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二价铅离子与金属硫蛋白相互作用的研究被引量：15: 1; 作者魏欣茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期289-295,共7页; 通过紫外吸收光谱和平衡透析法研究了二价铅离子同脱金属硫蛋白（ａｐｏ－ＭＴ）、锌－金属硫蛋白（Ｚｎ－ＭＴ）的相互作用，证实Ｐｂ（Ⅱ）是以金属巯基复合物（金属巯基比为１∶２）的形式同金属硫蛋白结合，表观离解常数（ＫＤ）为... 展开更多; 关键词金属硫蛋白铅金属巯基螯合簇平衡透析; 在线阅读下载PDF 职称材料

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的分离纯化被引量：36: 2; 作者杨嘉树李令媛茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期156-163,共8页; 为获得一种高效，低廉的溶栓药物，从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）体内分离纯化出一种可体外激活纤溶酶原从而间接降解纤维蛋白的酶（ｅ－ＰＡ）．纯化过程包括：粗品的盐析，离子交换层析，凝胶过滤层析及疏水相互作用... 展开更多; 关键词赤子爱胜蚓纤溶酶原激活剂分离纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的部分性质研究被引量：21: 3; 作者杨嘉树李令媛茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期164-169,共6页; 从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）中纯化出的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）在纤维蛋白平板上可表现出三种活性，分别记为：ＣＦＰｇ，ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ．为更好了解各种活性与ｅ－ＰＡ的纤溶能力的关系，考察了在ＳＤ... 展开更多; 关键词 SDS 纤溶酶原抑制剂性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种新的纤溶酶原激活反应动力学研究方法被引量：5: 4; 作者党昕纪建国 +3 位作者茹强杨晶鑫俞梅敏茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期75-79,共5页; 在溶栓研究中 ,纤溶酶原激活剂 (plasminogen activator,PA)激活纤溶酶原 (plasminogen,Plg)反应的动力学常数的测定占有重要地位 .在前人的研究中 ,虽然进行了这项实验 ,但是并未给出一个方便、快捷的测定方法 .所以建立一种更准确 ,... 展开更多; 关键词纤溶酶原动力学常数单链尿激酶型纤溶酶原激活剂纯化性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

单链尿激酶型纤溶酶原激活剂Kringle结构域催化功能探讨被引量：4: 5; 作者纪建国茹强 +2 位作者杨晶鑫俞梅敏茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期219-225,共7页; Kringle(K)结构域广泛存在于与凝血和纤溶相关的各种因子中 .虽然 K结构域在一级结构上是一种比较保守的结构域 (与其他结构域相比 ) ,但是 K结构域的功能在各种因子中的作用有很大的区别 .为探讨单链尿激酶型纤溶酶原激活剂 (scu- PA)... 展开更多; 关键词单链尿激酶型纤溶酶原激活剂 KRINGLE 结构域催化功能; 在线阅读下载PDF 职称材料

去B链羧端七肽人胰岛素的分离纯化及性质研究被引量：1: 6; 作者陈来同扬志茹胡美浩《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期440-443,共4页; 在大肠杆菌温度诱导体系中以非融合方式进行去Ｂ链羧端七肽人胰岛素原基因的表达，获得去Ｂ链羧端七肽人胰岛素原，表达产物占细胞总蛋白量的１３％，表达产物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析分离及胰蛋白酶和羧肽酶Ｂ的酶促转化等步... 展开更多; 关键词去B链羧端七肽人胰岛素受体相互作用; 在线阅读下载PDF 职称材料

ut-PA抗PAI-1突变体的构建及在sf-9细胞中的表达被引量：2: 7; 作者张拥军余瑞元徐长法《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第2期184-187,共4页; 为使嵌合分子 ut- PA获得抗 PAI- 1抑制作用的性质 ,将删除了编码 u- PA中 R1 78- R1 79-H1 80 - R1 81的 1 2个核苷酸的 u- PA c DNA[u- PA( 1 ) ]的 Bam H - Eco R 部分酶切片段 ,克隆到含嵌合蛋白 ut- PA基因的转移载体 p VL 1 392 -... 展开更多; 关键词 ut-PA 抗PAI-1突变体急性心肌梗塞溶栓药物; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合分子ut-PA(1)sf-9表达产物的纯化及其性质的初步鉴定: 8; 作者张拥军余瑞元徐长法《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第2期224-226,共3页; 嵌合蛋白 ut- PA( u- PA与 t- PA的嵌合型纤溶酶原激活剂 )基因删除编码 u- PA中 R1 78—R1 81的 1 2个核苷酸后 ,得到的嵌合分子 ut- PA( 1 )在昆虫细胞 sf- 9中表达 ,通过苯甲脒 -Sepharose 6B亲和柱层析对表达产物进行纯化 .得到的... 展开更多; 关键词嵌合分子ut--PA(1) 纯化抗PAI-1抗性鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名二价铅离子与金属硫蛋白相互作用的研究被引量：15: 1; 作者魏欣茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系北京大学蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期289-295,共7页; 基金国家九五重点攻关项目; 文摘通过紫外吸收光谱和平衡透析法研究了二价铅离子同脱金属硫蛋白（ａｐｏ－ＭＴ）、锌－金属硫蛋白（Ｚｎ－ＭＴ）的相互作用，证实Ｐｂ（Ⅱ）是以金属巯基复合物（金属巯基比为１∶２）的形式同金属硫蛋白结合，表观离解常数（ＫＤ）为８．７１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ．在自由铅浓度达到６．５２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ的条件下，铅离子即可将Ｚｎ－ＭＴ上的Ｚｎ完全取代下来．通过ＥＤＴＡ、ＤＴＮＢ竞争反应、圆二色性（ＣＤ）光谱分析，认为Ｐｂ－ＭＴ的金属巯基复合物不同于Ｚｎ－ＭＴ中Ｚｎ与巯基形成的紧密的正四面体结构，而是可能形成一种三级结构相对松散、热力学上不稳定的Ｃｙｓ－Ｓ－Ｐｂ－Ｓ－Ｃｙｓ平面形结构．研究认为金属硫蛋白的两种亚型ＭＴ－Ⅰ。; 关键词金属硫蛋白铅金属巯基螯合簇平衡透析; Keywords Metallothionein,Lead,Metal thiolate cluster complexes,Equilibrium dialysis,Dissociation constant; 分类号 R992 [医药卫生—毒理学] Q513 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的分离纯化被引量：36: 2; 作者杨嘉树李令媛茹炳根; 机构北京大学蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期156-163,共8页; 基金国家"八五"科技攻关项目高等学校博士点专项科研基金; 文摘为获得一种高效，低廉的溶栓药物，从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）体内分离纯化出一种可体外激活纤溶酶原从而间接降解纤维蛋白的酶（ｅ－ＰＡ）．纯化过程包括：粗品的盐析，离子交换层析，凝胶过滤层析及疏水相互作用层析．该组份是由二个亚基通过疏水相互作用维系在一起的．通过凝胶过滤层析，可测得全酶的分子量为４５０００；ＳＤＳ电泳显示大、小亚基的分子量分别是２６０００与１８０００；而质谱法测得的大、小亚基的分子量分别为２４５５６．７与１５５４６．６．对大小亚基进行了氨基酸组成分析，结果显示大亚基不含Ｌｙｓ而小亚基不含Ｃｙｓ．测定了大亚基Ｎ端２５个氨基酸序列：ＶＩＧＧＴＮＡＳＰＧＥＩＰＷＱＬＳＱＱＲＱＳＧＳＷ．并与部分已知蛋白质序列进行了比较．; 关键词赤子爱胜蚓纤溶酶原激活剂分离纯化; Keywords Eisenia faetida ,Plasminogen activator,Chromatography,Fibrinolysis; 分类号 Q55 [生物学—生物化学] Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的部分性质研究被引量：21: 3; 作者杨嘉树李令媛茹炳根; 机构北京大学蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期164-169,共6页; 基金国家"八五"科技攻关项目高等学校博士点专项科研基金; 文摘从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）中纯化出的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）在纤维蛋白平板上可表现出三种活性，分别记为：ＣＦＰｇ，ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ．为更好了解各种活性与ｅ－ＰＡ的纤溶能力的关系，考察了在ＳＤＳ和不同抑制剂存在下各种活性的变化．结果表明，ＳＤＳ可以增强ＣＦＰｇ活性且使得ｅ－ＰＡ变得对一些抑制剂更敏感；ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ，ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ，ｐｅｐｓｔａｔｉｎ，ａｐｒｏ－ｔｉｎｉｎ，ｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌｆｌｕｏｒｉｄｅ（ＰＭＳＦ）和ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ（ＤＴＴ）对ｕＣＦ没有影响；ｐｅｐ－ｓｔａｔｉｎ能增强ＣＦＰｇ和ｕＣＦＰｇ活性，Ｅ－６４（一种巯基抑制剂）能增强ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ活性．这些现象说明不能简单将ｅ－ＰＡ归结为丝氨酸蛋白酶或巯基蛋白酶．此外又以纤溶酶原为底物，分析了ｅ－ＰＡ在体外降解天然蛋白质的肽键特异性，结果表明：ｅ－ＰＡ可以切割碱性氨基酸，小的中性氨基酸及Ｍｅｔ的羧基端，同时ｅ－ＰＡ确能将纤溶酶原切割为纤溶酶；这一结论为ｅ－ＰＡ有可能成为新型溶栓药物提供了生化基础．; 关键词 SDS 纤溶酶原抑制剂性质; Keywords SDS Plasminogen Inhibitor Fibrinolysis; 分类号 Q55 [生物学—生物化学] R973.2 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种新的纤溶酶原激活反应动力学研究方法被引量：5: 4; 作者党昕纪建国茹强杨晶鑫俞梅敏茹炳根; 机构北京大学蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期75-79,共5页; 文摘在溶栓研究中 ,纤溶酶原激活剂 (plasminogen activator,PA)激活纤溶酶原 (plasminogen,Plg)反应的动力学常数的测定占有重要地位 .在前人的研究中 ,虽然进行了这项实验 ,但是并未给出一个方便、快捷的测定方法 .所以建立一种更准确 ,更适合一般的实验室条件的 PA分子激活 Plg反应动力学常数的测定方法是必要的 .在对该反应进行数学分析的基础上 ,得到由可测量表示的纤溶酶 (plasmin,Plm)生成速度 (v(Plm) )的计算公式 ,由 v(Plm)及相应已知量可进一步推导出 Km、kcat的表达式 ,最终测得相应动力学常数 .用这种方法测定的由甲醇酵母 (pichia pastoris)表达的人单链尿激酶型纤溶酶原激活剂 (human single chain urokinase- PA,scu- PA)激活 Plg的反应的 Km=0 .648μmol·L-1,kcat=0 .0 62 6s-1,与文献报导相符 (Km=0 .4～ 1 .1 μmol· L-1,kcat=0 .0 2～ 0 .0 93) s-1,说明此方法是可靠的 .又因该法只需相应底物及酶标仪且为连续测定 ,所以十分简便 .; 关键词纤溶酶原动力学常数单链尿激酶型纤溶酶原激活剂纯化性质; Keywords plasminogen,kinetic constant,single chain urokinase type plasminogen activator,purification,characterization; 分类号 Q550.3 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名单链尿激酶型纤溶酶原激活剂Kringle结构域催化功能探讨被引量：4: 5; 作者纪建国茹强杨晶鑫俞梅敏茹炳根; 机构北京大学蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期219-225,共7页; 文摘 Kringle(K)结构域广泛存在于与凝血和纤溶相关的各种因子中 .虽然 K结构域在一级结构上是一种比较保守的结构域 (与其他结构域相比 ) ,但是 K结构域的功能在各种因子中的作用有很大的区别 .为探讨单链尿激酶型纤溶酶原激活剂 (scu- PA)的 K结构域功能 ,构建了在 scu- PA的 K结构域的 1 1 8位 Gly与 1 1 9位 Leu之间插入 PRGDWR序列的突变体 (称为 insert mutant B,In B) ,并测定了野生型 scu- PA与 In B的纤溶相关反应的动力学常数 . scu- PA与 In B水解 S- 2 4 4 4反应的 Km 值无明显变化 (分别为 60 .4与 56.8μmol·L-1) ,而 In B的 kcat值 (0 .33s-1)比 scu- PA的 kcat值 (7.31 s-1)降低很多 ;In B激活纤溶酶原反应的 Km 值 (0 .397μmol· L-1)比 scu- PA Km 值(0 .648μmol·L-1)降低 40 % ,但 kcat值 (0 .0 1 65s-1)比 scu- PA的 kcat值 (0 .0 62 6s-1)降低 74% .以上结果说明 :K结构域主要与反应活性相关 ,而与酶及底物的亲和性无关 .; 关键词单链尿激酶型纤溶酶原激活剂 KRINGLE 结构域催化功能; Keywords single chain urokinase type plasminogen activator,kringle domain,kinetic,S 2444,plasminogen; 分类号 R973.2 [医药卫生—药品] R962 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名去B链羧端七肽人胰岛素的分离纯化及性质研究被引量：1: 6; 作者陈来同扬志茹胡美浩; 机构北京大学蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期440-443,共4页; 基金北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室资助项目; 文摘在大肠杆菌温度诱导体系中以非融合方式进行去Ｂ链羧端七肽人胰岛素原基因的表达，获得去Ｂ链羧端七肽人胰岛素原，表达产物占细胞总蛋白量的１３％，表达产物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析分离及胰蛋白酶和羧肽酶Ｂ的酶促转化等步骤，可得到纯度达９４％以上的去Ｂ链羧端七肽人胰岛素，其氨基酸组成与预期值相符，受体活性是标准猪胰岛素的１％．; 关键词去B链羧端七肽人胰岛素受体相互作用; Keywords Des heptapeptide of C terminal(B24 30)human insulin,Receptor mutual relation; 分类号 Q578 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ut-PA抗PAI-1突变体的构建及在sf-9细胞中的表达被引量：2: 7; 作者张拥军余瑞元徐长法; 机构北京大学蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第2期184-187,共4页; 基金国家 8 63计划资助项目!( 863 -10 3 -2 1-0 2 ); 文摘为使嵌合分子 ut- PA获得抗 PAI- 1抑制作用的性质 ,将删除了编码 u- PA中 R1 78- R1 79-H1 80 - R1 81的 1 2个核苷酸的 u- PA c DNA[u- PA( 1 ) ]的 Bam H - Eco R 部分酶切片段 ,克隆到含嵌合蛋白 ut- PA基因的转移载体 p VL 1 392 - ut- PA的相应位点中 ,构建了一个含有新的嵌合蛋白基因 ut- PA( 1 )的转移表达载体 p VL1 392 - ut- PA( 1 ) .在昆虫病毒表达系统 sf- 9细胞中表达该嵌合蛋白基因 ,表达上清具有纤溶性 ,用血纤维蛋白平板法和 S2 4 44 显色底物法分别测得活力为 2 4 8IU/ml和 380; 关键词 ut-PA 抗PAI-1突变体急性心肌梗塞溶栓药物; Keywords Resistance to PAI 1,Chimeric protein,Expression; 分类号 R743.305 [医药卫生—神经病学与精神病学] R973.2 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合分子ut-PA(1)sf-9表达产物的纯化及其性质的初步鉴定: 8; 作者张拥军余瑞元徐长法; 机构北京大学蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第2期224-226,共3页; 基金国家 8 63计划资助项目!( 863 -10 3 -2 1-0 2 ); 文摘嵌合蛋白 ut- PA( u- PA与 t- PA的嵌合型纤溶酶原激活剂 )基因删除编码 u- PA中 R1 78—R1 81的 1 2个核苷酸后 ,得到的嵌合分子 ut- PA( 1 )在昆虫细胞 sf- 9中表达 ,通过苯甲脒 -Sepharose 6B亲和柱层析对表达产物进行纯化 .得到的纯品走 SDS- PAGE,结果显示 ,其分子量为60 k D.血凝块溶解实验结果表明 ,嵌合分子 ut- PA( 1 )有良好的体外溶栓能力 .在不同剂量 PAI- 1的抑制条件下测定 ,亲本嵌合蛋白 ut- PA的活力分别下降 2 2 .7%和 1 3.8%时 ,嵌合分子 ut- PA( 1 )只分别下降了 1 2 .9%和 9.1 % .说明突变体 ut- PA( 1 )具有一定的对 PAI-; 关键词嵌合分子ut--PA(1) 纯化抗PAI-1抗性鉴定; Keywords Chimeric molecule ut PA(1) Purification Resistance to PAI 1; 分类号 R973.2 [医药卫生—药品] Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	二价铅离子与金属硫蛋白相互作用的研究	魏欣茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	15	在线阅读下载PDF 职称材料
2	蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的分离纯化	杨嘉树李令媛茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1998	36	在线阅读下载PDF 职称材料
3	蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的部分性质研究	杨嘉树李令媛茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1998	21	在线阅读下载PDF 职称材料
4	一种新的纤溶酶原激活反应动力学研究方法	党昕纪建国茹强杨晶鑫俞梅敏茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	单链尿激酶型纤溶酶原激活剂Kringle结构域催化功能探讨	纪建国茹强杨晶鑫俞梅敏茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	去B链羧端七肽人胰岛素的分离纯化及性质研究	陈来同扬志茹胡美浩	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	ut-PA抗PAI-1突变体的构建及在sf-9细胞中的表达	张拥军余瑞元徐长法	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	2000	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	嵌合分子ut-PA(1)sf-9表达产物的纯化及其性质的初步鉴定	张拥军余瑞元徐长法	《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料