营养因子在脑胶质瘤中的表达及其在治疗神经系统疾病中的作用 ,本研究克隆了其前体蛋白及其成熟多肽的 c DNA序列 ,将之用于真核及原核细胞表达。提取我国自建的脑胶质瘤细胞系 BT32 5总 RNA,设计两对引物用逆转录 PCR法扩增上述两种长度的 c DNA片段 ,然后重组于 p GEM-T载体 ,酶切鉴定插入片段正确后测序。结果表明 ,脑胶质瘤细胞中只扩增出 5 5 8bp的胶质细胞源性神经营养因子全长 c DNA片段 ,未见 6 36 bp片段 ;且扩增效率较成熟多肽 c DNA甚低。提示 ,该细胞合成的胶质细胞源性神经营养因子可能还存在不含有信号肽而只能在细胞内潴留的成熟多肽形式。作为自泌性生长因子 ,它可能调节瘤细胞生长等生物学行为 ;同时克隆到的胶质细胞源性神经营养因子全长及其成熟多肽的 c DNA片段 。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 基因克隆 RT-PCR DNA序列分析 胶质瘤细胞
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人酪氨酸羟化酶全长及催化核心序列的克隆与表达
9
作者 熊英 刘华 +3 位作者 于培兰 张澄波 杨慧 徐群渊 《首都医科大学学报》 CAS 2000年第4期277-280,共4页
设计合成含适当酶切位点的PCR引物 ,以人的全长THcDNA为模板 ,进行PCR扩增反应 ,得到人酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase,TH)全长及催化核心序列 ,将其分别插入谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)融合表达载体pGEX 4T 1 ,转化入大肠杆菌BL2 1 ,... 设计合成含适当酶切位点的PCR引物 ,以人的全长THcDNA为模板 ,进行PCR扩增反应 ,得到人酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase,TH)全长及催化核心序列 ,将其分别插入谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)融合表达载体pGEX 4T 1 ,转化入大肠杆菌BL2 1 ,以IPTG诱导表达 ,SDS PAGE、westernblotting分析表达产物。结果获得了编码N 端缺失 1 4 5个氨基酸的酪氨酸羟化酶催化结构域的cDNA片段及带一定内切酶识别位点的全长片段 ,表达载体构建正确。插入片段序列与人THmRNA相应序列完全一致。转入重组质粒的菌经诱导后 ,有相对分子质量约为 8.3万及 6.6万的外源融合蛋白表达 。 展开更多
关键词 酪氨酸羟化酶 表达 催化核心 全长序列
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EPI弥散加权成像在诊断颅内表皮样囊肿中的价值 被引量：3
10
作者 艾林 戴建平 +2 位作者 高培毅 朱明旺 李少武 《中国临床医学影像杂志》 CAS 2001年第1期1-3,共3页
目的：评价应用 EPI技术行弥散加权成像在诊断颅内表皮样囊肿中的作用。方法：对 15例经术后病理证实为颅内表皮样囊肿和 1例术后证实为蛛网膜囊肿的病人行常规 MRI和弥散加权成像。结果：所有表皮样囊肿在弥散加权成像上均表现为高信... 目的：评价应用 EPI技术行弥散加权成像在诊断颅内表皮样囊肿中的作用。方法：对 15例经术后病理证实为颅内表皮样囊肿和 1例术后证实为蛛网膜囊肿的病人行常规 MRI和弥散加权成像。结果：所有表皮样囊肿在弥散加权成像上均表现为高信号，蛛网膜囊肿在弥散加权成像上成低信号。结论： EPI弥散加权成像对诊断表皮样囊肿有价值。 展开更多
关键词 表皮囊肿 磁共振成像 颅内肿瘤 诊断 EPI弥散
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