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趋化因子受体CXCR4小分子干扰RNA表达载体的构建及表达
1
作者
刘艳
王珑
+1 位作者
张大维
赵德明
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期992-996,共5页
目的:构建趋化因子受体CXCR4小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,研究其对CXCR4基因表达的沉默效果,探索抗人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)治疗的新途径。方法:根据软件设计针对CXCR4基因的siRNA序列,经退火成互补双链,克隆到PsilencerM3.1-H1 neo...
目的:构建趋化因子受体CXCR4小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,研究其对CXCR4基因表达的沉默效果,探索抗人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)治疗的新途径。方法:根据软件设计针对CXCR4基因的siRNA序列,经退火成互补双链,克隆到PsilencerM3.1-H1 neo载体中,经测序鉴定插入序列的正确性。转染MT4细胞后,采用RT-PCR及流式细胞仪方法检测转染siRNA质粒的实验组、转染空载体的阴性对照组和空白细胞对照组间抑制基因表达情况。结果:PCR及琼脂糖凝胶电泳检测重组质粒PsilencerM3.1-H1-siRNA neo,有正确的特异性片段,DNA测序也证明具有正确序列;该载体转染MT4细胞48 h后,能明显抑制CXCR4基因表达,其表达抑制率为70%,与空白对照组和阴性组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:成功构建趋化因子受体CXCR4的siRNA表达载体。
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关键词
受体
趋化因子
人免疫缺陷病毒1型
RNA干扰
小分子RNA
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职称材料
题名
趋化因子受体CXCR4小分子干扰RNA表达载体的构建及表达
1
作者
刘艳
王珑
张大维
赵德明
机构
中国农业大学
动物
医学院
北京市实验动物研究中心
吉林大学基础医学院
实验
动物
中心
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期992-996,共5页
基金
吉林省科技厅科研基金资助课题(吉科合字第2001007号)
文摘
目的:构建趋化因子受体CXCR4小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,研究其对CXCR4基因表达的沉默效果,探索抗人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)治疗的新途径。方法:根据软件设计针对CXCR4基因的siRNA序列,经退火成互补双链,克隆到PsilencerM3.1-H1 neo载体中,经测序鉴定插入序列的正确性。转染MT4细胞后,采用RT-PCR及流式细胞仪方法检测转染siRNA质粒的实验组、转染空载体的阴性对照组和空白细胞对照组间抑制基因表达情况。结果:PCR及琼脂糖凝胶电泳检测重组质粒PsilencerM3.1-H1-siRNA neo,有正确的特异性片段,DNA测序也证明具有正确序列;该载体转染MT4细胞48 h后,能明显抑制CXCR4基因表达,其表达抑制率为70%,与空白对照组和阴性组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:成功构建趋化因子受体CXCR4的siRNA表达载体。
关键词
受体
趋化因子
人免疫缺陷病毒1型
RNA干扰
小分子RNA
Keywords
receptor, chemokine
HIV-1
RNA interference
small interfering RNA
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
趋化因子受体CXCR4小分子干扰RNA表达载体的构建及表达
刘艳
王珑
张大维
赵德明
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
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