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深部真菌感染的实验室诊断和药敏试验 被引量:12
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作者 刘伟 李若瑜 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2007年第4期289-292,共4页
关键词 深部真菌感染 实验室诊断 药物敏感性
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烟曲霉sho1基因对渗透压传导的作用和抗真菌药物敏感性的影响 被引量:2
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作者 马彦 乔建军 +1 位作者 刘伟 李若瑜 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期162-167,共6页
目的:克隆烟曲霉sho1基因,并构建烟曲霉sho1基因突变株,了解该基因在烟曲霉应对环境变化中的作用。方法:通过基因同源性比对,在烟曲霉基因组中找出与酿酒酵母sho1基因同源的基因,PCR扩增烟曲霉sho1基因及其上、下游各约1.0kb的DNA片段,... 目的:克隆烟曲霉sho1基因,并构建烟曲霉sho1基因突变株,了解该基因在烟曲霉应对环境变化中的作用。方法:通过基因同源性比对,在烟曲霉基因组中找出与酿酒酵母sho1基因同源的基因,PCR扩增烟曲霉sho1基因及其上、下游各约1.0kb的DNA片段,并将其重组到质粒pDHt/SK2中,再利用pyrG作为筛选标记构建重组质粒。将重组质粒转化烟曲霉AF293.1得到烟曲霉△sho1。观察烟曲霉△sho1和烟曲霉AF293(野生株,wt)在MM、CM、BHI这3种培养基上的生长速度,测定烟曲霉△sho1在含有氯化钠、丙三醇这两种渗透压物质培养基上的生长情况,并比较烟曲霉△sho1和wt对常用抗真菌药物的敏感性。结果:烟曲霉△sho1在CM、MM、BHI这3种培养基上的生长速度均慢于wt;△sho1在含渗透压物质小于1mol/L的培养基上菌落直径没有明显变化,在含渗透压物质大于1mol/L的培养基上菌落直径明显变小;烟曲霉△sho1和wt对抗真菌药物的敏感性没有差异。结论:sho1基因影响烟曲霉的生长速度,与培养基类型没有明显关系。烟曲霉sho1基因介导渗透压传导。sho1基因对烟曲霉的抗真菌药物敏感性没有影响。 展开更多
关键词 曲霉菌 渗透压 抗真菌药 敏感性与特异性 基因
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甄氏外瓶霉的核糖体基因分型研究
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作者 李东明 李若瑜 +3 位作者 王晓红 万喆 马圣清 王端礼 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期167-171,共5页
目的:应用核糖体基因(rDNA)序列对甄氏外瓶霉进行分型研究。方法:试验菌株包括甄氏外瓶霉及其变种 20株(模式株、标准株、临床及自然分离株),丛梗孢外瓶霉 8株,威尼克外瓶霉 1株 (标准株及临床和环境分离株),疣状瓶霉 1株。煮沸冷冻法提... 目的:应用核糖体基因(rDNA)序列对甄氏外瓶霉进行分型研究。方法:试验菌株包括甄氏外瓶霉及其变种 20株(模式株、标准株、临床及自然分离株),丛梗孢外瓶霉 8株,威尼克外瓶霉 1株 (标准株及临床和环境分离株),疣状瓶霉 1株。煮沸冷冻法提取DNA,常规PCR扩增核糖体基因及其转录间隔区,应用DNA多序列分析等方法进行研究。结果:甄氏外瓶霉核糖体基因及其转录间隔区变异较大,DNA序列分析显示,不同来源、不同致病性的甄氏外瓶霉可分为 7型,个别菌种与其他甄氏外瓶霉的遗传距离较大。结论:甄氏外瓶霉核糖体基因及其转录间隔区序列变异较大,个别菌株的归属有待于进一步研究。 展开更多
关键词 甄氏外瓶霉 核糖体基因 分型研究 DNA序列分析 PCR扩增 间隔区 遗传距离 序列变异 标准株 分离株 冷冻法 转录 致病性 步研究 菌株 临床
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根癌农杆菌介导的尿嘧啶缺陷烟曲霉转化是基因敲除的有效方法 被引量:6
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作者 乔建军 刘伟 +2 位作者 马彦 万喆 李若瑜 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期330-333,共4页
目的:探讨用嘧啶营养缺陷作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法敲除烟曲霉基因。方法:以pyrG作为筛选标记,在双元载体pDHt/sk上分别构建烟曲霉FAP1和SHO1基因的打靶序列。构建好的质粒分别转化入根癌农杆菌。24℃条件下,含打靶质粒... 目的:探讨用嘧啶营养缺陷作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法敲除烟曲霉基因。方法:以pyrG作为筛选标记,在双元载体pDHt/sk上分别构建烟曲霉FAP1和SHO1基因的打靶序列。构建好的质粒分别转化入根癌农杆菌。24℃条件下,含打靶质粒的根癌农杆菌与烟曲霉在不含尿嘧啶和尿苷的诱导培养基上共培养48h;然后将培养物转移到37℃,筛选转化子。结果:根癌农杆菌介导的烟曲霉转化同源重组率较高,FAP1基因为44%(7/16)、SHO1基因为35%(7/20)。结论:以pyrG作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法能高效敲除烟曲霉基因,为烟曲霉基因功能研究提供了有效方法。 展开更多
关键词 根瘤菌 放射型 曲霉菌 基因
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耐特比萘芬的白念珠菌角鲨烯环氧化酶基因开放读框的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 刘伟 李若瑜 +2 位作者 卜定方 王端礼 马圣清 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期735-736,共2页
关键词 念珠菌 白色 药物耐受性 基因 结构 真菌 克隆 分子
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