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北京地区7种常见嗜尸性蝇类的COI基因序列分析及DNA条形码的建立 被引量:28
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作者 陈庆 白洁 +7 位作者 刘力 林红斌 唐晖 赵伟 周红章 严江伟 刘雅诚 胡松年 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期202-209,共8页
嗜尸性蝇类在命案死亡时间和现场推断方面有着十分重要的应用,而DNA条形编码技术能摆脱对虫卵和幼虫的饲养以及后续物种鉴定方面专业知识的依赖,有助于实现现场采集蝇类样本的快速鉴定。本研究采集了北京地区7个嗜尸性蝇类优势种共77个... 嗜尸性蝇类在命案死亡时间和现场推断方面有着十分重要的应用,而DNA条形编码技术能摆脱对虫卵和幼虫的饲养以及后续物种鉴定方面专业知识的依赖,有助于实现现场采集蝇类样本的快速鉴定。本研究采集了北京地区7个嗜尸性蝇类优势种共77个个体的样本,测定了所有个体线粒体DNA上细胞色素C氧化酶亚基I(COI)基因1 120bp的序列。基于序列的系统发生分析显示,同一物种不同个体的序列均以高达99%的支持值聚集在一起。序列间的分歧统计表明这些蝇类在物种内的个体分歧不超过1%,而不同物种间的净分歧均超过7.74%,最高可达14.85%。滑动窗口分析表明,在整个序列区段种间差异位点存在较平均的分布。通过测定COI基因的序列,建立了北京地区7个嗜尸性蝇类优势种的DNA条形码,据此实现了对这些物种准确、快速、简单的区分和鉴定,同时也为后续应用于物种鉴定的种属特异性位点之筛选提供了基础数据。 展开更多
关键词 法医昆虫学 嗜尸性蝇类 物种鉴定 线粒体COI基因 DNA条形码 北京
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一种高度敏感检测C肽的磁分离酶联免疫荧光法
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作者 白洁 陈庆 +3 位作者 赵伟 刘进洲 薛建 刘雅诚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期878-879,共2页
目的建立一种低成本、高敏感性检测人血清C肽(C-Peptide,C-P)的磁分离免疫荧光方法(magnetic separation enzyme immunofluorescence,MEIF)。方法用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)标记的抗C肽特异性单克隆抗体(monoclon... 目的建立一种低成本、高敏感性检测人血清C肽(C-Peptide,C-P)的磁分离免疫荧光方法(magnetic separation enzyme immunofluorescence,MEIF)。方法用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)标记的抗C肽特异性单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),与异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)偶联的另1个抗C肽mAb配对构成双抗体夹心免疫结合,用抗FITC的多抗免疫磁珠作为固相分离载体,用4-甲基磷酸伞型酮(4-methylumbelliferyl-phosphoric acid,4-MUP)为荧光底物建立磁分离酶联免疫荧光分析法。结果方法灵敏度0.033ng/ml,批内变异系数(CV)为4.4%~5.9%,批间CV为4.3%~8.6%,稀释回收率为82.4%~119.4%,加标回收率为94.1%-113.0%。将实际样品测定与磁分离免疫发光系统检测的结果相比较有较好的相关性。结论MEIF定量测定C肽的方法成本低、灵敏度及特异性高、稳定性好,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 免疫荧光 4-甲基磷酸伞型酮 磁珠 C肽
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