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用MAPs制备新肿瘤相关基因1 A6/DRIM的多克隆抗体 被引量：3
1
作者 黄莹莹 武晓楠 +4 位作者 杜晓娟 宁涛 李宁 朱军 柯杨 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期390-393,共4页
目的 :获得 1A6 /DRIM的N端特异性抗体并对其在细胞内的定位进行分析。方法 :针对 1A6 /DRIM的N端多肽用多通道同步固相全自动合成系统合成 ,以无免疫原性的赖氨酸结构为核心偶联 ,将此多聚抗原肽 (mutipleantigenicpeptides,MAPs)免疫... 目的 :获得 1A6 /DRIM的N端特异性抗体并对其在细胞内的定位进行分析。方法 :针对 1A6 /DRIM的N端多肽用多通道同步固相全自动合成系统合成 ,以无免疫原性的赖氨酸结构为核心偶联 ,将此多聚抗原肽 (mutipleantigenicpeptides,MAPs)免疫新西兰大白兔 ,从免疫兔血清中获得 1A6 /DRIM的多克隆抗体。结果 :用WesternBlot技术证明了 1A6 /DRIM的N端抗体 ,与C端特异性单克隆抗体识别相同的 1A6 /DRIM基因表达的 31 0 0 0 0蛋白条带 ,经过WesternBlot和免疫荧光的方法初步证实 1A6 /DRIM在多种胃癌细胞系、乳腺癌细胞系以及肝癌细胞系中表达 ,免疫荧光显示 1A6 /DRIM主要定位在细胞核内。结论 :对于用谷胱苷肽巯基转移酶 (Glutathion S transferase ,GST)融合蛋白方法不能诱导表达的蛋白 ,可利用合成MAPs制备抗原的方法获得抗体。本研究用此方法制备的抗体特异性识别 1A6 展开更多
关键词 MAPS 肿瘤基因 1A6/DRIM 多克隆抗体 赖氨酸结构
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荧光实时定量PCR检测NSCLC中PEDF基因表达状态的研究 被引量：4
2
作者 张力建 陈晋峰 +2 位作者 柯杨 Robert E Mansel Wen G Jiang 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第2期177-181,共5页
背景与目的SYBRGreenⅠ是一种较为常用的非探针类定量PCR的方法,其主要优点在于操作过程简单,结果具有一定特异性。本研究的目的是建立检测色素上皮衍生因子(pigmentepitheliumderivedfactor,PEDF)mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR的方法,... 背景与目的SYBRGreenⅠ是一种较为常用的非探针类定量PCR的方法,其主要优点在于操作过程简单,结果具有一定特异性。本研究的目的是建立检测色素上皮衍生因子(pigmentepitheliumderivedfactor,PEDF)mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR的方法,了解肺癌组织及其远癌肺组织中PEDF的表达水平,研究肺癌组织中PEDF的表达水平与各种临床病理特征之间的关系。方法利用RTPCR的方法扩增并纯化PEDF以及内对照GAPDHmRNA的目的片段,倍比稀释后作为定量模板。利用相对定量的方法,检测21例肺癌及相应远癌肺组织中PEDFmRNA相对于GAPDHmRNA的表达量,进行相对定量分析。结果21例肺癌组织及相应的远癌肺组织中均可检出PEDF的表达,肺癌组织中PEDF的相对表达量为0.5505±0.3590(0.11～1.11),远癌肺组织中为0.7219±0.2582(0.29～1.31)(P=0.024)。早期(Ⅰ～Ⅱ期)肺癌患者和肿瘤较小时(T1)PEDF的表达量显著高于晚期(Ⅲ～Ⅳ期,P=0.010)和肿瘤较大者(T2～4,P=0.007)。结论所建立的SYBRGreenⅠ实时定量PCR方法可以成功地检测PEDF基因的表达量。初步检测结果显示PEDF可能是一种肺癌发生发展过程中的保护因素。 展开更多
关键词 PEDF 非小细胞肺癌 实时定量聚合酶链反应 SYBR GreenⅠ
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中国安阳地区人群IRF-3基因Codon427位点多态性与食管癌的关联性研究 被引量：3
3
作者 张春凤 曹邦伟 +4 位作者 陆哲明 邢海平 崔建国 宁涛 柯杨 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期345-347,共3页
目的 :探讨河南省安阳地区人群干扰素调节因子 3(interferonregulatoryfactor 3,IRF 3)基因单核苷酸多态性 (singlenucleotidepolymorphisms ,SNPs )与食管癌发生的关联。方法 :提取安阳地区 1 5 2例食管癌患者及当地食管拉网普查个体 1... 目的 :探讨河南省安阳地区人群干扰素调节因子 3(interferonregulatoryfactor 3,IRF 3)基因单核苷酸多态性 (singlenucleotidepolymorphisms ,SNPs )与食管癌发生的关联。方法 :提取安阳地区 1 5 2例食管癌患者及当地食管拉网普查个体 1 91例外周血基因组DNA ,用PCR方法扩增IRF 3基因含Codon 96、1 94、377、4 2 7这 4个多态性位点的片段 ,并采用DNA直接测序法明确个体基因型 ,用 χ2 检验计算多态性分布频率。结果 :IRF 3基因Codon 96、1 94、377处 3个多态性位点在安阳人群中没有多态性 ,Codon 4 2 7位点在安阳正常人群与安阳食管癌患者两组间差异有显著性 ,OR =2 .38(95 %CI=1 .1 5～ 4 .95 ,P <0 .0 5 )。结论 :IRF 3基因Codon 4 2 7的多态性增加食管癌发生的易感性 ,在增加食管癌的发病风险性方面 ,C等位基因约是G等位基因的 2 . 展开更多
关键词 中国 安阳地区 IRF-3基因 Codon427位点 基因多态性 食管癌 肿瘤 核苷酸类 干扰素类
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