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氨溴索对α-突触核蛋白寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5损伤的预防作用观察
1
作者
郑淑荣
杨巍巍
+1 位作者
高华
杜婷婷
《山东医药》
CAS
2023年第21期1-4,共4页
目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,...
目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,C组细胞加入终浓度为100μmol/L的AMB,D组细胞先加入终浓度为100μmol/L的AMB预处理12 h后再加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体。各组继续培养24 h后,采用ELISA法测算细胞β-葡萄糖脑苷脂酶(GCase)活性和α-syn寡聚体水平,采用MTT法检测细胞增殖能力(以OD_(450)值表示),使用JC-1探针检测线粒体膜电位,采用Western Blotting法检测酪氨酸羟化酶(TH)磷酸化水平。结果B组细胞GCase活性均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞GCase活性均高于其余三组(P均<0.05)。B组细胞中α-syn寡聚体水平均高于其余三组(P均<0.05),C组细胞中α-syn寡聚体水平均低于其余三组(P均<0.05)。与A组相比,B组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05),D组细胞培养72 h的OD_(450)值降低(P<0.05);与B组相比,C、D组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均升高(P均<0.05);与C组相比,D组细胞培养24、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05)。B组细胞线粒体膜电位均低于其余三组(P均<0.05),D组细胞线粒体膜电位均低于A、C组(P均<0.05)。B组细胞TH磷酸化水平均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞TH磷酸化水平均高于其余三组(P均<0.05)。结论AMB可通过升高GCase活性、降低α-syn寡聚体水平,恢复MES23.5细胞增殖能力、线粒体膜电位、TH磷酸化水平,对α-syn寡聚体诱导的细胞损伤起预防作用。
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关键词
帕金森病
氨溴索
β-葡萄糖脑苷脂酶
α-突触核蛋白寡聚体
鼠多巴胺能神经元细胞株
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职称材料
O^6-环己基甲基鸟嘌呤对垂体瘤细胞系MMQ细胞增殖、凋亡、周期的影响及其机制
被引量：
1
2
作者
赵丽红
李振业
高华
《山东医药》
CAS
2019年第30期17-20,共4页
目的 观察不同浓度O6-环己基甲基鸟嘌呤对垂体瘤细胞系MMQ细胞增殖、凋亡、周期的影响,并探讨其可能机制.方法 取对数生长期MMQ细胞2 mL,接种于6孔板中.加入0.4、4μmol的O6-环己基甲基鸟嘌呤和二甲基亚砜(分别计为A、B、C组).细胞增殖...
目的 观察不同浓度O6-环己基甲基鸟嘌呤对垂体瘤细胞系MMQ细胞增殖、凋亡、周期的影响,并探讨其可能机制.方法 取对数生长期MMQ细胞2 mL,接种于6孔板中.加入0.4、4μmol的O6-环己基甲基鸟嘌呤和二甲基亚砜(分别计为A、B、C组).细胞增殖实验检测细胞OD490值,流式细胞技术测算细胞Annexin V阳性百分数、PI阳性百分数及S期、G1期细胞比例,蛋白印迹实验检测细胞Cdk2、p21、p27蛋白.结果 与C组比较,A、B组培养24、48、72 h的OD490值降低(P均<0.05).与C组比较,A组Annexin V阳性百分数、PI阳性百分数升高(P均<0.05);与B组比较,A组Annexin V阳性百分数降低(P均<0.05).与C组比较,A、B组S期细胞比例降低,G1期细胞比例升高(P均<0.05).与C组比较,A、B组Cdk2蛋白表达降低,A组p27蛋白表达升高(P均<0.05);与B组比较,A组Cdk2蛋白表达升高,p21蛋白、p27蛋白表达降低(P均<0.05).结论 O6-环己基甲基鸟嘌呤可抑制MMQ细胞增殖,诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞在G1期,4μmol较0.4μmol效果更为明显,机制可能与其可抑制CDK2蛋白表达有关.
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关键词
O6-环己基甲基鸟嘌呤
MMQ细胞
细胞周期蛋白依赖性激酶2
P21蛋白
P27蛋白
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职称材料
题名
氨溴索对α-突触核蛋白寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5损伤的预防作用观察
1
作者
郑淑荣
杨巍巍
高华
杜婷婷
机构
北京市神经外科研究所
中心实验
室
首都医科大学宣武医院
神经
生物
学
研究
室
北京市神经外科研究所细胞生物室
北京市神经外科研究所
功能
神经
外科
研究
室
出处
《山东医药》
CAS
2023年第21期1-4,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(82101514)
中国博士后科学基金资助项目(2018T110120)。
文摘
目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,C组细胞加入终浓度为100μmol/L的AMB,D组细胞先加入终浓度为100μmol/L的AMB预处理12 h后再加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体。各组继续培养24 h后,采用ELISA法测算细胞β-葡萄糖脑苷脂酶(GCase)活性和α-syn寡聚体水平,采用MTT法检测细胞增殖能力(以OD_(450)值表示),使用JC-1探针检测线粒体膜电位,采用Western Blotting法检测酪氨酸羟化酶(TH)磷酸化水平。结果B组细胞GCase活性均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞GCase活性均高于其余三组(P均<0.05)。B组细胞中α-syn寡聚体水平均高于其余三组(P均<0.05),C组细胞中α-syn寡聚体水平均低于其余三组(P均<0.05)。与A组相比,B组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05),D组细胞培养72 h的OD_(450)值降低(P<0.05);与B组相比,C、D组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均升高(P均<0.05);与C组相比,D组细胞培养24、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05)。B组细胞线粒体膜电位均低于其余三组(P均<0.05),D组细胞线粒体膜电位均低于A、C组(P均<0.05)。B组细胞TH磷酸化水平均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞TH磷酸化水平均高于其余三组(P均<0.05)。结论AMB可通过升高GCase活性、降低α-syn寡聚体水平,恢复MES23.5细胞增殖能力、线粒体膜电位、TH磷酸化水平,对α-syn寡聚体诱导的细胞损伤起预防作用。
关键词
帕金森病
氨溴索
β-葡萄糖脑苷脂酶
α-突触核蛋白寡聚体
鼠多巴胺能神经元细胞株
Keywords
Parkinson's disease
ambroxol
β-glucocerebrosidase
α-synuclein oligomer
mouse dopaminergic neuronal cells
分类号
R741.05 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
O^6-环己基甲基鸟嘌呤对垂体瘤细胞系MMQ细胞增殖、凋亡、周期的影响及其机制
被引量：
1
2
作者
赵丽红
李振业
高华
机构
首都医科大学附属
北京
妇产医院
北京市神经外科研究所细胞生物室
出处
《山东医药》
CAS
2019年第30期17-20,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(81601205)
北京市卫计委高层次人才—学术骨干(2015-3-040)
文摘
目的 观察不同浓度O6-环己基甲基鸟嘌呤对垂体瘤细胞系MMQ细胞增殖、凋亡、周期的影响,并探讨其可能机制.方法 取对数生长期MMQ细胞2 mL,接种于6孔板中.加入0.4、4μmol的O6-环己基甲基鸟嘌呤和二甲基亚砜(分别计为A、B、C组).细胞增殖实验检测细胞OD490值,流式细胞技术测算细胞Annexin V阳性百分数、PI阳性百分数及S期、G1期细胞比例,蛋白印迹实验检测细胞Cdk2、p21、p27蛋白.结果 与C组比较,A、B组培养24、48、72 h的OD490值降低(P均<0.05).与C组比较,A组Annexin V阳性百分数、PI阳性百分数升高(P均<0.05);与B组比较,A组Annexin V阳性百分数降低(P均<0.05).与C组比较,A、B组S期细胞比例降低,G1期细胞比例升高(P均<0.05).与C组比较,A、B组Cdk2蛋白表达降低,A组p27蛋白表达升高(P均<0.05);与B组比较,A组Cdk2蛋白表达升高,p21蛋白、p27蛋白表达降低(P均<0.05).结论 O6-环己基甲基鸟嘌呤可抑制MMQ细胞增殖,诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞在G1期,4μmol较0.4μmol效果更为明显,机制可能与其可抑制CDK2蛋白表达有关.
关键词
O6-环己基甲基鸟嘌呤
MMQ细胞
细胞周期蛋白依赖性激酶2
P21蛋白
P27蛋白
Keywords
O6-cyclohexylmethylguanine
MMQ cells
cyclin dependent kinase
p21 protein
p27 protein
分类号
R736.4 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
氨溴索对α-突触核蛋白寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5损伤的预防作用观察
郑淑荣
杨巍巍
高华
杜婷婷
《山东医药》
CAS
2023
0
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职称材料
2
O^6-环己基甲基鸟嘌呤对垂体瘤细胞系MMQ细胞增殖、凋亡、周期的影响及其机制
赵丽红
李振业
高华
《山东医药》
CAS
2019
1
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