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FACSAria流式细胞仪无菌操作分选高纯度细胞亚群
被引量：
8
1
作者
刘锡娟
丁慧荣
+2 位作者
田志华
韩海勃
张宏
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014年第12期1811-1815,共5页
BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和...
BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和阴性细胞亚群。将所有分选的细胞进行培养检测无菌状态,并观察细胞生长情况。FACSAria流式细胞仪分选得到的GFP阳性细胞群的分选纯度达99.6%,GFP阴性细胞群的分选纯度达98.8%,同时激光共聚焦荧光显微镜显示分选后的GFP阳性细胞明显富集;分选后的BGC823细胞和SMMC7721细胞常规培养,细胞均无污染且生长状态良好。
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关键词
流式细胞仪
无菌分选
高纯度
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职称材料
血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤临床与分子病理学特征分析
被引量：
1
2
作者
时云飞
王豪杰
+7 位作者
刘卫平
米岚
龙孟平
刘雁飞
赖玉梅
周立新
刁新婷
李向红
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期521-529,共9页
目的:分析血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)病理学特征、基因改变及预后的影响因素。方法:选择北京大学肿瘤医院病理科2007年6月至2021年11月明确诊断且有完整随访信息的AITL患者病例资料进行回...
目的:分析血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)病理学特征、基因改变及预后的影响因素。方法:选择北京大学肿瘤医院病理科2007年6月至2021年11月明确诊断且有完整随访信息的AITL患者病例资料进行回顾性分析,对病例进行形态学分型[Ⅰ型:淋巴结反应性增生(lymphoid tissue reactive hyperplasia,LRH)样;Ⅱ型:边缘区淋巴瘤(marginal zone lymphoma,MZL)样;Ⅲ型:外周T细胞淋巴瘤非特指型(peripheral T-cell lymphoma,not specified,PTCL-NOS)样]。结合免疫组化染色评估肿瘤有无滤泡辅助T细胞(follicular helper T cell,TFH)表型,生发中心(germinal center,GC)外滤泡树突细胞(follicular dendritic cells,FDC)增生,Hodgkin和Reed-Sternberg(HRS)样细胞及大B(细胞淋巴瘤)转化;计数每个高倍视野(high power field,HPF)Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)阳性细胞含量;按需要完善T细胞受体(T-cell receptor,TCR)/免疫球蛋白(immunoglobulin,IG)基因重排检测和靶向外显子二代测序(targeted exome sequencing,TES)检测。结果:共收集患者61例,形态分型Ⅰ型7例(11.4%)、Ⅱ型31例(50.8%)、Ⅲ型23例(37.8%),51例(83.6%)具有明确TFH表型,有不同程度GC外FDC网架增生(中位20.0%),14例(23.0%)有HRS样细胞,7例(11.5%)有大B转化。42.6%(26/61)的病例属于EBV高含量(>10个/HPF)。TCR/IG重排分析57.9%TCR^(+)/IG^(-)(11/19),26.3%TCR^(+)/IG^(+)(5/19),10.5%TCR^(-)/IG^(-)(2/19),5.3%TCR^(-)/IG^(+)(1/19)。TES检测RHOA突变66.7%(20/30),IDH2突变23.3%(7/30),TET2突变80.0%(24/30),DNMT3A突变33.3%(10/30)。TES检测30例患者分为(1)IDH2和RHOA共突变组(7例):Ⅱ型6例,Ⅲ型1例,具典型TFH表型,未见HRS细胞和大B转化;(2)单RHOA突变组(13例):Ⅰ型1例,Ⅱ型6例,Ⅲ型6例,不具典型TFH表型5例,伴HRS细胞6例,伴大B转化2例,TCR^(-)/IG^(-)1例,TCR^(-)/IG^(+)1例,TCR^(+)/IG^(+)1例;(3)仅TET2和/或DNMT3A突变组(7例):Ⅱ型3例,Ⅲ型4例,均具典型TFH表型,伴HRS细胞2例,伴大B转化2例;(4)无突变组(3例),均为Ⅱ型,TFH表型典型,FDC网架增生,TCR^(-)/IG^(-)1例。单因素生存分析证实EBV阳性细胞含量高为总生存和无进展生存的不良预后因素(P=0.017及P=0.046)。结论:AITL组织病理学难以诊断主要见于形态Ⅰ型,伴HRS样细胞,大B转化;此时TCR/IGH重排检测对诊断有帮助但价值有限;增加TES检测RHOA、IDH2、TET2、DNMT3A等基因突变可有效辅助AITL疑难病例的组织病理学诊断。肿瘤组织中EBV阳性细胞含量升高提示预后不良。
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关键词
T细胞
淋巴瘤
病理学
基因突变
预后
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职称材料
题名
FACSAria流式细胞仪无菌操作分选高纯度细胞亚群
被引量：
8
1
作者
刘锡娟
丁慧荣
田志华
韩海勃
张宏
机构
北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所中心实验室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014年第12期1811-1815,共5页
基金
国家自然科学基金(编号:81201964)
文摘
BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和阴性细胞亚群。将所有分选的细胞进行培养检测无菌状态,并观察细胞生长情况。FACSAria流式细胞仪分选得到的GFP阳性细胞群的分选纯度达99.6%,GFP阴性细胞群的分选纯度达98.8%,同时激光共聚焦荧光显微镜显示分选后的GFP阳性细胞明显富集;分选后的BGC823细胞和SMMC7721细胞常规培养,细胞均无污染且生长状态良好。
关键词
流式细胞仪
无菌分选
高纯度
Keywords
FACS
sterile sorting
high-purity
分类号
R331 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤临床与分子病理学特征分析
被引量：
1
2
作者
时云飞
王豪杰
刘卫平
米岚
龙孟平
刘雁飞
赖玉梅
周立新
刁新婷
李向红
机构
北京大学肿瘤医院
暨
北京市
肿瘤
防治
研究所
病理科
北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所中心实验室
北京大学肿瘤医院
暨
北京市
肿瘤
防治
研究所
淋巴瘤科
出处
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期521-529,共9页
文摘
目的:分析血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)病理学特征、基因改变及预后的影响因素。方法:选择北京大学肿瘤医院病理科2007年6月至2021年11月明确诊断且有完整随访信息的AITL患者病例资料进行回顾性分析,对病例进行形态学分型[Ⅰ型:淋巴结反应性增生(lymphoid tissue reactive hyperplasia,LRH)样;Ⅱ型:边缘区淋巴瘤(marginal zone lymphoma,MZL)样;Ⅲ型:外周T细胞淋巴瘤非特指型(peripheral T-cell lymphoma,not specified,PTCL-NOS)样]。结合免疫组化染色评估肿瘤有无滤泡辅助T细胞(follicular helper T cell,TFH)表型,生发中心(germinal center,GC)外滤泡树突细胞(follicular dendritic cells,FDC)增生,Hodgkin和Reed-Sternberg(HRS)样细胞及大B(细胞淋巴瘤)转化;计数每个高倍视野(high power field,HPF)Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)阳性细胞含量;按需要完善T细胞受体(T-cell receptor,TCR)/免疫球蛋白(immunoglobulin,IG)基因重排检测和靶向外显子二代测序(targeted exome sequencing,TES)检测。结果:共收集患者61例,形态分型Ⅰ型7例(11.4%)、Ⅱ型31例(50.8%)、Ⅲ型23例(37.8%),51例(83.6%)具有明确TFH表型,有不同程度GC外FDC网架增生(中位20.0%),14例(23.0%)有HRS样细胞,7例(11.5%)有大B转化。42.6%(26/61)的病例属于EBV高含量(>10个/HPF)。TCR/IG重排分析57.9%TCR^(+)/IG^(-)(11/19),26.3%TCR^(+)/IG^(+)(5/19),10.5%TCR^(-)/IG^(-)(2/19),5.3%TCR^(-)/IG^(+)(1/19)。TES检测RHOA突变66.7%(20/30),IDH2突变23.3%(7/30),TET2突变80.0%(24/30),DNMT3A突变33.3%(10/30)。TES检测30例患者分为(1)IDH2和RHOA共突变组(7例):Ⅱ型6例,Ⅲ型1例,具典型TFH表型,未见HRS细胞和大B转化;(2)单RHOA突变组(13例):Ⅰ型1例,Ⅱ型6例,Ⅲ型6例,不具典型TFH表型5例,伴HRS细胞6例,伴大B转化2例,TCR^(-)/IG^(-)1例,TCR^(-)/IG^(+)1例,TCR^(+)/IG^(+)1例;(3)仅TET2和/或DNMT3A突变组(7例):Ⅱ型3例,Ⅲ型4例,均具典型TFH表型,伴HRS细胞2例,伴大B转化2例;(4)无突变组(3例),均为Ⅱ型,TFH表型典型,FDC网架增生,TCR^(-)/IG^(-)1例。单因素生存分析证实EBV阳性细胞含量高为总生存和无进展生存的不良预后因素(P=0.017及P=0.046)。结论:AITL组织病理学难以诊断主要见于形态Ⅰ型,伴HRS样细胞,大B转化;此时TCR/IGH重排检测对诊断有帮助但价值有限;增加TES检测RHOA、IDH2、TET2、DNMT3A等基因突变可有效辅助AITL疑难病例的组织病理学诊断。肿瘤组织中EBV阳性细胞含量升高提示预后不良。
关键词
T细胞
淋巴瘤
病理学
基因突变
预后
Keywords
T cell
Lymphoma
Pathology
Gene mutation
Prognosis
分类号
R732.2 [医药卫生—肿瘤]
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作者
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被引量
操作
1
FACSAria流式细胞仪无菌操作分选高纯度细胞亚群
刘锡娟
丁慧荣
田志华
韩海勃
张宏
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014
8
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下载PDF
职称材料
2
血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤临床与分子病理学特征分析
时云飞
王豪杰
刘卫平
米岚
龙孟平
刘雁飞
赖玉梅
周立新
刁新婷
李向红
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023
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