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马铃薯RAPD标记的PCR技术影响因素的探讨
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作者 陈绪清 柳俊 +1 位作者 郑用琏 谢从华 《中国马铃薯》 1999年第4期195-201,共7页
试验采用不同的马铃薯材料进行PCR 技术体系的研究, 建立和完善了马铃薯少量材料的DNA提取方法, 研究了PCR扩增中Mg2 + 浓度、引物和底物浓度对PCR产物的影响。试验结果表明, 在以引物为10mer 的PCR反应... 试验采用不同的马铃薯材料进行PCR 技术体系的研究, 建立和完善了马铃薯少量材料的DNA提取方法, 研究了PCR扩增中Mg2 + 浓度、引物和底物浓度对PCR产物的影响。试验结果表明, 在以引物为10mer 的PCR反应体系中, 适当提高Mg2 + 浓度(1-5 ~2-7 mM) 有利于PCR反应的进行, 而引物与底物只有在一个相对适当浓度范围内才能获得理想的结果, 过低会使扩增产物达不到可检测的水平, 过高则会影响扩增产物的特异性。本试验中引物的适宜浓度为0-8 μM, 底物为80 ~180 μM。所建立的优化马铃薯PCR 体系同样适用于水稻、玉米、番茄和油菜等作物。 展开更多
关键词 马铃薯 PCR(polymerasechainreaction) RAPD(randomlyamplifiedpolymorphicDNA)
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