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题名冬凌草甲素体内外抗卵巢癌活性及相关机制研究
被引量：7
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作者
何静
严如根
金国钰
苏娜
李长忠
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机构
山东中医药大学第一临床医学院
南京中医药大学中医学院
山东第一医科大学附属省立医院妇科
北京大学深圳医院妇产中心
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出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2023年第4期480-489,共10页
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基金
山东大学荣祥再生医学基金项目(2019SDRX-21)
济南市科学计划项目(202019161)。
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文摘
目的:研究冬凌草甲素(Ori)体内外抗卵巢癌(OC)活性及相关机制。方法:采用网络药理学方法分析Ori抗OC的核心靶点,并通过GO和KEGG富集分析筛选其相关生物学过程和通路。通过分子对接验证Ori与核心靶点的结合活性。用不同浓度(0、5、10、15、20、25、30μmol/L)Ori干预SKOV3细胞24和48 h,采用CCK-8法检测细胞存活率。将SKOV3细胞分为3组:对照组、8μmol/L Ori组、16μmol/L Ori组,给予相应药物干预24 h后,采用EdU染色和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Annexin V-PE/7-AAD染色后流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白(Cleaved-Caspase-3、Bax、Bcl-2)和PI3K/AKT通路相关蛋白(p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT)的表达。加入PI3K激活剂740Y-P后,将细胞分为3组:对照组、16μmol/L Ori组、Ori+740Y-P组,给予相应药物干预24 h后,采用Western blot检测上述凋亡相关蛋白和PI3K/AKT通路相关蛋白的表达,CCK-8法检测细胞存活率。构建OC裸鼠荷瘤模型,将裸鼠分为3组:对照组、15 mg/kg Ori组、30 mg/kg Ori组,每组5只,给予相应药物治疗3周。给药结束后,测量肿瘤体积,采用免疫组化检测瘤组织中Ki-67的表达,HE染色观察主要器官的病理变化。结果:网络药理学研究显示,Ori抗OC的核心靶点是TP53、AKT1、ALB、EGFR、ESR1等,KEGG富集分析显示共有145条通路显著富集,包括癌症通路、PI3K/AKT通路等。分子对接显示大部分核心靶点与Ori有较强的结合活性。细胞实验结果表明,与对照组相比,8和16μmol/L Ori组的EdU阳性细胞率和克隆形成率均降低,细胞凋亡率增加,Cleaved-Caspase-3和Bax表达增加,Bcl-2表达、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT均降低(P<0.05)。与16μmol/L Ori组相比,Ori+740Y-P组的p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和Bcl-2表达增加,细胞存活率升高,Cleaved-Caspase-3和Bax表达降低(P<0.05)。动物实验结果表明,与对照组相比,15和30 mg/kg Ori组肿瘤体积缩小,Ki-67表达降低(P<0.05),且裸鼠的肝、肾、心、肺未见明显病理改变。结论:Ori在体内外均表现出抗OC活性,其机制可能与抑制PI3K/AKT通路进而抑制细胞增殖并诱导凋亡有关,且体内用药安全,可能是一种潜在的抗OC药物。
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关键词
冬凌草甲素
卵巢癌
网络药理学
凋亡
PI3K/AKT通路
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Keywords
oridonin
ovarian cancer
network pharmacology
apoptosis
PI3K/AKT pathway
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分类号
R737.31
[医药卫生—肿瘤]
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