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安徽庐江鸭乙型肝炎病毒LJ-76转染细胞系的建立: 1; 作者殷慎敏陈鸿珊《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期626-630,共5页; 为建立鸭乙型肝炎病毒ＬＪ－７６的转染细胞系，将ＬＪ－７６病毒ＤＮＡ插入到ｐＵＣ１９的ＥｃｏＲⅠ位点上，分离得到含有双拷贝ＬＪ－７６ＤＮＡ的重组质粒．通过磷酸钙沉淀方法，将经ＣｓＣｌ等密度离心纯化的ＬＪ－７６ＤＮＡ双体... 展开更多; 关键词鸭乙型肝炎病毒转染细胞系乙型肝炎病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

小肠三叶因子对盐酸诱导的大鼠胃溃疡的预防和治疗作用被引量：5: 2; 作者口如琴王蔚 +1 位作者李令媛茹炳根《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期178-181,共4页; 目的　探讨克隆表达的rh ITF在模拟胃肠道条件下的稳定性和抗胃溃疡的作用机制。方法　采用质谱法及盐酸诱导的大鼠胃溃疡模型 ,测定rh ITF在模拟胃肠道条件下的结构稳定性和大鼠腺胃粘膜损伤级别 ,损伤指数及胃酸度 ,胃蛋白酶活性及胃... 展开更多; 关键词小肠三叶因子胃溃疡治疗预防; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠金属硫蛋白 Ⅰ cDNA编码序列的克隆及其在昆虫细胞中的表达被引量：1: 3; 作者殷慎敏时晓冰 +1 位作者李令媛茹炳根《生物化学杂志》 CSCD 1997年第4期444-448,共5页; 将质粒ｐＢＸ－ＭＴ上的小鼠ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ片段切下作为模板，通过ＰＣＲ方法删除该片段的非编码序列，将编码序列克隆到质粒ｐＢＳ－ＳＫ中，经ＤＮＡ序列测定后证明其克隆序列正确．再将ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ编码序列插入到转移载体ｐ... 展开更多; 关键词金属硫蛋白 CDNA 编码序列克隆表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

人小肠三叶因子的克隆及酶联免疫吸附检测: 4; 作者口如琴王蔚 +1 位作者李令媛茹炳根《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期777-782,共6页; 人小肠三叶因子的cDNA ,克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,经IPTG诱导后 ,hITF以GST hITF融合蛋白的形式表达 ,融合蛋白占细菌总蛋白的 15%左右。经过Glutathione Sepharose4B亲和柱和Sephacry1S 10 0分子筛层析纯化了hITF。SDS PAGE和... 展开更多; 关键词小肠三叶因子酶联免疫吸附检测克隆人三叶肽; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠金属硫蛋白基因－I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗方面的应用: 5; 作者殷慎敏李令媛茹炳根《北京大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 1996年第4期481-487,共7页; 将小鼠的ＭＴ－Ⅰ基因插入ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ质粒的ＥｃｏＲＩ位点，构建了具有ＳＶ４０和ＭＴ双启动子并正向插入ＭＴ－Ⅰ基因的表达载体。用改良的磷酸钙／ＤＮＡ沉淀法将表达载体导入ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞内，用不含次黄嘌呤（Ｈ... 展开更多; 关键词金属硫蛋白细胞转染基因表达 CHO细胞医疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

DNA的紫外线损伤与修复被引量：1: 6; 作者张海赖兵《生物学杂志》 CAS CSCD 1997年第5期10-11,共2页; ＤＮＡ的紫外线损伤与修复张海赖兵（北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系，北京市１００８７１）ＤＮＡ的损伤是指在外界因素作用下，ＤＮＡ的结构发生变化，ＤＮＡ损伤通过转录，翻译的产物———ＲＮＡ与蛋白质，来作用细胞... 展开更多; 关键词 DNA 紫外线损伤修复; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪脑抗吗啡镇痛肽的分离纯化及其抗血清对吗啡耐受影响的初步研究被引量：1: 7; 作者杨树长陈雅蕙 +2 位作者王镜岩陈玉珍许世清《生物化学杂志》 CSCD 1997年第3期322-326,共5页; 猪脑组织提取液经SephadexG-50分子筛层析，S-SepharoseFastFlow阳离子交换柱层析及两次HPLC分离得到一分子量为12000，等电点pI7．1的多肽，并测定了其氨基酸组成和N末端部分序列：N-phe-Lys-Gly-Phe-Pro-Asp-Asp／（Lys）-Lys／（Asp... 展开更多; 关键词抗阿片肽吗啡耐受抗血清抗吗啡镇痛肽; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名安徽庐江鸭乙型肝炎病毒LJ-76转染细胞系的建立: 1; 作者殷慎敏陈鸿珊; 机构北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系中国医学科学院医药生物技术研究所病毒室; 出处《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期626-630,共5页; 文摘为建立鸭乙型肝炎病毒ＬＪ－７６的转染细胞系，将ＬＪ－７６病毒ＤＮＡ插入到ｐＵＣ１９的ＥｃｏＲⅠ位点上，分离得到含有双拷贝ＬＪ－７６ＤＮＡ的重组质粒．通过磷酸钙沉淀方法，将经ＣｓＣｌ等密度离心纯化的ＬＪ－７６ＤＮＡ双体导入到人肝癌细胞ＢＥＬ７４０２中．收集转染细胞的培养液进行蔗糖密度梯度离心，所得沉淀经检测发现含有ＬＪ－７６ＤＮＡ并具有特异性ＤＨＢＶ内源性ＤＮＡ多聚酶活性；对上述样品通过ＤｏｔＥＩＡ检测ＤＨＢＶ核心抗原及表面抗原结果为阳性．Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明转染细胞内存在病毒ＤＮＡ复制中间体ｃｃｃＤＮＡ、ｓｓＤＮＡ和ｒｃＤＮＡ，而ｃｃｃＤＮＡ被认为是复制活动较为活跃的标志．电镜观察转染细胞的上清发现有病毒颗粒的存在．; 关键词鸭乙型肝炎病毒转染细胞系乙型肝炎病毒; Keywords Duck hepatitis B virus LJ 76(DHBV LJ 76),BEL7402 cells,Transfection; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] R373.21 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小肠三叶因子对盐酸诱导的大鼠胃溃疡的预防和治疗作用被引量：5: 2; 作者口如琴王蔚李令媛茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期178-181,共4页; 文摘目的　探讨克隆表达的rh ITF在模拟胃肠道条件下的稳定性和抗胃溃疡的作用机制。方法　采用质谱法及盐酸诱导的大鼠胃溃疡模型 ,测定rh ITF在模拟胃肠道条件下的结构稳定性和大鼠腺胃粘膜损伤级别 ,损伤指数及胃酸度 ,胃蛋白酶活性及胃排空能力。结果　酸对rh ITF相对分子量没有影响 ,胃蛋白酶仅从N端切除 6个氨基酸残基。rh ITF可明显降低大鼠腺胃粘膜损伤级别和损伤指数 ,但对胃酸分泌 ,胃蛋白酶活性及胃排空能力没有影响。结论　rh ITF在体外对酸和胃蛋白酶有一定的抗性 ,其对胃溃疡的治疗和预防作用不是通过降低攻击因子 (酸和蛋白酶 )和影响胃的自主运动实现的。; 关键词小肠三叶因子胃溃疡治疗预防; Keywords rh ITF gastriculcer precautionary andtherapeuticeffect structuralstability; 分类号 R573.105 [医药卫生—消化系统] R975.6 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠金属硫蛋白 Ⅰ cDNA编码序列的克隆及其在昆虫细胞中的表达被引量：1: 3; 作者殷慎敏时晓冰李令媛茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系; 出处《生物化学杂志》 CSCD 1997年第4期444-448,共5页; 基金国家八六三生物高技术项目; 文摘将质粒ｐＢＸ－ＭＴ上的小鼠ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ片段切下作为模板，通过ＰＣＲ方法删除该片段的非编码序列，将编码序列克隆到质粒ｐＢＳ－ＳＫ中，经ＤＮＡ序列测定后证明其克隆序列正确．再将ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ编码序列插入到转移载体ｐＢａｃＰＡＫ８的ＢａｍＨⅠ和ＥｃｏＲⅠ位点之间，通过磷酸钙／ＤＮＡ共转染方法将其导入昆虫细胞Ｓｆ９中，以Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＤｏｔＥＩＡ方法对表达产物进行了检测。; 关键词金属硫蛋白 CDNA 编码序列克隆表达; Keywords Metallothionein(MT),PCR,Cotransfection,Sf9 cells; 分类号 Q513.01 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人小肠三叶因子的克隆及酶联免疫吸附检测: 4; 作者口如琴王蔚李令媛茹炳根; 机构北京大学生命科学学院; 出处《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期777-782,共6页; 文摘人小肠三叶因子的cDNA ,克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,经IPTG诱导后 ,hITF以GST hITF融合蛋白的形式表达 ,融合蛋白占细菌总蛋白的 15%左右。经过Glutathione Sepharose4B亲和柱和Sephacry1S 10 0分子筛层析纯化了hITF。SDS PAGE和氨基酸分析证明得到了hITF纯品。以天然hITF为抗原免疫青紫蓝兔制备了抗血清 ,用纯化的IgG建立了hITF的酶联免疫吸附检测 (ELISA)方法 ,给出了标准工作曲线。应用于纯化过程中样品峰的确立。; 关键词小肠三叶因子酶联免疫吸附检测克隆人三叶肽; Keywords intestinal trefoil factor enzyme\|linked immunosorbent assay (ELISA) clone and expression; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠金属硫蛋白基因－I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗方面的应用: 5; 作者殷慎敏李令媛茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系; 出处《北京大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 1996年第4期481-487,共7页; 基金国家863生物高技术项目资助; 文摘将小鼠的ＭＴ－Ⅰ基因插入ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ质粒的ＥｃｏＲＩ位点，构建了具有ＳＶ４０和ＭＴ双启动子并正向插入ＭＴ－Ⅰ基因的表达载体。用改良的磷酸钙／ＤＮＡ沉淀法将表达载体导入ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞内，用不含次黄嘌呤（Ｈ）和胸腺嘧啶（Ｔ）的选择培养基筛选出稳定表达ＭＴ阳性克隆Ｄ－２２，经检测１０６细胞的ＭＴ表达量约为１．８μｇ，Ｄ－２２细胞对Ｃｄ２＋浓度抗性较之ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞高１４倍。为了研究金属硫蛋白对正常细胞所具有的保护作用，将不同浓度的顺铂分别处理无ＭＴ表达的ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞和有ＭＴ表达的Ｄ－２２细胞。实验发现顺铂对Ｄ－２２细胞和ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞５０％生长抑制浓度（ＩＣ５０）分别是０．１４５μｍｏｌ／Ｌ和０．０４μｍｏｌ／Ｌ。上述研究表明ＭＴ对正常细胞有一定的保护作用，因而通过诱导正常细胞提高ＭＴ的表达量，同时使用ＭＴ阻断剂阻断肿瘤组织的ＭＴ合成。; 关键词金属硫蛋白细胞转染基因表达 CHO细胞医疗; Keywords Metallothionein (MT) CHO dhfr -Cells Cell Transfection Gene Expression Cisplatin; 分类号 Q513 [生物学—生物化学] R977.6 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DNA的紫外线损伤与修复被引量：1: 6; 作者张海赖兵; 机构北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系; 出处《生物学杂志》 CAS CSCD 1997年第5期10-11,共2页; 文摘ＤＮＡ的紫外线损伤与修复张海赖兵（北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系，北京市１００８７１）ＤＮＡ的损伤是指在外界因素作用下，ＤＮＡ的结构发生变化，ＤＮＡ损伤通过转录，翻译的产物———ＲＮＡ与蛋白质，来作用细胞，并影响其代谢。为了防止ＤＮＡ损伤...; 关键词 DNA 紫外线损伤修复; 分类号 Q523 [生物学—生物化学] Q682 [生物学—生物物理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪脑抗吗啡镇痛肽的分离纯化及其抗血清对吗啡耐受影响的初步研究被引量：1: 7; 作者杨树长陈雅蕙王镜岩陈玉珍许世清; 机构北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系中日友好医院基础医学研究所; 出处《生物化学杂志》 CSCD 1997年第3期322-326,共5页; 基金国家自然科学基金!39180019; 文摘猪脑组织提取液经SephadexG-50分子筛层析，S-SepharoseFastFlow阳离子交换柱层析及两次HPLC分离得到一分子量为12000，等电点pI7．1的多肽，并测定了其氨基酸组成和N末端部分序列：N-phe-Lys-Gly-Phe-Pro-Asp-Asp／（Lys）-Lys／（Asp）-Asp-Tyr．给昆明小鼠脑室注射或尾静脉注射该肽均能抑制吗啡引起的镇痛作用，其作用随着注射剂量的增大而增强．用BALB／C小鼠制备了该肽的抗血清，脑室注射此抗血清能明显逆转昆明小鼠对吗啡的耐受．因为这种来自猪脑的具有抗阿片镇痛作用的肽有99个氨基酸，所以简称此肽为AOP-99a（anti-oPioidpeptide）．; 关键词抗阿片肽吗啡耐受抗血清抗吗啡镇痛肽; Keywords Anti-opioid peptide Morphine tolerance Antisera HPLC; 分类号 Q514.3 [生物学—生物化学] Q593.9 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	安徽庐江鸭乙型肝炎病毒LJ-76转染细胞系的建立	殷慎敏陈鸿珊	《生物化学杂志》 CSCD	1997	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	小肠三叶因子对盐酸诱导的大鼠胃溃疡的预防和治疗作用	口如琴王蔚李令媛茹炳根	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2000	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	小鼠金属硫蛋白 Ⅰ cDNA编码序列的克隆及其在昆虫细胞中的表达	殷慎敏时晓冰李令媛茹炳根	《生物化学杂志》 CSCD	1997	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人小肠三叶因子的克隆及酶联免疫吸附检测	口如琴王蔚李令媛茹炳根	《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	小鼠金属硫蛋白基因－I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗方面的应用	殷慎敏李令媛茹炳根	《北京大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	1996	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	DNA的紫外线损伤与修复	张海赖兵	《生物学杂志》 CAS CSCD	1997	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	猪脑抗吗啡镇痛肽的分离纯化及其抗血清对吗啡耐受影响的初步研究	杨树长陈雅蕙王镜岩陈玉珍许世清	《生物化学杂志》 CSCD	1997	1	在线阅读下载PDF 职称材料