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人肝癌相关新基因编码产物LAPTM4B的鉴定及其生物学特性 被引量：14
1
作者 刘歆荣 周柔丽 +7 位作者 张青云 张页 邵根泽 金月英 张莎 林明 芮静安 叶大雄 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期340-347,共8页
目的 :鉴定由肝细胞癌 (HCC)相关新基因LAPTM 4B编码的蛋白质并研究其生物学特性。方法 :以Westernblot、免疫组化及双向电泳鉴定新基因的表达产物 ;以免疫共沉淀等方法研究分子间的相互作用。结果 :LAPTM4B基因编码相对分子质量分别为 ... 目的 :鉴定由肝细胞癌 (HCC)相关新基因LAPTM 4B编码的蛋白质并研究其生物学特性。方法 :以Westernblot、免疫组化及双向电泳鉴定新基因的表达产物 ;以免疫共沉淀等方法研究分子间的相互作用。结果 :LAPTM4B基因编码相对分子质量分别为 35× 10 3 和 2 4× 10 3 、等电点分别为 9.0 7和 4 .6 5的两种异型分子。它们在肝癌组织及肝癌细胞系的表达显著上调 ,而相对分子质量为 35× 10 3 者尤为明显 ,并与细胞分化程度相关。LAPTM4B蛋白可与整合素α 6亚单位及表皮生长因子 (EGF)受体形成信号复合物。结论 :LAPTM4B 35蛋白在人肝癌组织及细胞系过表达 ,并可能通过与细胞表面的整合素受体及EGF受体形成复合物而参与细胞外基质成分所启动的信号转导。 展开更多
关键词 肝癌 基因编码产物 LAPTM4B 鉴定 生物学特性 信号复合物
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肝癌中高表达的新基因LAPTM4B对细胞增殖及成瘤性的影响 被引量：13
2
作者 何静 邵根泽 周柔丽 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期348-352,共5页
目的 :研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响 ,探讨LAPTM4B基因的生物学功能。方法 :构建真核表达质粒 pcDNA3 TM 4B ,利用脂质体稳定转染LAPTM 4BcDNA至NIH3T3细胞中 ,用RT -PCR、Northern和Wester... 目的 :研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响 ,探讨LAPTM4B基因的生物学功能。方法 :构建真核表达质粒 pcDNA3 TM 4B ,利用脂质体稳定转染LAPTM 4BcDNA至NIH3T3细胞中 ,用RT -PCR、Northern和Western杂交法筛选和鉴定转染后LAPTM4B基因高表达的单克隆细胞株 ,研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化。结果 :与转染空载体的对照组相比 ,转染了LAPTM4BcDNA的NIH3T3细胞表面发生明显变化 ,微绒毛的数量和长度增加 ,多分枝且缠绕成团。转染细胞在纤黏连蛋白、人工基膜和层黏连蛋白基质上的黏附 /铺展能力增强。生长曲线显示转染细胞的生长速率增高。流式细胞仪检测显示转染细胞的S期细胞数比未转染细胞显著增多 ,而G0 ～G1期细胞数减少。Western杂交显示CyclinE蛋白在转染细胞中的表达显著增加。转染细胞对血清的依赖性下降并具有成瘤性。结论 :LAPTM 4B基因能影响细胞增殖的调节 ,促进NIH3T3细胞的增殖 ,并使NIH3T3细胞具有成瘤性 ,在肿瘤发生过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 肝癌 表达 基因 LAPTM4B 细胞增殖 成瘤性
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母亲CYP2E1和PON2148基因多态性与低出生体重的关系 被引量：7
3
作者 陈大方 吴白燕 +3 位作者 杨帆 李莉 陈栎 王黎华 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期345-349,共5页
目的 :探讨母亲对氧磷酶 2基因 [二乙基对硝基苯磷酸酯酶 2基因 (PON2 148) ]多态性位点和细胞色素P45 0IIE1基因 (CYP2E1)多态性位点对低出生体重的影响。方法 :采用病例对照研究方法 ,使用统一设计的调查问卷 ,由经过培训的调查员于 1... 目的 :探讨母亲对氧磷酶 2基因 [二乙基对硝基苯磷酸酯酶 2基因 (PON2 148) ]多态性位点和细胞色素P45 0IIE1基因 (CYP2E1)多态性位点对低出生体重的影响。方法 :采用病例对照研究方法 ,使用统一设计的调查问卷 ,由经过培训的调查员于 1998至 1999年在安徽省安庆市各县级医院对入院分娩孕妇及其单胎、活产的低出生体重儿和正常出生体重的对照新生儿进行调查 ,共得到有效样本 2 31个母亲新生儿对 ,其中低出生体重组 6 5对 ,正常出生体重对照组 16 6对。结果 :单因素分析结果显示 ,突变纯合子基因型 /杂合子基因型与野生纯合子基因型比较 ,未见CYP2E1多态性位点和PON2 148多态性位点导致低出生体重的危险性有显著性增加。多因素Logistic回归模型经母亲年龄、文化程度、生育史 ,新生儿性别、孕周混杂因素调整后 ,可见CYP2E1多态性位点和PON2 148多态性位点均导致低出生体重的危险性增加 (CYP2E1,OR =2 .4,95 %CI为 1.17～ 4.89;PON2 148,OR =2 .16 ,95 %CI为 1.0 6～ 4.41) ,并且有显著的统计学意义。经进一步分析CYP2E1多态性位点和PON2 148多态性位点之间对低出生体重的影响 ,其结果显示 :这两个多态性位点之间无明显交互作用 ,它们是低出生体重的独立危险因素。结论 :CYP2E1多态性位点和PON2 148多态性? 展开更多
关键词 CYP2E1 PON2148 基因多态性 低出生体重
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神经干细胞及帕金森病的细胞治疗 被引量：9
4
作者 李凌松 路艳艳 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期499-505,共7页
新的观点认为 ,包括人在内的哺乳动物中枢神经系统 (centralnervoussystem ,CNS)内在胚胎期和成体期都存在着具有自我复制和多潜能分化特性的神经干细胞。对神经干细胞的深入认识不仅对神经发育和神经可塑性的研究有重要的理论意义 ,而... 新的观点认为 ,包括人在内的哺乳动物中枢神经系统 (centralnervoussystem ,CNS)内在胚胎期和成体期都存在着具有自我复制和多潜能分化特性的神经干细胞。对神经干细胞的深入认识不仅对神经发育和神经可塑性的研究有重要的理论意义 ,而且为移植治疗帕金森病等神经系统疾病带来了希望。本文结合本实验室在神经干细胞培养、诱导分化、移植治疗帕金森病等的研究 。 展开更多
关键词 神经干细胞 帕金森病 治疗 细胞移植 干细胞 生长 发育
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轴突影响施万细胞分化与整合素α_6β_4表达
5
作者 钟延丰 任碧和 +5 位作者 王立军 由江峰 王盛兰 王薇 杨金辉 胡白和 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期122-126,共5页
目的 :探讨轴突对施万细胞 (Schwanncells,SC)分化成熟与髓鞘形成的影响 ,及在SC的极向分化过程中整合素α6β4 的表达。方法 :用Wistar乳鼠坐骨神经分离SC ,用其脊髓分离神经细胞。经纯化后分别培养及共同培养。用扫描电镜观察二者的... 目的 :探讨轴突对施万细胞 (Schwanncells,SC)分化成熟与髓鞘形成的影响 ,及在SC的极向分化过程中整合素α6β4 的表达。方法 :用Wistar乳鼠坐骨神经分离SC ,用其脊髓分离神经细胞。经纯化后分别培养及共同培养。用扫描电镜观察二者的形态及髓鞘形成情况 ;分别用髓鞘碱性蛋白 (myelinbasicprotein ,MBP)、神经微丝 (neu rofilament ,NF)抗体进行免疫标记 ;采用原位杂交技术检测整合素α6β4 mRNA的表达。结果 :单独培养的SCMBP抗原表达阴性 ;原位杂交检测α6β4 表达阴性。SC与神经细胞共同培养时其MBP阳性 (说明其已转变为髓鞘形成细胞 ) ,在神经突起周围表达阳性 ;扫描电镜可见SC与神经细胞贴附、融合、包绕轴突形成髓鞘 ;原位杂交显示α6β4在SC与神经轴突相贴附处呈线状阳性表达。结论 :SC的分化成熟及髓鞘形成呈轴突依赖性 ,仅在与神经细胞共同培养时 ,才开始形成髓鞘。它在包绕轴突形成髓鞘时 ,α6β4 在SC表面沿基膜呈方向性表达 ,在SC与基膜、细胞外基质之间起信号传导作用 ,使增生的SC具有极性并发生形态结构的改变。在SC的分化成熟及髓鞘形成的过程中 。 展开更多
关键词 SC培养 轴突 整合素Α6Β4 髓鞘形成 施万细胞
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母亲与婴儿亚甲基四氢叶酸还原酶C677T多态性与早产和低出生体重的相关性研究(英文) 被引量：8
6
作者 陈大方 胡永华 +4 位作者 杨帆 吴白燕 陈枥 方治安 王黎华 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期248-253,共6页
目的 :探讨早产和低出生体重与母亲和婴儿 5 10亚甲基四氢叶酸还原酶基因 (MTHFR)C6 77T多态性的关系。方法 :采用病例对照及核心家系的研究设计 ,共调查了 5 0 0个核心家系 ,包括 2 5 0个正常孕周出生的核心家系和 2 5 0个早产核心家... 目的 :探讨早产和低出生体重与母亲和婴儿 5 10亚甲基四氢叶酸还原酶基因 (MTHFR)C6 77T多态性的关系。方法 :采用病例对照及核心家系的研究设计 ,共调查了 5 0 0个核心家系 ,包括 2 5 0个正常孕周出生的核心家系和 2 5 0个早产核心家系。采用盐沉淀法提取基因组DNA ,通过聚合酶链式反应 (PCR)对 5 10亚甲基四氢叶酸还原酶基因C6 77T多态性进行基因型鉴定。通过SAS软件的广义线性模型 (GENMOD) ,选用对数线性模型 (Log linearModel)中的泊松回归进行最大拟然比检验 (MaximumLikelihoodRatioTest) ,分析母亲和婴儿MTHFR基因分别与早产和低出生体重的关系。结果 :首先 ,我们采用TDT方法分别检验了早产和低出生体重对照核心家系MTHFR 6 77T等位基因传递是否平衡 ,研究结果表明MTHFR 6 77T突变等位基因传递符合孟德尔遗传规律。之后 ,我们分析了MTHFR基因与早产和低出生体重的关系。结果显示 :婴儿MTHFRCT和TT基因型不但增加早产的发生危险性且具有显著的统计学意义 (CT基因型 :OR =2 .0 1,95 %CI为 1.2 1～ 3.32 ;TT基因型 :OR为 1.82 ,95 %CI为 1.0 2～ 3.26 ) ,而且婴儿MTHFR基因能够增加低出生体重的发生危险且具有显著的统计学意义 (CT基因型 :OR =1.87,95 %CI为 1.0 8～ 3.2 4 ;TT基因型 :OR =1. 展开更多
关键词 母亲 婴儿 亚甲基四氢叶酸还原酶 C677T多态性 早产 低出生体重 基因型
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肿瘤坏死因子α/G30 8A多态性与早产的关联性研究(英文) 被引量：2
7
作者 陈大方 胡永华 +4 位作者 吴白燕 陈枥 方治安 杨帆 王黎华 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期377-381,共5页
目的 :探讨肿瘤坏死因子α/G30 8A多态性对早产的影响 ,于 1997年 7月至 2 0 0 1年 6月 ,在安徽省安庆市医院进行了一项早产遗传影响因素的分子流行病学调查。方法 :采用病例对照及核心家系的研究设计 ,于 1997年 7月至 2 0 0 1年 6月 ... 目的 :探讨肿瘤坏死因子α/G30 8A多态性对早产的影响 ,于 1997年 7月至 2 0 0 1年 6月 ,在安徽省安庆市医院进行了一项早产遗传影响因素的分子流行病学调查。方法 :采用病例对照及核心家系的研究设计 ,于 1997年 7月至 2 0 0 1年 6月 ,在安徽省安庆市医院收集了 133个核心家系的资料。其中 5 4个家系为早产家系 ,79个家系为正常分娩孕周家系。全血采用 puregene Kit试剂盒提取基因组DNA ,PCR方法鉴定肿瘤坏死因子α基因型。结果 :首先采用多元Logistic回归模型分析了婴儿肿瘤坏死因子α/G30 8A多态对早产的影响 ,以G30 8G同源野生基因型作为参照组 ,研究发现 ,A30 8A同源突变基因型能够显著增加早产的危险性 [OR =0 .0 39,95 %CI:1.14～12 8.75 ]。考虑到以人群为基础的病例对照研究由于人群遗传背景的异质性 ,从而可能导致疾病与基因之间统计结果的假相关 ,本研究进一步采用了以核心家系为基础的家系关联分析 ,发现 30 8A突变等位基因隐性遗传模型结果和叠加模型结果均显示对早产产生不良影响 ,其P值分别为 0 .0 4和 0 .0 18,与多元Logistic回归模型的研究结果一致。结论 :婴儿肿瘤坏死因子α/G30 8A基因中的 30 8A突变等位基因与早产相关 ,可能为早产的遗传易感位点之一。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子Α G308A 多态性 早产 关联性研究
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前列腺癌患者外周血中前列腺特异抗原,前列腺特异膜抗原和人腺体激肽释放酶mRNA的表达及临床意义 被引量：1
8
作者 徐涛 陈希 +4 位作者 王晓峰 侯树坤 朱积川 张小东 黄晓波 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期164-168,共5页
目的 :采用巢式RT -PCR方法 ,检测前列腺癌合并骨转移的患者外周血中前列腺特异抗原 (PSA)、前列腺特异膜抗原 (PSMA)和人腺体激肽释放酶mRNA的表达 ,探讨其临床意义。方法 :应用巢式RT -PCR的方法 ,检测外周血中PSA、PSMA和hK2mRNA表... 目的 :采用巢式RT -PCR方法 ,检测前列腺癌合并骨转移的患者外周血中前列腺特异抗原 (PSA)、前列腺特异膜抗原 (PSMA)和人腺体激肽释放酶mRNA的表达 ,探讨其临床意义。方法 :应用巢式RT -PCR的方法 ,检测外周血中PSA、PSMA和hK2mRNA表达。结果 :巢式PCR能够检测到经淋巴细胞稀释的LNCaP细胞的PSA、PSM和hK2mRNA的灵敏度 ,稀释浓度分别为 1 0 -6、1 0 -6及 1 0 -7。检测初发伴骨转移的前列腺癌患者外周血PSA、PSMA和hK2mRNA的阳性率分别为 5 9.4 5 %、5 1 .35 %、5 9.4 6 % ,其中三种检测同时阳性的为 32 .4 3% ;检测接受内分泌治疗后出现骨转移的前列腺癌患者的阳性率分别为 5 7.1 4 %、85 .71 %、83.33% ,其中三种检测同时阳性的为 5 2 .4 8%。局限性前列腺癌患者、健康男性及健康女性的检测结果均为阴性。以 β actinmRNA做为内参照 ,所有临床标本检测均为阳性。结论 :采用巢式RT PCR检测前列腺癌患者外周血PSMA、hK2和PSAmRNA有助于发现进入循环系统的前列腺癌细胞 ,提示隐匿性转移的存在。PSMA和hK2较适合用于内分泌治疗后患者的检测。 展开更多
关键词 前列腺癌 外周血 前列腺特异抗原 激肽释放酶 临床意义 巢式RT-PCR 骨转移癌
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LAPTM4B启动子荧光素酶报告基因重组体的构建 被引量：1
9
作者 彭方毅 张青云 +2 位作者 周柔丽 邵根泽 涂植光 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期337-339,共3页
目的:LAPTM4B基因是肝癌中高度表达的新基因。为下一步LAPTM4B启动子的活性分性,本文构建了LAPTM4B基因启动子调控的报告基因重组表达质粒。方法:以LAPTM4B基因组cDNA为模板扩增翻译起始位点上游DNA序列。PCR产物定向克隆到含荧光素酶... 目的:LAPTM4B基因是肝癌中高度表达的新基因。为下一步LAPTM4B启动子的活性分性,本文构建了LAPTM4B基因启动子调控的报告基因重组表达质粒。方法:以LAPTM4B基因组cDNA为模板扩增翻译起始位点上游DNA序列。PCR产物定向克隆到含荧光素酶报告基因的载体pGL3-Basic中,并经限制性内切酶消化鉴定。结果:通过酶切鉴定和基因测序,证明成功地构建了三种不同长度的pGL3-LAPTM4B-Luc荧光素酶表达质粒,形成了系列的LAPTM4B启动子重组体。结论:充分利用生物信息学资源,利用已知基因的启动子序列,可快速,准确地克隆已知基因启动子序列并构建启动子载体。LAPTM4B启动子荧光素酶报告基因重组体的构建为LAPTM4B启动子的活性分析奠定了基础。 展开更多
关键词 LAPTM4B 基因表达 启动子
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