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流式细胞术检测细胞周期影响因素及不同免疫细胞亚群周期分析
被引量：
2
1
作者
刘丹
张洁
+2 位作者
郭正阳
薛丽香
王羽晴
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期1308-1316,共9页
细胞周期检测对于了解细胞增殖状态、细胞功能研究、药物筛选与评估等领域具有重要意义。流式细胞仪分析细胞周期是目前较为经典且广泛应用的检测手段之一。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染是最常用的基于流式的检测细胞周期方法,然...
细胞周期检测对于了解细胞增殖状态、细胞功能研究、药物筛选与评估等领域具有重要意义。流式细胞仪分析细胞周期是目前较为经典且广泛应用的检测手段之一。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染是最常用的基于流式的检测细胞周期方法,然而,该方法在使用过程有诸多处理因素会对检测结果造成影响。此外,不同免疫细胞亚群在不同细胞周期阶段的分布差异也有助于研究免疫反应,了解疾病状态。本文以B16-F10细胞系为例,采用PI单染法,从固定条件、上机条件和软件分析3个角度,评价多种处理因素对细胞周期检测结果的影响。根据结果分析,在进行细胞周期检测时,建议取3×10^(6)个细胞,用300μL预冷PBS重悬细胞后逐滴滴入700μL预冷的无水乙醇,放置于4℃或-20℃过夜固定,低速收样,收样速率为每秒400~600颗粒数,去黏连后需收集至少3000个细胞。另外,通过EdU、PI双指标染色可以精确划分细胞周期,而细胞表面标志物染色联合Ki-67和PI染色法,可在不进行细胞分选的情况下进行不同免疫细胞亚群周期分析。本文较为系统的探讨了PI单染法检测细胞周期的影响因素,提供了标准的实验操作流程。建立了EdU联合PI检测细胞周期和针对不同免疫细胞亚群周期分析方案,拓宽了细胞周期检测方式。
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关键词
流式细胞术
细胞周期
碘化丙啶
免疫细胞亚群
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题名
流式细胞术检测细胞周期影响因素及不同免疫细胞亚群周期分析
被引量：
2
1
作者
刘丹
张洁
郭正阳
薛丽香
王羽晴
机构
北京大学第三医院
医学创新研究院基础医学研究中心
北京大学第三医院生物样本库
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期1308-1316,共9页
基金
国家自然科学基金项目(No.82203433,No.81901570)
北京大学第三医院院临床重点项目(No.BYSY2022070)资助。
文摘
细胞周期检测对于了解细胞增殖状态、细胞功能研究、药物筛选与评估等领域具有重要意义。流式细胞仪分析细胞周期是目前较为经典且广泛应用的检测手段之一。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染是最常用的基于流式的检测细胞周期方法,然而,该方法在使用过程有诸多处理因素会对检测结果造成影响。此外,不同免疫细胞亚群在不同细胞周期阶段的分布差异也有助于研究免疫反应,了解疾病状态。本文以B16-F10细胞系为例,采用PI单染法,从固定条件、上机条件和软件分析3个角度,评价多种处理因素对细胞周期检测结果的影响。根据结果分析,在进行细胞周期检测时,建议取3×10^(6)个细胞,用300μL预冷PBS重悬细胞后逐滴滴入700μL预冷的无水乙醇,放置于4℃或-20℃过夜固定,低速收样,收样速率为每秒400~600颗粒数,去黏连后需收集至少3000个细胞。另外,通过EdU、PI双指标染色可以精确划分细胞周期,而细胞表面标志物染色联合Ki-67和PI染色法,可在不进行细胞分选的情况下进行不同免疫细胞亚群周期分析。本文较为系统的探讨了PI单染法检测细胞周期的影响因素,提供了标准的实验操作流程。建立了EdU联合PI检测细胞周期和针对不同免疫细胞亚群周期分析方案,拓宽了细胞周期检测方式。
关键词
流式细胞术
细胞周期
碘化丙啶
免疫细胞亚群
Keywords
flow cytometry(FCM)
cell cycle
propidium iodide(PI)
immune cell subpopulations
分类号
Q34 [生物学—遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
流式细胞术检测细胞周期影响因素及不同免疫细胞亚群周期分析
刘丹
张洁
郭正阳
薛丽香
王羽晴
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
2
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