SOX12基因在Vero细胞感染猪流行性腹泻病毒过程中的功能研究

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作者 向娇娇 元娜 +6 位作者 李慧慧 邵明珠 赵福平 张龙超 王立贤 石丽君 陈斌 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期289-297,共9页

[目的]探究SOX12基因对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响,以期为抗PEDV育种提供有效分子标记。[方法]本研究合成3条SOX12基因干扰序列(siRNA1、siRNA2、siRNA3)及其阴性对照(siNC)并转染至非洲绿猴... [目的]探究SOX12基因对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响,以期为抗PEDV育种提供有效分子标记。[方法]本研究合成3条SOX12基因干扰序列(siRNA1、siRNA2、siRNA3)及其阴性对照(siNC)并转染至非洲绿猴肾细胞(Vero细胞),转染48 h后收集细胞,利用实时荧光定量PCR检测干扰效率。将有效的干扰片段和siNC分别转染至Vero细胞24 h后,用感染复数为0.05的PEDV感染细胞,分为4组:感染PEDV 12 h试验组(12 hpi-siRNA)、感染PEDV 12 h对照组(12 hpi-siNC)、感染PEDV 24 h试验组(24 hpi-siRNA)及感染PEDV 24 h对照组(24 hpi-siNC),利用实时荧光定量PCR检测PEDV N及SOX12基因的表达水平,通过Western blotting检测各组细胞PEDV N蛋白表达水平,利用组织半数感染量(50%tissue culture infective dose, TCID_(50))检测PEDV的病毒滴度,并利用间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)法检测各组细胞中PEDV复制情况。通过GeneMANIA网站预测SOX12基因的互作基因,利用实时荧光定量PCR检测抑制SOX12基因表达后其互作基因的表达变化。[结果]SOX12基因3条干扰片段的干扰效率为30%~60%,其中siRNA3干扰效率最高,可达60%。与12 hpi-siNC和24 hpi-siNC组相比,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组PEDV N基因的转录和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。病毒滴度表型测定结果表明,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组的PEDV病毒滴度显著低于各自对照组(P<0.05);IFA结果也表明,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组的PEDV复制明显少于对照组。基因互作预测及实时荧光定量PCR检测结果显示,与siNC组相比,干扰SOX12基因的表达后,其互作基因SOX17、DDX51、ZMIZ2、SSRP1、TAF6和ABCB8的表达水平均显著降低(P<0.05)。[结论]本研究揭示了SOX12基因在PEDV感染Vero细胞过程中的调控作用,发现SOX12基因的下调表达能显著抑制PEDV复制和其互作基因SOX17、DDX51、ZMIZ2、SSRP1、TAF6和ABCB8的表达。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) SOX12基因 VERO细胞 基因干扰

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不同纤维原料对妊娠母猪刻板行为和粪便微生物的影响 被引量：6

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作者 代发文 林涛 +3 位作者 苏保元 姚宏明 刘辉 杨瑶君 《中国饲料》 北大核心 2021年第23期35-39,共5页

为研究不同纤维原料对妊娠母猪刻板行为和粪便微生物的影响,试验选取已配种的长大二元母猪300头,根据胎次、配种时间和膘情随机分为3组,每组100头母猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组1(TRE1组)和试验组2(TRE2组)分别在基础饲粮中添加1%可... 为研究不同纤维原料对妊娠母猪刻板行为和粪便微生物的影响,试验选取已配种的长大二元母猪300头,根据胎次、配种时间和膘情随机分为3组,每组100头母猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组1(TRE1组)和试验组2(TRE2组)分别在基础饲粮中添加1%可溶性纤维(SF)原料YWS和2.5%不可溶性纤维(ISF)原料饲用竹粉。试验期为14 d。结果显示:采用直接发酵法TRE1组试验饲粮发酵48 h重量损失率最大,采用预消化发酵法TRE2组最大。与对照组相比,TRE1和TRE2组妊娠前期、中期和后期母猪空口咀嚼比例均降低,TRE1和TRE2组母猪粪便总需氧菌数均显著降低(P<0.05)。TRE2组母猪粪便大肠杆菌数量显著低于TRE1组(P<0.05),乳酸菌/大肠杆菌比值有高于TRE1组的趋势(P=0.096)。结果表明,添加SF或ISF纤维原料均可改善妊娠母猪刻板行为,两种纤维原料饲用竹粉和YWS在调控饲料可发酵性和粪便菌群组成方面存在较大差异。 展开更多

关键词 纤维来源 妊娠母猪 可发酵性 空口咀嚼比例 粪便微生物

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黄曲霉毒素B1的分子致毒机理及其微生物脱毒研究进展 被引量：28

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作者 赵萌 高婧 +1 位作者 褚华硕 梁志宏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第11期235-245,共11页

黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)对人类和动物健康构成威胁。微生物脱毒方法安全、高效,已成为目前研究的热点,但仍然存在着作用周期长、脱毒功能不稳定、分离纯化难等瓶颈。因此,找到有效脱除AFB1的方法和应对措施对保障食品安全至关... 黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)对人类和动物健康构成威胁。微生物脱毒方法安全、高效,已成为目前研究的热点,但仍然存在着作用周期长、脱毒功能不稳定、分离纯化难等瓶颈。因此,找到有效脱除AFB1的方法和应对措施对保障食品安全至关重要。本文概述了AFB1的分子致毒机理,包括其在基因和蛋白质层面的作用机理以及毒性位点研究概况;重点阐述了微生物脱毒进展中吸附和降解两种机制的解毒方法,以及细菌、真菌微生物本身及其代谢物的脱毒研究、脱毒酶的发现及机理研究,并对高效、无污染的AFB1脱毒技术的前景进行展望。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 分子致毒机理 微生物脱毒 脱毒机理

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猪伪狂犬病的诊断和防控效果评估 被引量：2

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作者 元娜 张美美 +2 位作者 耿健 李向清 赵宝凯 《养猪》 2023年第1期89-95,共7页

为了研究山西某规模化猪场发病原因、感染猪伪狂犬病毒(PRV)毒株及防控措施的有效性。通过观察分析猪群生产指标、临床表现和剖检变化,采集病猪组织、血清和猪场使用的疫苗,采用实时荧光定量PCR(qPCR)、病毒分离培养、PRVgC基因测序、... 为了研究山西某规模化猪场发病原因、感染猪伪狂犬病毒(PRV)毒株及防控措施的有效性。通过观察分析猪群生产指标、临床表现和剖检变化,采集病猪组织、血清和猪场使用的疫苗,采用实时荧光定量PCR(qPCR)、病毒分离培养、PRVgC基因测序、中和抗体检测和ELISA抗体检测等方法,确诊疾病、鉴定病原、评估防控效果。表明猪场发病猪只检测PRV核酸阳性,从仔猪脑组织中分离到PRV,将其命名为PRV-TZ,母猪gE抗体阳性率从15.00%升高到84.62%,确诊猪场感染了PRV,且此毒株gC基因与国内2012年后流行变异毒株TJ、CD2019和SN2018等毒株同源性高达100.00%,与市场上HB2000弱毒疫苗同源性为99.70%,与C株弱毒疫苗同源性为95.82%,推断该猪场因免疫不能提供完全保护而造成猪只发病。猪场更换成HB2000疫苗免疫后2个月,母猪流产率降至0%,仔猪成活率恢复到发病前,针对PRV-TZ株的中和抗体1:32所占比例由更换疫苗前的0.00%升高到68.75%,预测当中和抗体1:32以上的比例达到60%时可阻止猪群继续感染。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 实验室诊断 病毒分离 中和抗体 免疫效果

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大白猪仔猪感染流行性腹泻病毒后空肠转录组学变化研究 被引量：1

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作者 李慧慧 张美美 +3 位作者 元娜 张龙超 王立贤 石丽君 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4141-4149,共9页

【目的】猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的广泛流行给猪场造成了严重损失。现有疫苗对其变异毒株的防控作用非常有限,从宿主角度筛选的有效免疫相关分子标记仍然缺乏。本研究旨在鉴定感染和未感染猪流行性腹泻病毒(Porcin... 【目的】猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的广泛流行给猪场造成了严重损失。现有疫苗对其变异毒株的防控作用非常有限,从宿主角度筛选的有效免疫相关分子标记仍然缺乏。本研究旨在鉴定感染和未感染猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的大白猪仔猪空肠组织差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),为PEDV致病机制研究奠定基础。【方法】以8头未吃初乳的0日龄大白猪为试验动物,使用人工乳饲喂至3日龄,随机挑选4头进行攻毒(感染组),其余4头作为对照组。收集感染后死亡及对照组仔猪的空肠组织进行转录组测序。通过差异表达分析筛选与病毒复制及机体免疫应答相关的基因,对DEGs进行GO功能和KEGG通路注释,并随机挑选5个DEGs进行实时荧光定量PCR验证。【结果】通过对测序数据质控、比对等分析共鉴定到16256个蛋白编码基因(protein coding genes,PCGs),通过差异分析鉴定到1328个DEGs,其中629个表达上调,699个表达下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,上调的DEGs显著参与了106个的GO条目和36条KEGG通路,主要与有机体系统和环境信号过程有关;下调的DEGs显著参与了54个GO条目和23条KEGG通路,主要与代谢反应有关。通过对CCND 2、CREBBP、EGFR、MCL 1、PIK 3 CB进行实时荧光定量PCR检测发现,其表达趋势与转录组测序结果一致。【结论】本研究鉴定到1328个DEGs,其中629个表达上调,699个表达下调,上调基因主要参与环境信息处理、有机体系统通路,下调基因主要参与代谢通路,为探究PEDV致病的分子机制提供了理论依据。 展开更多

关键词 大白猪仔猪 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 转录组 功能富集

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鸡心包积液-肝炎综合症近6年发病情况调查 被引量：1

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作者 尹卫卫 元娜 袁万哲 《中国动物保健》 2022年第10期62-64,共3页

本研究分别从空间、时间、人文3个维度对鸡心包积液-肝炎综合症进行发病调查。结果显示:在空间上,HPS由山东、江苏等地向北的东北三省、向西邻省逐渐蔓延;在时间上,2016年出现峰值;以及人文上一线养殖人员对HPS疾病认知水平的提升。

关键词 鸡心包积液肝炎综合症 流行病学

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益生菌安全性和有效性评价方法的研究进展 被引量：29

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作者 冯媛媛 乔琳 +3 位作者 姚宏明 刘蕊 介琳霞 高长斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第7期2022-2032,共11页

益生菌是指一类活的、摄入足够量就能够对人体产生有益作用的微生物,目前广泛应用于食品和饲料工业领域。随着市场上商品化益生菌的不断出现,如何评价一个菌株的安全性及有效性成为人们关注的问题。目前,益生菌的评价主要从安全性和有... 益生菌是指一类活的、摄入足够量就能够对人体产生有益作用的微生物,目前广泛应用于食品和饲料工业领域。随着市场上商品化益生菌的不断出现,如何评价一个菌株的安全性及有效性成为人们关注的问题。目前,益生菌的评价主要从安全性和有效性入手,安全性和有效性评价又包括体内和体外的评价。很多企业在开发益生菌产品时很少对菌株做出全面的安全性评价,而且各国研究者采用的评价指标和评价方法也不尽相同。对于有效性评价,同样也没有统一的评价标准。针对目前益生菌评价存在的问题,亟需建立一套完善的评价方法,对益生菌的安全性和有效性进行系统、科学地评价。作者从益生菌可能产生的潜在危害及功效方面出发,着重论述了益生菌的溶血性、毒力因子、抗生素抗性和产有毒代谢产物的体外安全性评价方法,耐酸、耐胆盐、耐人工胃肠液、胃肠黏膜黏附性和抑菌活性的体外有效性评价方法,及体内的安全性和有效性评价方法的研究进展,期望为建立完善的益生菌评价技术体系和标准提供参考。 展开更多

关键词 益生菌 安全性评价 有效性评价 体内 体外

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热应激条件下添加中草药渣对獭兔生产性能.血液生化及免疫功能的影响 被引量：6

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作者 李艳军 温旭杰 +3 位作者 代发文 高来 叶应建 霍小东 《中国饲料》 北大核心 2018年第5期53-56,共4页

为研究热应激条件下添加中草药渣对獭兔生产性能、血液生化及免疫功能的影响,本试验选用42日龄生长兔80只随机分成4组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为试验组,分别添加1%、2%、3%清瘟败毒中草药渣,Ⅳ组为对照组,饲喂基础日粮。结果表明:与对照组相比,中... 为研究热应激条件下添加中草药渣对獭兔生产性能、血液生化及免疫功能的影响,本试验选用42日龄生长兔80只随机分成4组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为试验组,分别添加1%、2%、3%清瘟败毒中草药渣,Ⅳ组为对照组,饲喂基础日粮。结果表明:与对照组相比,中药渣组獭兔的日增重和饲料报酬提高,饲养成本降低,生长兔的血液生化和免疫指标均有不同程度的改善,其中血清中免疫球蛋白G(lg G)和三碘甲状腺原氨酸(T_3)水平显著升高(P<0.05),肌酸激酶(CK)和皮质醇(cortisol)含量显著降低(P<0.05)。由此说明,清瘟败毒中草药渣能提高獭兔生产性能和免疫力,提高饲料转化率,降低热应激的作用。 展开更多

关键词 中草药渣 獭兔 生产性能 热应激

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乳仔猪铁营养调控研究进展 被引量：1

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作者 代发文 刘辉 +2 位作者 黄霞 马静 易祖建 《中国饲料》 北大核心 2022年第23期11-17,共7页

乳仔猪阶段相比其他阶段更易发生肠道疾病,可能与机体铁营养状况有关。铁营养可能通过调控食糜菌群、屏障功能、绒毛发育和黏膜免疫进而影响肠道健康。由于新生仔猪机体铁储备不足、母乳铁含量较低、前期生长速度较快、一次性注射铁剂... 乳仔猪阶段相比其他阶段更易发生肠道疾病,可能与机体铁营养状况有关。铁营养可能通过调控食糜菌群、屏障功能、绒毛发育和黏膜免疫进而影响肠道健康。由于新生仔猪机体铁储备不足、母乳铁含量较低、前期生长速度较快、一次性注射铁剂量较高等,在乳仔猪养殖中易出现阶段性缺铁或铁过量问题。因此,有必要重新审视乳仔猪铁营养调控对健康养殖的重要意义。本文根据有关乳仔猪铁营养研究报道并结合笔者应用试验,对“母仔一体化”补铁方案、新型铁源添加剂开发、铁吸收转运机制、补铁对肠道健康的影响四个方面进行综述,旨在为优化乳仔猪补铁方案提供参考。 展开更多

关键词 母仔一体化 有机铁 铁蛋白 吸收转运 肠道健康 乳仔猪

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不同纤维原料对断奶仔猪生长性能和血清生化指标的影响

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作者 代发文 仁真央金 +3 位作者 刘辉 黄霞 石晓琳 杨瑶君 《中国饲料》 北大核心 2023年第1期153-158,共6页

为研究不同纤维原料对断奶仔猪生长性能、血清生化指标和经济效益的影响,试验选取72头体重相近、健康的断奶仔猪随机分为三组,对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组、Ⅱ组分别饲喂基础饲粮+1%YWS(可溶性膳食纤维为主原料)、1%饲用竹粉(... 为研究不同纤维原料对断奶仔猪生长性能、血清生化指标和经济效益的影响,试验选取72头体重相近、健康的断奶仔猪随机分为三组,对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组、Ⅱ组分别饲喂基础饲粮+1%YWS(可溶性膳食纤维为主原料)、1%饲用竹粉(不可溶性膳食纤维为主原料),试验期为14 d。结果发现:试验Ⅰ组和试验Ⅱ组断奶仔猪平均日增重分别比对照组提高21.43%、12.99%,料肉比分别降低16.77%、10.56%,但均未达到显著水平(P>0.05),增重经济效益分别比对照组提高6.21、3.87元/头。试验Ⅰ组和试验Ⅱ组断奶仔猪血清总胆固醇含量分别比对照组提高67.2%(P>0.05)、87.6%(P<0.05);血清尿素氮分别比对照组降低25.24%、17.31%,但未达到显著水平(P>0.05)。上述结果表明,断奶仔猪饲粮中添加1%YWS或饲用竹粉可能通过促进脂类和蛋白质代谢对生长性能和经济效益发挥一定改善作用。 展开更多

关键词 纤维来源 断奶仔猪 生长性能 血清指标 经济效益

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断奶仔猪纤维营养应用研究进展

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作者 代发文 林涛 +3 位作者 苏保元 霍小东 尕尔让拉么 杨瑶君 《中国饲料》 北大核心 2021年第15期58-63,共6页

断奶应激是养猪生产中常见问题之一,全面禁止饲用抗生素使用后,断奶仔猪面临的挑战增加。本文结合国内外研究报道,对断奶仔猪常用纤维原料、应用效果影响因素和调控作用机制等进行综合论述。分析认为,断奶仔猪纤维营养方案应重点关注纤... 断奶应激是养猪生产中常见问题之一,全面禁止饲用抗生素使用后,断奶仔猪面临的挑战增加。本文结合国内外研究报道,对断奶仔猪常用纤维原料、应用效果影响因素和调控作用机制等进行综合论述。分析认为,断奶仔猪纤维营养方案应重点关注纤维原料对后肠道发酵和消化道发育的调控,纤维特性尤其是纤维可发酵性和发酵调控性是重要影响因素,通过纤维改性有望改善纤维组成和纤维特性,进而提升应用效果。 展开更多

关键词 纤维原料 纤维组成 纤维特性 纤维改性 断奶仔猪

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