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实验动物福利伦理审查要点
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作者 李夏莹 田永路 +1 位作者 韦玉生 庞万勇 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第4期616-622,共7页
作为重要的科研基础资源,实验动物已成为生命探索、医学研究、药物研发等领域不断发展的重要工具。随着实验动物福利法律法规的发展,实验动物福利日益被国际社会和科研共同体所重视。为了维护实验动物福利,规范实验动物伦理审查工作,参... 作为重要的科研基础资源,实验动物已成为生命探索、医学研究、药物研发等领域不断发展的重要工具。随着实验动物福利法律法规的发展,实验动物福利日益被国际社会和科研共同体所重视。为了维护实验动物福利,规范实验动物伦理审查工作,参考国外的先进经验,结合中国实验动物福利伦理审查的特点,本文主要针对研究人员和审查委员,概述了研究计划的审查和批准流程、福利伦理评估的标准,旨在为实验动物研究计划的撰写提供参考,为实验动物福利伦理的审查工作提供借鉴。 展开更多
关键词 实验动物 动物福利 伦理审查 监督管理
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实验动物肺炎克雷伯杆菌实时荧光qPCR检测方法的建立和优化
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作者 李钰钰 姚继英 +3 位作者 田永路 孙甜甜 韦玉生 李夏莹 《实验技术与管理》 北大核心 2025年第1期90-97,共8页
该研究旨在建立和优化一种针对实验动物肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae,KP)的TaqMan实时荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测方法,以提高检测的灵敏度、特异性和准确性。通过文献调研和序列比对,选取... 该研究旨在建立和优化一种针对实验动物肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae,KP)的TaqMan实时荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测方法,以提高检测的灵敏度、特异性和准确性。通过文献调研和序列比对,选取了KP的phoE基因作为目标序列,设计并合成一对特异性引物和探针,对qPCR反应体系和退火温度进行了系统优化,采用梯度稀释法测定了该方法的线性范围、灵敏度和检测限。通过分析不同浓度标准品的qPCR曲线,评估了该方法的特异性和方法再现性。最后将该方法用于各种临床样品检测。优化后的qPCR方法显示出良好的线性关系,线性范围为2.7×10^(4)~8.64 copies/μL,线性回归方程为y=–3.83x+42.865,相关系数(R^(2))为0.992。检测限达到8.64 copies/μL,表明该方法具有较高的灵敏度。特异性实验结果表明,该方法仅对KP产生特异性扩增,与其他常见病原体无交叉反应。统计不同操作人员对检测极限样品的10个平行Ct值,结果显示,Ct值的相对标准偏差均低于2%,说明方法具有良好的再现性。共检测26份临床样本,有3份临床样本为阳性,其他均为阴性。本研究成功建立了一种高灵敏度、高特异性的KP qPCR检测方法,为实验动物中的KP感染提供了一种快速、准确的分子诊断工具。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯杆菌 荧光定量PCR 实验动物
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实验动物金黄色葡萄球菌微滴式数字PCR检测方法建立和优化
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作者 李钰钰 姚继英 +3 位作者 田永路 孙甜甜 韦玉生 李夏莹 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第3期430-439,共10页
目的建立一种快速、准确的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,用于检测实验动物和环境中的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)。方法针对SA耐热核酸酶基因(nuc)的保守区域,设计并合成一对特异性引物和探针,通过... 目的建立一种快速、准确的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,用于检测实验动物和环境中的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)。方法针对SA耐热核酸酶基因(nuc)的保守区域,设计并合成一对特异性引物和探针,通过实验优化,确定最佳反应条件,检测动力学范围,验证该方法的特异性和方法再现性;以相同的模板分别进行ddPCR和实时荧光定量PCR(qPCR)方法反应,检测两种方法的互换性;最后将该方法用于各种临床样品的检测。结果建立的SA ddPCR方法的动力学范围为100~15000 copies/μL,检测极限为2.5 copies,定量极限为10 copies;检测该方法的特异性,结果仅SA有阳性微滴,其他病原体均无阳性微滴;对3个平行样本进行测量后,计算得到其标准偏差与相对标准偏差发现,在ddPCR的动力学检测区间内,随着目标拷贝数的逐渐降低,相对标准偏差呈现上升趋势,然而始终低于25%的,这一结果表明该检测方法具有良好的稳定性。t检验分析ddPCR和qPCR方法的检测结果,显示两种方法所得拷贝数均无明显差异。共检测10份临床样本,有2份临床样本为阳性,其他均为阴性,该结果与qPCR检测结果一致。结论建立的检测SA的ddPCR方法灵敏度高、特异性强、稳定性好和重复性好,可用于实验动物SA的检测。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 微滴式数字PCR 实验动物
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实验动物金黄色葡萄球菌PCR检测方法的建立和应用 被引量:4
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作者 姚继英 董文凤 +2 位作者 杨玮 田永路 李夏莹 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2023年第11期91-96,共6页
为了快速检测出实验动物临床样品中的金黄色葡萄球菌(SA),建立了一种普通PCR方法。同时合成3对引物,用金黄色葡萄球菌的阳性核酸DNA做模板,进行引物扩增,筛选出一对能扩增出270 bp单一目的片段的引物。逐一对该引物灵敏度、重复性和特... 为了快速检测出实验动物临床样品中的金黄色葡萄球菌(SA),建立了一种普通PCR方法。同时合成3对引物,用金黄色葡萄球菌的阳性核酸DNA做模板,进行引物扩增,筛选出一对能扩增出270 bp单一目的片段的引物。逐一对该引物灵敏度、重复性和特异性进行了测试。实验结果显示,该方法具有高度的特异性,除了识别金黄色葡萄球菌基因组外,对小鼠其他常见病原菌均不发生交叉反应,具有优良的敏感性和稳定性。两个不同操作人员,在两个不同时间段,利用两台不同品牌的PCR仪器,用金黄色葡萄球菌阳性样品进行测试,结果显示此方法再现性良好。用该方法检测待测样本,效果也良好。 展开更多
关键词 实验动物 金黄色葡萄球菌 PCR 方法建立
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高校实验动物平台管理模式研究 被引量:5
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作者 李夏莹 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2020年第12期270-272,276,共4页
实验动物是现代生命科学研究的重要组成部分,是生物医学科研的基础和重要支撑条件。实验动物平台是进行实验动物饲养、管理、实验研究的重要场所。该文从北京大学实验动物中心平台建设和管理的实际经验出发,对实验动物设施设计及要求、... 实验动物是现代生命科学研究的重要组成部分,是生物医学科研的基础和重要支撑条件。实验动物平台是进行实验动物饲养、管理、实验研究的重要场所。该文从北京大学实验动物中心平台建设和管理的实际经验出发,对实验动物设施设计及要求、动物管理、从业人员的职业安全的要点进行了阐述。 展开更多
关键词 实验动物平台 设施设计 动物管理 人员安全
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小鼠非手术胚胎移植技术影响因素研究
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作者 刘晓静 刘晓欣 +3 位作者 张天存 田永路 李夏莹 韦玉生 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第4期88-96,共9页
目的研究不同非手术移植器、植入胚胎数量、胚胎时期、胚胎品系对小鼠非手术胚胎移植效率的影响以及手术移植和非手术移植效率的比较,以期建立稳定的小鼠非手术胚胎移植技术体系。方法使用非手术的方法进行小鼠的胚胎移植。结果使用两... 目的研究不同非手术移植器、植入胚胎数量、胚胎时期、胚胎品系对小鼠非手术胚胎移植效率的影响以及手术移植和非手术移植效率的比较,以期建立稳定的小鼠非手术胚胎移植技术体系。方法使用非手术的方法进行小鼠的胚胎移植。结果使用两种不同的非手术移植器进行胚胎移植,怀孕率分别为(75.00±0.00)%、(66.67±14.43)%,生仔率分别为(46.11±6.31)%、(18.89±0.96)%;胚胎的数量分为10、15、20枚3组进行非手术移植,怀孕率分别为(66.67±11.55)%、(80.00±0.00)%、(66.67±23.09)%,生仔率分别为(29.33±4.16)%、(38.67±4.81)%、(17.00±3.46)%;将囊胚和桑葚胚进行非手术移植,怀孕率分别为(80.00±0.00)%、(46.67±11.55)%,生仔率分别为(38.67±4.81)%、(10.22±2.77)%;选用C57BL/6J、ICR、基因修饰A、基因修饰B 4个品系小鼠作为供体,进行非手术移植,怀孕率分别为(66.67±11.55)%、(80.00±0.00)%、(73.33±11.55)%、(80.00±0.00)%,生仔率分别为(26.67±2.67)%、(38.67±4.81)%、(32.00±3.53)%、(29.34±2.31)%;手术移植15只假孕鼠,非手术移植15只假孕鼠,怀孕率分别为(80.00±0.00)%、(86.67±11.55)%,生仔率分别为(38.67±4.81)%、(36.00±5.82)%。结论不同移植器进行非手术移植产仔率存在差异;每次移植15枚的胚胎数量移植效率较高;选用囊胚期胚胎进行非手术移植的效率较高;手术移植效率与非手术移植效率无明显差异。 展开更多
关键词 小鼠 非手术移植 胚胎移植
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