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骨髓细胞移植上调血管内皮生长因子及其受体的表达并改善缺血心脏功能 被引量：16
1
作者 张少衡 贾竹青 +6 位作者 郭静萱 张 马康涛 王淑玲 刘永刚 李凌松北京大学干细胞研究中心 周春燕 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期429-433,共5页
目的 :通过骨髓细胞移植对心肌梗死大鼠模型血管内皮生长因子及其受体表达的影响 ,探讨骨髓细胞移植改善缺血心脏功能的可能机制。方法 :利用左前降支冠状动脉结扎术制备大鼠心肌梗死模型 ,然后行异体骨髓细胞移植 ;分别于术后 1d ,3d ,... 目的 :通过骨髓细胞移植对心肌梗死大鼠模型血管内皮生长因子及其受体表达的影响 ,探讨骨髓细胞移植改善缺血心脏功能的可能机制。方法 :利用左前降支冠状动脉结扎术制备大鼠心肌梗死模型 ,然后行异体骨髓细胞移植 ;分别于术后 1d ,3d ,7d ,14d和 2 8d取材 ;利用免疫荧光和RT -PCR技术分析细胞移植对血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (Flk 1)表达的影响和移植细胞的分化情况 ;通过免疫组化计算血管数量 ;应用血流动力学检测大鼠心脏功能在术后各时间点的变化。结果 :VEGF和Flk 1在移植组动物的心肌梗死区残存细胞、梗死周边区细胞以及部分移植细胞内表达。移植组VEGF和Flk 1的mRNA表达明显高于对照组 ,分别于术后 3d和 14d达到高峰 ,以后逐渐减弱。术后 7d ,14d和 2 8d移植组血管数量较同期对照组明显增加 ,移植组心脏功能较对照组明显改善。术后 14d可在部分移植细胞中检测到心肌细胞或血管内皮细胞特异性蛋白的表达。结论 :骨髓细胞移植通过上调移植细胞及受者内源性VEGF和Flk 1的表达 ,促进血管新生 ,进而改善缺血心脏功能。 展开更多
关键词 骨髓细胞移植 血管内皮生长因子 受体 表达 缺血心脏功能
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骨髓细胞移植上调急性缺血心肌HSP32和HSP70的表达 被引量：8
2
作者 张少衡 郭静萱 +8 位作者 张萍 刘永刚 贾竹青 冯新恒 李照屏 李卫虹 马康涛 周春燕 李凌松 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期476-480,共5页
目的 :检测骨髓细胞移植在急性心肌梗死大鼠模型中对细胞保护性蛋白HSP32和HSP70表达水平的影响 ,探讨细胞移植早期改善缺血心脏功能的可能机制。方法 :通过结扎冠状动脉左前降支制备大鼠心肌梗死模型 ,直视下心外膜注射 5× 10 6... 目的 :检测骨髓细胞移植在急性心肌梗死大鼠模型中对细胞保护性蛋白HSP32和HSP70表达水平的影响 ,探讨细胞移植早期改善缺血心脏功能的可能机制。方法 :通过结扎冠状动脉左前降支制备大鼠心肌梗死模型 ,直视下心外膜注射 5× 10 6骨髓单个核细胞 ;利用免疫荧光和RT -PCR技术检测HSP32和HSP70在术后 1d、3d、7d和 14d的表达变化和移植细胞的分化情况 ;通过超声心动图分析心脏功能左室射血分数 (EF值 )和缩短分数(FS值 )。结果 :免疫荧光结果显示 ,缺血心肌中HSP32和HSP70的表达在移植组明显增强 ,并表达于部分移植细胞内。RT -PCR结果表明 ,移植组HSP32和HSP70的mRNA表达明显高于对照组 ,术后 3d达到高峰 ,比对照组分别增加 5 .0倍和 2 .9倍 (P <0 .0 1)。术后 7d ,移植组EF值和FS值明显高于同期对照组 (14 %和 2 2 % ,P <0 .0 5 ) ;术后 14d ,可在移植的骨髓细胞中检测到心肌细胞和血管内皮细胞特异性蛋白的表达 ,EF值和FS值进一步增加。结论 :骨髓细胞移植早期 ,细胞移植能够上调细胞保护性蛋白的表达 。 展开更多
关键词 骨髓细胞移植 急性缺血心肌 HSP32 HSP70 表达 热休克蛋白质类
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“混合克隆”快速筛选重组体
3
作者 陆纲 鹿培源 贾弘禔 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期86-87,共2页
目的 :从DNA重组体中快速鉴定出阳性克隆。方法 :通过将单克隆菌液混合分组提取质粒酶切鉴定找出阳性组 ,再从阳性组中鉴定出阳性单克隆。结果 :1 4组混合克隆中 2组为阳性 ,在 2个阳性组 8个单克隆中鉴定出 2个阳性单克隆。结论 :采用... 目的 :从DNA重组体中快速鉴定出阳性克隆。方法 :通过将单克隆菌液混合分组提取质粒酶切鉴定找出阳性组 ,再从阳性组中鉴定出阳性单克隆。结果 :1 4组混合克隆中 2组为阳性 ,在 2个阳性组 8个单克隆中鉴定出 2个阳性单克隆。结论 :采用混合克隆方法筛选重组体可大大缩短筛选时间 ,而且没有假阴性 ,是一种既快又可靠的方法。目的 :从DNA重组体中快速鉴定出阳性克隆。方法 :通过将单克隆菌液混合分组提取质粒酶切鉴定找出阳性组 ,再从阳性组中鉴定出阳性单克隆。结果 :1 4组混合克隆中 2组为阳性 ,在 2个阳性组 8个单克隆中鉴定出 2个阳性单克隆。结论 :采用混合克隆方法筛选重组体可大大缩短筛选时间 ,而且没有假阴性 ,是一种既快又可靠的方法。 展开更多
关键词 重组DNA 克隆 遗传载体 基因扩增 分子克隆
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