体外培养的中枢神经细胞的“缺血”性损害 被引量：21

1

作者 王天佑 阎军 +2 位作者 彭亮 梁实 徐立新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第5期293-297,共5页

用8天鸡胚大脑半球进行分散神经细胞培养,培养6天时神经细胞占83%。此时将培养液换为不含葡萄糖的Earle氏缓冲盐水,置95%氮与5%CO_2中1—4小时,可以观察到神经细胞肿胀,失去折光性,台盼蓝着染比例增加,乳酸脱氢酶(LDH)漏出加快,γ-氨基... 用8天鸡胚大脑半球进行分散神经细胞培养,培养6天时神经细胞占83%。此时将培养液换为不含葡萄糖的Earle氏缓冲盐水,置95%氮与5%CO_2中1—4小时,可以观察到神经细胞肿胀,失去折光性,台盼蓝着染比例增加,乳酸脱氢酶(LDH)漏出加快,γ-氨基丁酸(GABA)高亲和摄取能力下降。其中GABA摄取较早表现出严重变化。若孵育液中含糖缺氧,或有氧无糖,均不产生明显的变化。上述结果类似整体动物脑缺血后的神经细胞变化,故这一体外模型可用来研究缺血性中枢神经细胞损伤,损伤后恢复及药物的保护作用。 展开更多

关键词 脑缺血 神经元 培养基 体外

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实验性脑缺血某些细胞化学变化的电镜研究 被引量：3

2

作者 孙异临 周小宁 +5 位作者 王天佑 李桂林 胡予 曲宝清 李燕兵 李柏 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期134-136,T000,共4页

本文利用电子显微镜及细胞化学技术研究了沙土鼠脑缺血后不同时间海马组织中钙在亚细胞定位分布的变化。实验结果显示:缺血5分钟后最早期的变化为星形细胞突起水肿,以毛细血管周围细胞水肿最明显,细胞内钙分布未见异常变化;缺血30分钟... 本文利用电子显微镜及细胞化学技术研究了沙土鼠脑缺血后不同时间海马组织中钙在亚细胞定位分布的变化。实验结果显示:缺血5分钟后最早期的变化为星形细胞突起水肿,以毛细血管周围细胞水肿最明显,细胞内钙分布未见异常变化;缺血30分钟组多数神经细胞固缩,细胞胞浆、胞核及线粒体内有大量钙沉积,钙的蓄积程度与细胞损伤程度一致。实验提示、脑缺血早期的细胞毒性水肿与钙分布的变化无关,但随后由于钙内流,对细胞产生毒性作用而破坏细胞结构的完整性。本文证明,在这类研究中应用草酸——焦锑酸钾电镜细胞化学技术可以显示形态学与机能科学结合起来的优越性。 展开更多

关键词 电子显微镜 细胞化学 脑缺血

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神经酰胺对小鼠皮层神经元乳酸脱氢酶代谢的影响

3

作者 脱厚珍 王天佑 +1 位作者 薛启冥 王得新 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第3期184-186,共3页

目的研究神经酰胺对小鼠皮层神经元乳酸脱氢酶(LDH)代谢的影响。方法在培养的小鼠皮层神经元上清中分别加入50、100、200、500、1000、2000nmol/L的神经酰胺,分别作用0、1、4、8、12、16、24、36h,测定LDH浓度,计算其代谢率和漏出率。... 目的研究神经酰胺对小鼠皮层神经元乳酸脱氢酶(LDH)代谢的影响。方法在培养的小鼠皮层神经元上清中分别加入50、100、200、500、1000、2000nmol/L的神经酰胺,分别作用0、1、4、8、12、16、24、36h,测定LDH浓度,计算其代谢率和漏出率。结果可显著改变乳酸脱氢酶(LDH)在细胞内外的分布,随神经酰胺作用时间的延长或剂量的增加,细胞外LDH含量显著升高,但神经酰胺对细胞总LDH代谢无影响。结论神经酰胺可增加LDH漏出率,但对细胞总LDH代谢无影响。 展开更多

关键词 神经酰胺类 L-乳酸脱氢酶 神经元

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胶质母细胞瘤患者血浆胰岛素样生长因子结合蛋白-2影响因素研究

4

作者 徐丽 崔云 +1 位作者 李桂林 江涛 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第33期3728-3730,共3页

目的探讨胶质母细胞瘤组织胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)表达和肿瘤侵袭性对患者血浆IGFBP-2表达水平的影响。方法应用ELISA法检测43例胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2表达水平;应用免疫组化技术检测上述患者肿瘤组织IGFBP-2和基质... 目的探讨胶质母细胞瘤组织胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)表达和肿瘤侵袭性对患者血浆IGFBP-2表达水平的影响。方法应用ELISA法检测43例胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2表达水平;应用免疫组化技术检测上述患者肿瘤组织IGFBP-2和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达情况;IGFBP-2以肿瘤细胞阳性与否分为两个水平("1"和"2"),MMP-9以肿瘤细胞阳性率"≤60%"和">60%"分为两个水平("1"和"2"),对患者血浆IGFBP-2表达水平进行2×2析因分析。结果胶质母细胞瘤患者肿瘤组织IGFBP-2、MMP-9表达(P=0.003、P=0.014)及二者的交互效应(P=0.049)均能影响患者血浆IGFBP-2水平。结论胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2水平受肿瘤组织IGFBP-2表达、肿瘤侵袭性及其交互效应的影响。 展开更多

关键词 脑胶质母细胞瘤 胰岛素样生长因子结合蛋白-2 基质金属蛋白酶9

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一种新的实验性脊髓损伤中枢性疼痛动物模型的建立 被引量：9

5

作者 戴红 肖忠新 +5 位作者 胥少汀 陈迎朝 张立仁 谢作磊 王元身 戴珂 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期18-21,共4页

目的 :研究脊髓损伤 (spinalcordinjury ,SCI)中枢性疼痛 (centralpain ,CP)的发生机制以寻找治疗的根本方法。方法 :选用成年Wistar雌性大鼠 3 0只 ,分为两组 (X1,X2 组 )。用WADE法造成脊髓L2阶段的 3 0 0gcm (X1)和 2 0 0 gcm (X2 )... 目的 :研究脊髓损伤 (spinalcordinjury ,SCI)中枢性疼痛 (centralpain ,CP)的发生机制以寻找治疗的根本方法。方法 :选用成年Wistar雌性大鼠 3 0只 ,分为两组 (X1,X2 组 )。用WADE法造成脊髓L2阶段的 3 0 0gcm (X1)和 2 0 0 gcm (X2 )的损伤 ,损伤前后分别在L1阶段记录刺激胫神经引起的体感诱发电位。于术前和术后 4、8、12、16、2 4h、每天用VonFreyHair等测定大鼠的对机械性轻压、轻触损伤近端躯体的痛反应阈及前足 5 0 %抬足率的阈值的变化 ,并观察大鼠自发痛的行为学变化。结果 :两组均出现了典型的急慢性痛超敏现象 (手术前后痛阈值的比较具有显著或非常显著性差异 ,P <0 .0 5— 0 .0 1)和自发痛现象 ,其中X1组与X2 组比较 ,严重自发痛 (自噬 )的发生比例更高 ,而且重复性好 ,与人类SCI的CP中以自发痛为主要痛苦的情况相一致。结论 :用WADE法造成大鼠3 0 0 gcm的SCI是重复性好且与人类SCI的CP最接近的SCI的CP的动物模型。 展开更多

关键词 脊髓损伤 中枢性疼痛 动物模型 WADE法 SCI CP

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胶质瘤组织MGMT和Ki-67表达对患者预后的影响 被引量：10

6

作者 徐丽 崔云 +1 位作者 李桂林 江涛 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第3期285-288,共4页

目的研究胶质瘤组织MGMT和Ki-67的表达,探讨其对患者预后的影响。方法总结79例脑胶质瘤患者的性别、年龄、术前Karnofsky评分、无进展生存期和生存期等;将患者手术切除标本石蜡切片进行Ki-67和MGMT的免疫组化染色,计算染色阳性率;多元... 目的研究胶质瘤组织MGMT和Ki-67的表达,探讨其对患者预后的影响。方法总结79例脑胶质瘤患者的性别、年龄、术前Karnofsky评分、无进展生存期和生存期等;将患者手术切除标本石蜡切片进行Ki-67和MGMT的免疫组化染色,计算染色阳性率;多元逐步回归分析法判断Ki-67和MGMT的表达与患者无进展生存时间及生存时间的关系。MGMF表达情况与患者无进展生存期及生存期的关系用Kaplan-meier生存曲线表示,并采用log-rank方法分析。结果患者性别、年龄、术前Karnofsky评分及Ki-67阳性率与无进展生存期和生存期无相关性(P>0.05)。MGMT阳性率与无进展生存期呈负相关(r=0.074,P<0.05),与生存期呈负相关(r=-0.127,P<0.001)。将所有患者分为MGMT指数≤15%和MGMT指数>15%2组,无进展生存期对比,差异有统计学意义(P<0.05),生存期对比差异有统计学意义(P=0.001)。结论胶质瘤中Ki-67表达与肿瘤预后无关,MGMT表达与肿瘤预后有关,MGMT检测对胶质瘤预后判断可能有指导意义。 展开更多

关键词 胶质瘤 MGMT KI-67 免疫组化

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MAPKs信号通路干预对体外培养大鼠星形胶质细胞划痕损伤后水通道蛋白4表达的影响 被引量：5

7

作者 师忠芳 赵焕英 +2 位作者 袁芳 韩明 路杨 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第2期228-232,共5页

目的研究体外培养大鼠星形胶质细胞划痕损伤后水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达变化,并观察丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号通路特异性抑制剂对此变化的影响。方法利用传代培养10d左右的大鼠星形胶... 目的研究体外培养大鼠星形胶质细胞划痕损伤后水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达变化,并观察丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号通路特异性抑制剂对此变化的影响。方法利用传代培养10d左右的大鼠星形胶质细胞制作划痕损伤模型,部分实验于划痕损伤前1h分别加入ERK抑制剂U0126,p38MAPK抑制剂SB203580及JNK抑制剂SP600125。观察细胞形态变化、GFAP免疫细胞化学染色变化,并用实时荧光定量PCR法检测AQP4mRNA表达变化。结果划痕损伤后12h,细胞形态由扁平形变为不规则形,部分细胞突起向划痕区伸出,划痕区出现GFAP免疫化学染色阳性细胞,AQP4mRNA表达水平明显降低(P<0.05),而U0126,SB203580和SP600125预处理均能阻止此种变化(P<0.05)。结论划痕损伤引起培养星形胶质细胞AQP4mRNA表达下调,MAPKs抑制剂可对抗此作用,提示MAPKs信号通路参与星形胶质细胞损伤后AQP4表达变化的调节。 展开更多

关键词 星形胶质细胞 水通道蛋白4 划痕损伤模型 丝裂原活化蛋白激酶

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大鼠脑外伤诱导水通道蛋白4表达增强加重脑水肿 被引量：24

8

作者 张琳 袁芳 《首都医科大学学报》 CAS 2008年第6期732-736,共5页

目的探讨大鼠外伤性脑水肿组织水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的表达变化及其与血-脑脊液屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的关系。方法SD大鼠94只,用随机数字表法分为脑外伤组(包括脑外伤后1、6、24、48和168 h)、假手术对照组及... 目的探讨大鼠外伤性脑水肿组织水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的表达变化及其与血-脑脊液屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的关系。方法SD大鼠94只,用随机数字表法分为脑外伤组(包括脑外伤后1、6、24、48和168 h)、假手术对照组及空白组。复制大鼠自由落体脑损伤模型,用干质量湿质量法测定脑组织水含量,用IgG免疫组化染色法检测血-脑脊液屏障通透性的变化,用免疫组化染色法及Western blotting法检测神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和AQP4蛋白的表达并进行图像分析。结果大鼠脑外伤后,损伤侧脑组织水含量较假手术组增加,6 h时差异有统计学意义,24 h达高峰。与假手术组比较损伤侧脑组织IgG漏出在外伤后1 h差异有统计学意义,6 h达高峰。免疫组化染色显示损伤周围处星形胶质细胞上AQP4的分布极性发生改变,不仅毛细血管周围的星形胶质细胞足突上AQP4表达增加,而且星形胶质细胞胞体亦出现AQP4表达。AQP4表达变化的时间与脑组织水含量变化一致,晚于IgG漏出的变化。损伤周围处GFAP在损伤后1 h～7d表达持续增强。结论大鼠脑损伤后先出现BBB通透性增加,并引起AQP4表达增加,二者均促进了脑水肿的发生。 展开更多

关键词 脑外伤 脑水肿 水通道蛋白4 血-脑脊液屏障

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缺血性脑卒中大鼠肠黏膜的损害及小肠运动功能障碍 被引量：4

9

作者 啜佳然 朱玉群 +3 位作者 徐立新 袁芳 徐有青 王晨 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期310-314,共5页

目的观察缺血性脑卒中大鼠肠黏膜形态学改变及小肠动力变化,探讨二者之间的关系。方法 48只雄性健康Wistar大鼠分为2组,假手术对照组和缺血性脑卒中模型组,模型组又根据实验终止时间分为5个亚组,每组动物8只。采用改良的Longa线栓法建... 目的观察缺血性脑卒中大鼠肠黏膜形态学改变及小肠动力变化,探讨二者之间的关系。方法 48只雄性健康Wistar大鼠分为2组,假手术对照组和缺血性脑卒中模型组,模型组又根据实验终止时间分为5个亚组,每组动物8只。采用改良的Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。分别于缺血后3h、6h、12h、24h、48h进行光镜及电镜下小肠黏膜病理变化的研究以及利用亚甲蓝染色法检测小肠推进比。结果 MCAO组的小肠推进比与对照组相比显著减低,差异有统计学意义(P<0.05),3h组与6h组比较差异有统计学意义(P<0.01),6h组与12h组、12h组与24h组、24h组与48h组之间比较差异无统计学意义。光镜下MCAO组术后6h即可见肠绒毛肿胀、增粗、缩短,24h见绒毛顶端破损、剥脱,固有层裸露,对照组肠黏膜结构基本完整。电镜下MCAO组小肠绒毛上皮细胞内可见线粒体肿胀、嵴断裂,细胞器空泡变性,细胞间紧密连接增宽,可见凋亡细胞。结论缺血性脑卒中后可出现肠黏膜损伤和小肠动力障碍,二者的发生发展可能互为因果。 展开更多

关键词 大脑中动脉闭塞模型 肠动力 肠黏膜

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大鼠脑外伤诱导反应性星形胶质细胞表达水通道蛋白1和水通道蛋白9 被引量：4

10

作者 张琳 袁芳 《中国康复理论与实践》 CSCD 2009年第2期129-131,I0002,共4页

目的研究水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白9(AQP9)在大鼠自由落体脑损伤后的表达变化以及与脑水肿的关系。方法复制大鼠自由落体脑损伤模型,在外伤后1h、6h、24h、48h和168h用干重-湿重法测定损伤侧脑组织水含量,利用免疫组化染色和Wester... 目的研究水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白9(AQP9)在大鼠自由落体脑损伤后的表达变化以及与脑水肿的关系。方法复制大鼠自由落体脑损伤模型,在外伤后1h、6h、24h、48h和168h用干重-湿重法测定损伤侧脑组织水含量,利用免疫组化染色和Western印迹法检测AQP1和AQP9表达的变化。结果脑外伤后损伤侧脑组织水含量增加,24h达高峰,168h接近恢复。脑外伤后6h损伤周围出现AQP1和AQP9免疫染色阳性的星形胶质细胞,外伤后24h免疫染色阳性细胞数最多,且损伤周围处血管内皮细胞AQP1表达异常增加。结论脑外伤诱导AQP1和AQP9的表达,共同参与脑水肿的发展过程。 展开更多

关键词 脑损伤 脑水肿 水通道蛋白1 水通道蛋白9

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大鼠纹状体I组代谢型谷氨酸受体激动引起动物向对侧旋转 被引量：1

11

作者 袁芳 王忠诚 +2 位作者 徐立新 王天佑 张亚卓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期418-421,共4页

目的 :研究代谢型谷氨酸受体 (mGluRs)激动剂引起大鼠向对侧旋转时介导的受体亚型。方法 :大鼠纹状体内微量注射mGluRs激动剂或拮抗剂 ,观察大鼠的意识、行为变化 ,并于给药后 6h测定旋转活动。结果 :mGluRs非亚型特异的激动剂tACPD (5 ... 目的 :研究代谢型谷氨酸受体 (mGluRs)激动剂引起大鼠向对侧旋转时介导的受体亚型。方法 :大鼠纹状体内微量注射mGluRs激动剂或拮抗剂 ,观察大鼠的意识、行为变化 ,并于给药后 6h测定旋转活动。结果 :mGluRs非亚型特异的激动剂tACPD (5 0 0、10 0 0nmol)纹状体内注射引起大鼠向对侧旋转 ,mGluRs的非竞争性拮抗剂L -AP3 、竞争性拮抗剂MCPG及抑制细胞内钙释放的胆罗啉均可减轻tACPD引起的旋转。I组mGluRs的特异性激动剂DHPG (5 0 0nmol)纹状体内注射也引起大鼠向对侧旋转 ,MCPG及mGluR1的拮抗剂LY36 7385及mGluR5的拮抗剂MPEP均可拮抗DHPG引起的旋转。预先腹腔注射利血平 (5mg/kg)可阻断DHPG的作用。结论 :I组mGluRs激动引起大鼠向对侧旋转 ,此作用可能与细胞内钙释放有关及依赖于多巴胺的存在。 展开更多

关键词 代谢型谷氨酸盐类 多巴胺 大鼠 纹状体 对侧旋转 MGLURS

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腺苷酸活化蛋白激酶在星形胶质细胞中的表达

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作者 师忠芳 徐立新 +2 位作者 闫旭 董丽萍 袁芳 《中国卒中杂志》 2017年第7期604-608,共5页

目的通过检测腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)α1、α2、β1、β2、γ1及γ2亚基在培养大鼠星形胶质细胞中的表达,探讨AMPK在星形胶质细胞中以何种形式组成三聚体。方法取新生1 d的Wistar... 目的通过检测腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)α1、α2、β1、β2、γ1及γ2亚基在培养大鼠星形胶质细胞中的表达,探讨AMPK在星形胶质细胞中以何种形式组成三聚体。方法取新生1 d的Wistar大鼠脑皮层进行星形胶质细胞培养,用胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和S100β免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞。应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测培养星形胶质细胞中AMPK各亚基的表达情况。结果 GFAP和S100β细胞免疫荧光染色显示,培养细胞95%以上为免疫荧光染色阳性细胞。RT-PCR实验结果显示培养的星形胶质细胞中有AMPKα1、α2、β1、γ1及γ2亚基的特异性目的条带出现,没有AMPKβ2亚基目的条带出现;在出现的5种特异性目的条带中,AMPKα2、β1及γ1亚基目的条带表达相对较多,而AMPKα1及γ2亚基只有微弱表达。结论星形胶质细胞中AMPK由α2、β1及γ1亚基组成三聚体,在星形胶质细胞能量代谢调节中发挥重要作用。 展开更多

关键词 腺苷酸活化蛋白激酶 星形胶质细胞 细胞培养 缺血性脑损伤

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亚甲基蓝对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血脑屏障的保护作用 被引量：4

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作者 吴敏 方庆 +5 位作者 师忠芳 徐立新 董丽萍 闫旭 杨少华 袁芳 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第2期125-131,共7页

目的探讨亚甲基蓝对大鼠局灶性脑缺血再灌注引起血脑屏障破坏的保护作用。方法雄性Sprague-Dawley大鼠18只随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=6)和亚甲基蓝组(n=6)。用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉栓塞1 h再灌注模型。亚甲基蓝组于再灌... 目的探讨亚甲基蓝对大鼠局灶性脑缺血再灌注引起血脑屏障破坏的保护作用。方法雄性Sprague-Dawley大鼠18只随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=6)和亚甲基蓝组(n=6)。用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉栓塞1 h再灌注模型。亚甲基蓝组于再灌注即刻及再灌注2 h分别静脉给予亚甲基蓝3 mg/kg、1.5 mg/kg;模型组给予相同体积的生理盐水;假手术组手术操作与模型组相同,不插入线栓,不静脉注射药物。再灌注47 h后HE染色观察大鼠脑缺血周边皮层组织学结构,白蛋白免疫组化染色法检测血脑屏障通透性的变化,免疫组化染色法和免疫荧光双标染色法检测胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和水通道蛋白-4(AQP-4)的表达。结果 HE染色显示,模型组缺血周边大脑皮层的细胞和血管形态不完整,而亚甲基蓝组病理变化减轻;模型组白蛋白、GFAP和AQP-4表达均明显高于假手术组(P<0.01),亚甲基蓝组白蛋白、GFAP、AQP-4表达均低于模型组(P<0.05)。免疫荧光双标染色显示,AQP-4与GFAP在星形胶质细胞上共定位。结论亚甲基蓝可能是通过减轻胶质细胞增生及下调AQP-4表达来改善局灶性脑缺血再灌注损伤引起的血脑屏障破坏。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注 亚甲基蓝 血脑屏障 胶质原纤维酸性蛋白 水通道蛋白-4 大鼠

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人颞叶内侧癫痫海马组织星形胶质细胞Syntrophin的表达变化 被引量：2

14

作者 王晓璇 孙振荣 +6 位作者 吴敏 师忠芳 闫旭 徐立新 董丽萍 杨少华 袁芳 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第3期292-297,共6页

目的观察人颞叶内侧癫痫(MTLE)海马组织星形胶质细胞syntrophin的表达变化。方法 2015年4月至2016年7月,17例癫痫患者手术切除的海马组织,依据苏木素-伊红(HE)染色及胶质原纤维酸性蛋白、神经元核抗原免疫组织化学染色结果,分为MTLE组1... 目的观察人颞叶内侧癫痫(MTLE)海马组织星形胶质细胞syntrophin的表达变化。方法 2015年4月至2016年7月,17例癫痫患者手术切除的海马组织,依据苏木素-伊红(HE)染色及胶质原纤维酸性蛋白、神经元核抗原免疫组织化学染色结果,分为MTLE组13例和非MTLE组4例。免疫荧光双重组织化学法及免疫荧光组织化学法观察syntrophin的表达。结果 MTLE组星形胶质细胞大量增生,神经元明显减少。syntrophin在星形胶质细胞膜及足突处表达。与非MTLE组相比,MTLE组syntrophin在血管周围星形胶质细胞足突处分布减少,在其他部位分布增加。图像分析显示,与非MTLE组相比,MTLE组syntrophin蛋白量显著增多(t=5.421,P<0.001)。结论海马组织syntrophin在星形胶质细胞上的分布及其整体表达变化可能与MTLE发生相关。 展开更多

关键词 颞叶内侧癫痫 海马 星形胶质细胞 SYNTROPHIN 抗肌萎缩蛋白糖蛋白复合物

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体外培养大鼠星形胶质细胞水通道蛋白4的表达 被引量：2

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作者 徐立新 董丽萍 +3 位作者 师忠芳 闫旭 杨少华 袁芳 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第9期1051-1055,共5页

目的研究水通道蛋白4(AQP4)在体外培养大鼠星形胶质细胞中的表达规律。方法取新生1 d Wistar大鼠大脑皮层行星形胶质细胞原代培养,分别于原代培养3 d、5 d、7 d、9 d及传代培养9 d行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色;实时荧光定量聚... 目的研究水通道蛋白4(AQP4)在体外培养大鼠星形胶质细胞中的表达规律。方法取新生1 d Wistar大鼠大脑皮层行星形胶质细胞原代培养,分别于原代培养3 d、5 d、7 d、9 d及传代培养9 d行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色;实时荧光定量聚合酶链反应及AQP4免疫荧光染色检测AQP4 m RNA及蛋白的表达。结果原代及传代培养不同时间点95%以上细胞GFAP免疫荧光染色阳性,且GFAP表达量逐渐增加。原代培养3 d有AQP4 m RNA表达,3 d和5 d AQP4 m RNA表达水平无显著性差异(P>0.05),7 d AQP4 m RNA表达升高(P<0.05),9 d持续升高(P<0.05);传代培养9 d与原代培养9 d AQP4 m RNA表达无显著性差异(P>0.05)。AQP4蛋白表达与AQP4 m RNA表达一致。结论大鼠星形胶质细胞原代培养3 d即有AQP4表达,之后逐渐增加,9 d左右表达渐趋稳定。 展开更多

关键词 水通道蛋白4 星形胶质细胞 细胞培养 大鼠

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血清对大鼠星形胶质细胞形态和水通道蛋白-4表达的影响

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作者 贾梅 师忠芳 +6 位作者 王玉娇 闫旭 徐立新 董丽萍 李佳欣 陈烨 袁芳 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2018年第4期385-390,共6页

目的通过比较培养大鼠星形胶质细胞在有血清培养基和无血清培养基中的形态及水通道蛋白-4(AQP-4)表达水平,探讨血脑屏障破坏对AQP-4表达的影响。方法取雌性Wistar大鼠大脑皮层细胞,分别在无血清培养基、DMEM培养基加10%胎牛血清(FBS)及... 目的通过比较培养大鼠星形胶质细胞在有血清培养基和无血清培养基中的形态及水通道蛋白-4(AQP-4)表达水平,探讨血脑屏障破坏对AQP-4表达的影响。方法取雌性Wistar大鼠大脑皮层细胞,分别在无血清培养基、DMEM培养基加10%胎牛血清(FBS)及无血清培养基加10%FBS中培养。倒置相差显微镜观察星形胶质细胞形态和大小,细胞免疫荧光染色及逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、AQP-4及代谢型谷氨酸受体5(m Glu R5)的表达水平。结果在无血清培养基中,星形胶质细胞的细胞核和胞体小且突起细长,折光性强;而在两种添加10%FBS培养基中,星形胶质细胞呈多角扁平形且突起短小,折光性弱。细胞免疫荧光及RT-q PCR结果分析显示,两种加10%FBS培养基中星形胶质细胞GFAP和AQP-4的蛋白和m RNA表达水平均低于无血清培养基(P<0.001),而m Glu R5蛋白和m RNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论血清改变培养星形胶质细胞的形态,降低GFAP和AQP-4的表达。 展开更多

关键词 星形胶质细胞 血清 水通道蛋白-4 胶质纤维酸性蛋白 代谢型谷氨酸受体5 大鼠

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实时荧光定量PCR微卫星分析技术检测少突胶质细胞肿瘤染色体1p、19q和10q杂合性缺失

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作者 苏江 江涛 +2 位作者 孙振荣 李桂林 袁芳 《中国康复理论与实践》 CSCD 2011年第2期141-144,共4页

目的建立检测脑胶质瘤染色体1p、19q和10q杂合性缺失(LOH)的实验室新方法。方法采用Taqman探针法对38例少突胶质细胞肿瘤标本进行染色体1p、19q和10q LOH检测。结果 38例少突胶质细胞肿瘤染色体中有25例(65.7%)发生1p LOH,26例(68.4%)发... 目的建立检测脑胶质瘤染色体1p、19q和10q杂合性缺失(LOH)的实验室新方法。方法采用Taqman探针法对38例少突胶质细胞肿瘤标本进行染色体1p、19q和10q LOH检测。结果 38例少突胶质细胞肿瘤染色体中有25例(65.7%)发生1p LOH,26例(68.4%)发生19q LOH,5例(13.2%)发生10q LOH。结论实时荧光定量PCR微卫星分析技术快速、准确性高,可以用于脑胶质瘤标本染色体LOH的检测。 展开更多

关键词 少突胶质细胞瘤 杂合性缺失 聚合酶链反应

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