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层粘连蛋白特异性受体——整合素α6亚单位胞外区单克隆抗体的制备及鉴定
被引量：
1
1
作者
吕天敬
张青云
周柔丽
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期183-186,共4页
目的 :制备针对整合素α6胞外区的单克隆抗体并鉴定其生物学特异性。方法 :利用整合素α6cDNA构建可表达整合素α6胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达GST———整合素α6胞外区融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫Balb C小鼠 ...
目的 :制备针对整合素α6胞外区的单克隆抗体并鉴定其生物学特异性。方法 :利用整合素α6cDNA构建可表达整合素α6胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达GST———整合素α6胞外区融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫Balb C小鼠 ,取其脾细胞 ,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养。单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛后 ,分析其亚类及进行免疫细胞化学鉴定。结果 :经ELISA双筛 ,获得了一株能稳定分泌针对整合素α6胞外区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,其分泌抗体亚类为IgG1。免疫细胞化学显示此单抗在人肝癌细胞系BEL 74 0 2呈强阳性反应。结论 :通过原核表达产物制备并纯化了针对整合素α6胞外区的单克隆抗体 ,对分离纯化α6亚单位、研究其生物学作用及鉴定正常和疾病状态下是否表达整合素α6及其水平具有重要意义。
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关键词
整合素
层粘连蛋白受体
杂交瘤
单克隆抗体
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题名
层粘连蛋白特异性受体——整合素α6亚单位胞外区单克隆抗体的制备及鉴定
被引量：
1
1
作者
吕天敬
张青云
周柔丽
机构
北京大学
临床肿瘤
学院
北京
市肿瘤防治研究所免疫室
北京大学基础医学院医学细胞生物学系
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期183-186,共4页
基金
北京市自然科学基金 ( 70 2 2 0 0 6)
高等学校博士学科点专项科研基金资助
文摘
目的 :制备针对整合素α6胞外区的单克隆抗体并鉴定其生物学特异性。方法 :利用整合素α6cDNA构建可表达整合素α6胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达GST———整合素α6胞外区融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫Balb C小鼠 ,取其脾细胞 ,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养。单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛后 ,分析其亚类及进行免疫细胞化学鉴定。结果 :经ELISA双筛 ,获得了一株能稳定分泌针对整合素α6胞外区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,其分泌抗体亚类为IgG1。免疫细胞化学显示此单抗在人肝癌细胞系BEL 74 0 2呈强阳性反应。结论 :通过原核表达产物制备并纯化了针对整合素α6胞外区的单克隆抗体 ,对分离纯化α6亚单位、研究其生物学作用及鉴定正常和疾病状态下是否表达整合素α6及其水平具有重要意义。
关键词
整合素
层粘连蛋白受体
杂交瘤
单克隆抗体
Keywords
Integrin
Laminin receptor
Hybridoma
Monoclonal antibody
分类号
R813.2 [医药卫生—放射医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
层粘连蛋白特异性受体——整合素α6亚单位胞外区单克隆抗体的制备及鉴定
吕天敬
张青云
周柔丽
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
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