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题名微小RNA-1266对钠通道蛋白表达和分布的影响
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作者
李彬
杨水祥
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机构
北京大学第九临床医学院首都医科大学附属北京世纪坛医院心血管内科
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出处
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
北大核心
2019年第1期72-76,共5页
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文摘
目的探讨心房颤动(AF)相关微小RNA-1266-5p(miR-1266-5p)与AF相关钠离子通道蛋白α亚基编码基因SCNA5的靶向调控关系。方法构建含有预测结合位点3'非翻译区(3'UTR)序列的靶基因,将其与阴性对照质粒以及miRNA共转染入人胚肾HEK293细胞,实验分为空白对照组、阴性对照组、实验一组(pc DNA3. 1-SCN5A 3'UTR改建质粒+miR-1266)和实验二组(pc DNA3. 1-SCN5A WT质粒,不含3'UTR端+miR-1266),荧光定量PCR法和Western blot法检测各组钠通道蛋白SCN5A mRNA和Nav1. 5蛋白表达变化,免疫荧光实验观察SCN5A Nav1. 5蛋白表达和分布变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,实验一组SCN5A mRNA表达分别下调49. 4%和46. 0%,差异有统计学意义(0. 557±0. 016 vs 1. 101±0. 132和1. 031±0. 020,P <0. 05),而实验二组SCN5A mRNA表达无显著变化(P> 0. 05);实验一组SCN5A Nav1. 5蛋白表达下降,而实验二组SCN5A Nav1. 5蛋白表达无显著变化;实验一组和实验二组的SCN5A Nav1. 5蛋白分布都无显著变化。结论 SCN5A可能是miR-1266的直接靶基因,miR-1266可能通过负性调控SCN5A表达参与AF电重构。
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关键词
心房颤动
钠通道
微RNAS
转染
基因表达
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Keywords
atrial fibrillation
sodium channels
microRNAs
transfection
gene expression
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分类号
R541.75
[医药卫生—心血管疾病]
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