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Let-7b靶向抑制树突状细胞Bach1通过激活HO-1调控肠黏膜的损伤修复
1
作者
田元元
覃晓日
+2 位作者
田阁
符雪婷
孙晓宁
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第23期2933-2941,共9页
目的观察炎症性肠病(IBD)小鼠模型中Let-7b的表达特征,分析Let-7b对树突状细胞(DCs)中血红素加氧酶1/TB和CNC同源性1(Bach1/HO-1)轴的调控机制,从而探讨其对肠黏膜上皮细胞(MCEC)伤口修复的机制。方法建立IBD小鼠模型,分为正常组和模型...
目的观察炎症性肠病(IBD)小鼠模型中Let-7b的表达特征,分析Let-7b对树突状细胞(DCs)中血红素加氧酶1/TB和CNC同源性1(Bach1/HO-1)轴的调控机制,从而探讨其对肠黏膜上皮细胞(MCEC)伤口修复的机制。方法建立IBD小鼠模型,分为正常组和模型组。培养DCs细胞和小鼠MCEC。将DCs细胞分为7组,其中包括Ⅰ:空白对照组;Ⅱ:Let-7b拟似物阴性对照组;Ⅲ:Let-7b拟似物转染组;Ⅳ:Let-7b抑制剂阴性对照组;Ⅴ:Let-7b抑制剂转染组;Ⅵ:Let-7b抑制剂联合Bach1抑制剂盐酸表小檗碱(EC)干预组;Ⅶ:Let-7b抑制剂、EC、HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPP)共处理干预组。采用qRT-PCR和Western blot法检测结肠组织和DCs中Let-7b的表达及DCs培养物上清液中Bach1和HO-1表达水平。并将各组DCs培养物上清液与结肠黏膜上皮细胞共培养,随后用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(Edu)试剂盒法检测结肠黏膜上皮细胞的细胞增殖率。伤口愈合实验检测细胞的损伤修复能力。荧光素酶基因报告实验分析Let-7b与Bach1的3′UTR区域的直接结合作用。结果Let-7b在模型小鼠中表达降低(P<0.05),与Bach1表达呈负相关(P<0.05),而与HO-1呈正相关(P<0.05)。DCs中成功过表达了Let-7b或抑制了Let-7b,发现细胞培养物上清液Bach1受到Let-7b的负调控(P<0.05),而细胞培养物上清液中HO-1受到正调控(P<0.05)。机制研究显示了DCs中Bach1是Let-7b的靶基因,而HO-1是下游靶基因。另外,各组细胞培养物上清液与结肠黏膜上皮细胞共培养后,观察到Let-7b拟似物可以明显抑制Bach1向细胞外表达并促进细胞培养物上清液中HO-1的表达,从而促进结肠黏膜上皮细胞的增殖和伤口愈合(均P<0.05)。结论Let-7b靶向抑制DCs的Bach1并激活HO-1促进肠黏膜上皮细胞的增殖和修复。表明调控Let-7b/Bach1/HO-1轴可能是治疗IBD的潜在靶点。
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关键词
小RNA
Let-7b
TB和CNC同源性1
血红素加氧酶-1
炎症性肠病
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题名
Let-7b靶向抑制树突状细胞Bach1通过激活HO-1调控肠黏膜的损伤修复
1
作者
田元元
覃晓日
田阁
符雪婷
孙晓宁
机构
海南省人民医院(海南医学院附属海南医院)消化内
科
海南医学院第二附属医院
北京市先农坛体育运动技术学校科研科
海南医学院
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第23期2933-2941,共9页
基金
海南省自然科学基金青年基金项目(编号:821QN390)。
文摘
目的观察炎症性肠病(IBD)小鼠模型中Let-7b的表达特征,分析Let-7b对树突状细胞(DCs)中血红素加氧酶1/TB和CNC同源性1(Bach1/HO-1)轴的调控机制,从而探讨其对肠黏膜上皮细胞(MCEC)伤口修复的机制。方法建立IBD小鼠模型,分为正常组和模型组。培养DCs细胞和小鼠MCEC。将DCs细胞分为7组,其中包括Ⅰ:空白对照组;Ⅱ:Let-7b拟似物阴性对照组;Ⅲ:Let-7b拟似物转染组;Ⅳ:Let-7b抑制剂阴性对照组;Ⅴ:Let-7b抑制剂转染组;Ⅵ:Let-7b抑制剂联合Bach1抑制剂盐酸表小檗碱(EC)干预组;Ⅶ:Let-7b抑制剂、EC、HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPP)共处理干预组。采用qRT-PCR和Western blot法检测结肠组织和DCs中Let-7b的表达及DCs培养物上清液中Bach1和HO-1表达水平。并将各组DCs培养物上清液与结肠黏膜上皮细胞共培养,随后用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(Edu)试剂盒法检测结肠黏膜上皮细胞的细胞增殖率。伤口愈合实验检测细胞的损伤修复能力。荧光素酶基因报告实验分析Let-7b与Bach1的3′UTR区域的直接结合作用。结果Let-7b在模型小鼠中表达降低(P<0.05),与Bach1表达呈负相关(P<0.05),而与HO-1呈正相关(P<0.05)。DCs中成功过表达了Let-7b或抑制了Let-7b,发现细胞培养物上清液Bach1受到Let-7b的负调控(P<0.05),而细胞培养物上清液中HO-1受到正调控(P<0.05)。机制研究显示了DCs中Bach1是Let-7b的靶基因,而HO-1是下游靶基因。另外,各组细胞培养物上清液与结肠黏膜上皮细胞共培养后,观察到Let-7b拟似物可以明显抑制Bach1向细胞外表达并促进细胞培养物上清液中HO-1的表达,从而促进结肠黏膜上皮细胞的增殖和伤口愈合(均P<0.05)。结论Let-7b靶向抑制DCs的Bach1并激活HO-1促进肠黏膜上皮细胞的增殖和修复。表明调控Let-7b/Bach1/HO-1轴可能是治疗IBD的潜在靶点。
关键词
小RNA
Let-7b
TB和CNC同源性1
血红素加氧酶-1
炎症性肠病
Keywords
microRNALet-7b
TB and CNC homology 1
heme oxygenase-1
inflammatory bowel diseases
分类号
R574.62 [医药卫生—消化系统]
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1
Let-7b靶向抑制树突状细胞Bach1通过激活HO-1调控肠黏膜的损伤修复
田元元
覃晓日
田阁
符雪婷
孙晓宁
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022
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