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人小肠三叶因子缺失半胱氨酸57突变体的构建及其生物活性: 1; 作者口如琴王蔚 +1 位作者李令媛茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第5期606-611,共6页; 用 PCR方法构建了一个不能形成二聚体的 C端缺失半胱氨酸 57的 h ITF突变体 .将其克隆到大肠杆菌表达载体 p GEX- 4T- 1中 ,ITPG诱导表达 ,融合蛋白经 Glutathione- Sepharose 4B亲和层析 ,凝血酶酶切和 Sephacryl S 1 0 0纯化 ,得到突... 展开更多; 关键词小肠三叶因子半胱氨酸57缺失突变体生物活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

金属硫蛋白结合铅离子的竞争反应和置换反应研究被引量：10: 2; 作者季清洲王立波 +1 位作者周元茹炳根《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期503-508,共6页; 从锌诱导的家兔肝脏中分离纯化得到两种亚型的金属硫蛋白 (MTs) :Zn7MT Ⅰ和Zn7MT Ⅱ ,在酸性条件下脱金属得脱金属硫蛋白 (apoMTs)。从镉诱导的家兔肝脏中分离纯化得 :Zn2 Cd5MT Ⅰ和Zn2 Cd5MT Ⅱ。采用圆二色性 (CD)光谱法和紫外 (UV... 展开更多; 关键词金属硫蛋白铅离子竞争反应置换反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

兔肝金属硫蛋白结合铅离子的圆二色性光谱研究被引量：2: 3; 作者季清洲王立波茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期928-932,共5页; 从锌诱导的家兔肝脏中分离纯化得到金属硫蛋白两种亚型：ＺｎＭＴ－Ⅰ和ＺｎＭＴ－Ⅱ．在酸性条件下脱金属，经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱层析得到脱金属硫蛋白（ａｐｏＭＴｓ）．用圆二色性（ＣＤ）光谱法研究，发现两种亚型ａｐｏ... 展开更多; 关键词圆二色性光谱法 MTS 铅解毒功能重金属; 在线阅读下载PDF 职称材料

G蛋白Rab3a协同神经生长抑制因子(GIF)抑制神经元的生长: 4; 作者陈巧林康巧华 +2 位作者任宏伟王宗元茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期534-539,共6页; 为了研究G蛋白Rab3a与神经生长抑制因子 (growthinhibitoryfactor,GIF ,原称金属硫蛋白 3,MT 3)相互作用对神经元细胞生长的影响 ,以嗜铬细胞瘤株 (pheochromocytoma)PC1 2充当神经元模型 .将hMT 3(humanMT 3)和Rab3a基因分别克隆至真... 展开更多; 关键词 RAB3A 神经生长抑制因子神经元转染抑制; 在线阅读下载PDF 职称材料

RGDS-尿激酶原嵌合体的构建与表达被引量：13: 5; 作者孙迎庆郭雁 +1 位作者李令媛茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期189-193,共5页; 利用定点突变及ＤＮＡ重组技术，构建了在尿激酶原Ｋ区Ｃ端的β发夹区插入了精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸－丝氨酸〔ＲＧＤＳ〕片段的尿激酶原嵌合体基因，并利用昆虫杆状病毒表达系统通过感染Ｓｆ９细胞对野生型及嵌合体尿激酶原进行了高... 展开更多; 关键词尿激酶原 RGD片段昆虫杆状病毒激活剂; 在线阅读下载PDF 职称材料

人小肠三叶因子在大肠杆菌中的表达被引量：9: 6; 作者王蔚口如琴 +1 位作者李令媛茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期724-728,共5页; 利用PCR技术将人小肠三叶因子(hITF)基因重组入表达载体pGEX-4T-1,构建了融合蛋白GST-hITF的重组表达质粒pGTF,在大肠杆菌中诱导表达。表达的融合蛋白经亲和层析、凝血酶切和凝胶过滤层析得到纯化的hITF蛋白。测定了重组蛋白的氨基酸组... 展开更多; 关键词小肠三叶因子基因重组表达融合蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

人小肠三叶因子的理化性质及光谱学行为被引量：4: 7; 作者口如琴王蔚 +1 位作者李令媛茹炳根《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期786-791,共6页; 酵母表达的重组人小肠三叶因子(rh-ITF)飞行质谱测定二聚体的分子量为13154,等电点约为4.5～4.75.紫外和荧光光谱表明rh-ITF在pH2.7～8.4和pH2.7～7.7时,吸收值增加。随pH进一步增加,吸收值降低。推测色氨酸和酪氨酸所处微环境发生了一... 展开更多; 关键词小肠三叶因子理化性质光谱学行为; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人小肠三叶因子缺失半胱氨酸57突变体的构建及其生物活性: 1; 作者口如琴王蔚李令媛茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第5期606-611,共6页; 文摘用 PCR方法构建了一个不能形成二聚体的 C端缺失半胱氨酸 57的 h ITF突变体 .将其克隆到大肠杆菌表达载体 p GEX- 4T- 1中 ,ITPG诱导表达 ,融合蛋白经 Glutathione- Sepharose 4B亲和层析 ,凝血酶酶切和 Sephacryl S 1 0 0纯化 ,得到突变体蛋白 .SDS- PAGE,氨基酸组成 ,飞行质谱 ,N端氨基酸序列测定结果与期望值一致 .研究表明突变体的生物学活性有所降低 .对胃蛋白酶作用的稳定性降低 .; 关键词小肠三叶因子半胱氨酸57缺失突变体生物活性; Keywords Intestinal trefoil factor Mutant Bioactivity; 分类号 Q593.9 [生物学—生物化学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名金属硫蛋白结合铅离子的竞争反应和置换反应研究被引量：10: 2; 作者季清洲王立波周元茹炳根; 机构北京大学生命科学学院; 出处《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期503-508,共6页; 基金九五国家重点科技攻关资助项目!(96 C0 3 0 1 0 6 ); 文摘从锌诱导的家兔肝脏中分离纯化得到两种亚型的金属硫蛋白 (MTs) :Zn7MT Ⅰ和Zn7MT Ⅱ ,在酸性条件下脱金属得脱金属硫蛋白 (apoMTs)。从镉诱导的家兔肝脏中分离纯化得 :Zn2 Cd5MT Ⅰ和Zn2 Cd5MT Ⅱ。采用圆二色性 (CD)光谱法和紫外 (UV)吸收光谱法研究金属硫蛋白结合铅离子的竞争反应和置换反应。竞争反应显示 :Pb2 + 和Zn2 + 竞争结合apoMT Ⅰ形成的是金属混配的金属硫蛋白 ;而apoMT Ⅱ的金属结合位点则完全被Pb2 + 所占据 ,表明apoMT Ⅱ对Pb2 + 更为敏感。置换反应显示 :Pb2 + 既不能置换出Zn7MT Ⅰ中的Zn2 + ,也不能置换出Zn7MT Ⅱ中的Zn2 + ;但Pb2 + 能完全置换出Zn2 Cd5MTs中的Zn2 + ,且其置换行为也存在着亚型上的差异。提示Zn2 Cd5MT Ⅱ可能有效地解铅中毒。; 关键词金属硫蛋白铅离子竞争反应置换反应; Keywords Metallothioneins Lead Ion Competition Reaction Replacement Reaction CD UV; 分类号 Q71 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兔肝金属硫蛋白结合铅离子的圆二色性光谱研究被引量：2: 3; 作者季清洲王立波茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期928-932,共5页; 基金九五国家重点科技攻关资助; 文摘从锌诱导的家兔肝脏中分离纯化得到金属硫蛋白两种亚型：ＺｎＭＴ－Ⅰ和ＺｎＭＴ－Ⅱ．在酸性条件下脱金属，经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱层析得到脱金属硫蛋白（ａｐｏＭＴｓ）．用圆二色性（ＣＤ）光谱法研究，发现两种亚型ａｐｏＭＴｓ与Ｐｂ２＋的结合依赖于Ｐｂ２＋的加入比例及ｐＨ值．ａｐｏＭＴ－Ⅰ在ｐＨ３～５之间，ａｐｏＭＴ－Ⅱ在ｐＨ４～６之间与Ｐｂ２＋结合形成特征簇合物Ｐｂ７ＭＴｓ，其ＣＤ谱图特征峰位于３１６ｎｍ（－），２７０ｎｍ（＋），２４５ｎｍ（＋）及２２５ｎｍ（－），提示解铅中毒的最佳条件应控制在弱酸性环境．不同亚型ａｐｏＭＴｓ与Ｐｂ２＋的结合方式各不相同：Ｐｂ２＋与ａｐｏＭＴ－Ⅰ的结合采取平均分配的方式，而与ａｐｏＭＴ－Ⅱ则为选择性结合方式，表明这两种亚型在解铅毒功能上存在差异．; 关键词圆二色性光谱法 MTS 铅解毒功能重金属; Keywords Metallothioneins,Lead ion,CD; 分类号 Q513.02 [生物学—生物化学] Q657.3 [生物学—生物物理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名G蛋白Rab3a协同神经生长抑制因子(GIF)抑制神经元的生长: 4; 作者陈巧林康巧华任宏伟王宗元茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系扬州大学畜牧兽医学院北京大学人民医院风湿免疫科; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期534-539,共6页; 基金国家 95攻关合同项目资助批准号 :96 C0 2 0 1 0 9~~; 文摘为了研究G蛋白Rab3a与神经生长抑制因子 (growthinhibitoryfactor,GIF ,原称金属硫蛋白 3,MT 3)相互作用对神经元细胞生长的影响 ,以嗜铬细胞瘤株 (pheochromocytoma)PC1 2充当神经元模型 .将hMT 3(humanMT 3)和Rab3a基因分别克隆至真核表达载体pFlag CMV 2和pSV HA中 ,质粒共同转染PC1 2细胞 ,观察转染后细胞的生长状态 .以共转染pFlag CMV 2 hMT 1和pSV HA Rab3a的细胞组作为对照 ,验证hMT 3与Rab3a相互作用对PC1 2影响的特异性 .结果发现 ,共转染pFlag CMV 2 hMT 3和pSV HA Rab3a的PC1 2细胞生长明显受到抑制 ,细胞生长抑制率与GIF在脑提取物存在F的神经元生长抑制作用接近 ,但转染两基因中的任何单个基因以及共转染pFlag CMV 2 hMT 1和pSV HA Rab3a对PC1 2细胞生长无影响 .进一步构建重组表达质粒pGEX 4T 1 Rab3a和pGEX 4T 1 hMT 3,转化大肠杆菌BL2 1 ,经谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析、凝血酶酶切和SephacrylS 1 0 0纯化 ,得到纯度 95 %以上的Rab3a和hMT 3蛋白 .体外细胞生物学活性检测表明 ,表达的Rab3a蛋白与重组hMT 3蛋白共培养PC1 2 ,对细胞的生长产生了明显的特异性协同抑制作用。; 关键词 RAB3A 神经生长抑制因子神经元转染抑制; Keywords Rab3a,GIF,neuron,transfection,inhibition; 分类号 Q74 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名RGDS-尿激酶原嵌合体的构建与表达被引量：13: 5; 作者孙迎庆郭雁李令媛茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期189-193,共5页; 文摘利用定点突变及ＤＮＡ重组技术，构建了在尿激酶原Ｋ区Ｃ端的β发夹区插入了精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸－丝氨酸〔ＲＧＤＳ〕片段的尿激酶原嵌合体基因，并利用昆虫杆状病毒表达系统通过感染Ｓｆ９细胞对野生型及嵌合体尿激酶原进行了高效表达，表达量分别为１２００～１８００ＩＵ／（１０６细胞·ｍｌ）和１８００～２４００ＩＵ／（１０６细胞·ｍｌ）．经过ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ离子交换层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤层析及超滤浓缩对野生型及突变型进行了部分纯化，并对其性质进行了初步研究．表明突变体尿激酶原保留了全部尿激酶原的纤溶酶原激活活性，并具有很强的抗血小板聚集活性．; 关键词尿激酶原 RGD片段昆虫杆状病毒激活剂; Keywords Prourokinase,RGD fragment,Platelet aggregation,Insect baculovirus; 分类号 Q784 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人小肠三叶因子在大肠杆菌中的表达被引量：9: 6; 作者王蔚口如琴李令媛茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期724-728,共5页; 文摘利用PCR技术将人小肠三叶因子(hITF)基因重组入表达载体pGEX-4T-1,构建了融合蛋白GST-hITF的重组表达质粒pGTF,在大肠杆菌中诱导表达。表达的融合蛋白经亲和层析、凝血酶切和凝胶过滤层析得到纯化的hITF蛋白。测定了重组蛋白的氨基酸组成、分子量及其对酸和蛋白酶的抗性。Western印迹表明重组蛋白具有hITF的抗原性,并对大鼠胃溃疡具有明显的预防和保护作用。; 关键词小肠三叶因子基因重组表达融合蛋白; Keywords Intestinal trefoil factor,Genetic recombination,Expression,Fusion protein; 分类号 Q51 [生物学—生物化学] Q784 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人小肠三叶因子的理化性质及光谱学行为被引量：4: 7; 作者口如琴王蔚李令媛茹炳根; 机构北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期786-791,共6页; 文摘酵母表达的重组人小肠三叶因子(rh-ITF)飞行质谱测定二聚体的分子量为13154,等电点约为4.5～4.75.紫外和荧光光谱表明rh-ITF在pH2.7～8.4和pH2.7～7.7时,吸收值增加。随pH进一步增加,吸收值降低。推测色氨酸和酪氨酸所处微环境发生了一定的变化。园二色谱表明在不同pH下,rh-ITF所含二级结构百分数有所变化,但仍保留有一定的二级结构,即含有一定数量的α-helix,β-sheet或β-turn,其三级结构基本不变。光电滴定和有机溶剂微扰法表明rh-ITF分子中有两个酪氨酸,一个处于分子表面,另一个参与氢键的形成或存在于一个非极性的环境中。rh-ITF中的色氨酸处于分子内部。另外。; 关键词小肠三叶因子理化性质光谱学行为; Keywords rh ITF,Chemico physical properties,Spectra; 分类号 Q510.2 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人小肠三叶因子缺失半胱氨酸57突变体的构建及其生物活性	口如琴王蔚李令媛茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	金属硫蛋白结合铅离子的竞争反应和置换反应研究	季清洲王立波周元茹炳根	《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2000	10	在线阅读下载PDF 职称材料
3	兔肝金属硫蛋白结合铅离子的圆二色性光谱研究	季清洲王立波茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	G蛋白Rab3a协同神经生长抑制因子(GIF)抑制神经元的生长	陈巧林康巧华任宏伟王宗元茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	RGDS-尿激酶原嵌合体的构建与表达	孙迎庆郭雁李令媛茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	13	在线阅读下载PDF 职称材料
6	人小肠三叶因子在大肠杆菌中的表达	王蔚口如琴李令媛茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	9	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人小肠三叶因子的理化性质及光谱学行为	口如琴王蔚李令媛茹炳根	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	4	在线阅读下载PDF 职称材料