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NPTⅡ蛋白质在转基因水稻中的表达特征研究被引量：5: 1; 作者兰金苹武鹏程 +11 位作者郭美岑史佳楠韦汉福荣瑞娟郝育杰杨烁白影影李莉云吴琳刘斯奇尹长城刘国振《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第3期268-276,共9页; nptⅡ编码新霉素磷酸转移酶,是转基因实验中最常用的筛选标记基因之一.本研究中,表达了重组新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)蛋白质,制备了单克隆抗体,建立了用免疫印迹检测转基因水稻中NPTⅡ蛋白质的方法,调查了NPTⅡ蛋白质的表达特征,包括遗... 展开更多; 关键词转基因水稻 CaMV-35S启动子 NPTⅡ蛋白质免疫印迹技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的检测及其表达特征研究被引量：7: 2; 作者柴帅杰武鹏程 +9 位作者荣瑞娟郝育杰史佳楠郭亚璐丁国涛韩宇宁赵志静魏健尹长城刘国振《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期44-50,共7页; 为了建立转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的免疫学检测方法,并了解其在水稻生长过程中的表达特征,本研究在大肠杆菌中表达了CP4-EPSPS蛋白质,纯化后以其为免疫原免疫小鼠,经筛选获得了可识别CP4-EPSPS的单克隆抗体。建立了用免疫印记技术... 展开更多; 关键词水稻转基因 CP4-EPSPS 除草剂免疫印迹; 在线阅读下载PDF 职称材料

多维离子交换色谱分离和串联质谱鉴定在小鼠肝脏膜蛋白质组分析中的应用被引量：2: 3; 作者王灼维彭福利 +4 位作者王媛童维任艳徐宁志刘斯奇《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期115-122,共8页; 膜蛋白质在变性剂作用下能够较充分地溶解。根据这一特点,我们试图在变性剂溶液中采用串联离子交换色谱法分离小鼠肝脏膜蛋白质。将小鼠肝脏膜蛋白质溶解于含有4mol/L尿素,20mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液(pH9.0)中,用Q-Seph... 展开更多; 关键词多维离子交换色谱十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳反相高效液相色谱串联质谱膜蛋白质小鼠肝脏; 在线阅读下载PDF 职称材料

转基因大米中氨基酸含量超高效液相色谱定量被引量：10: 4; 作者傅博强唐治玉 +1 位作者王晶尹长城《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期110-115,共6页; 建立了一种6-氨基喹啉基--羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AQC）柱前衍生，超高效液相色谱（UPLC）对大米中17种氨基酸进行快速定量的方法。优化了6M盐酸和0．2％苯酚的加入量、水解时间等大米水解条件，采用1．7txm粒径的AccQ·TagULTRA... 展开更多; 关键词转基因大米氨基酸超高效液相色谱定量; 在线阅读下载PDF 职称材料

药用昆虫金环胡蜂及其混伪品DNA条形码鉴别研究被引量：7: 5; 作者许凯歌陈壮志 +4 位作者杨自忠郭云胶李成功赵昱张成桂《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第2期313-318,共6页; 目的:以COI序列作为DNA条形码对药用昆虫金环胡蜂及其混伪品进行物种鉴别,探讨快速、准确鉴别金环胡蜂及其混伪品的方法。方法:以COI条形码序列为基础,对金环胡蜂及其近缘种混伪品黄纹大胡蜂进行总DNA提取、PCR扩增和双向测序,并比对Gen... 展开更多; 关键词金环胡蜂 DNA条形码 COI序列物种鉴别; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名NPTⅡ蛋白质在转基因水稻中的表达特征研究被引量：5: 1; 作者兰金苹武鹏程郭美岑史佳楠韦汉福荣瑞娟郝育杰杨烁白影影李莉云吴琳刘斯奇尹长城刘国振; 机构河北农业大学生命科学学院北京华大蛋白质研发中心有限公司中国科学院北京基因组研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第3期268-276,共9页; 基金国家科技部转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08012-006B) 北京市自然科学基金重点项目(5121001)资助~~; 文摘 nptⅡ编码新霉素磷酸转移酶,是转基因实验中最常用的筛选标记基因之一.本研究中,表达了重组新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)蛋白质,制备了单克隆抗体,建立了用免疫印迹检测转基因水稻中NPTⅡ蛋白质的方法,调查了NPTⅡ蛋白质的表达特征,包括遗传特征、表达时空特征、表达丰度和亚细胞定位等.结果表明,该方法可检测到单粒稻米的0.25%(约0.025 mg)样品中的NPTⅡ蛋白质,NPTⅡ的表达符合显性遗传规律,根据NPTⅡ的表达可对转基因T1代种子进行阴阳性及纯合株系的鉴定,对T1幼苗中NPTⅡ丰度的分析可为纯合单株的鉴定提供参考信息.定量分析表明苗期叶片中NPTⅡ蛋白质的含量约为鲜重的0.08‰.在Ca MV-35S启动子驱动下NPTⅡ蛋白质在水稻苗期、成株期的叶片和根部组织中表达量较高,而在分蘖期、孕穗期较低,NPTⅡ在不同时期的根、茎、叶、穗子、花及种子等组织中均有表达,只是在分蘖节、茎节、穗轴和花药等组织中表达量相对较低.此外,NPTⅡ蛋白质的表达主要定位在细胞质中.综上所述,本研究建立了具有应用价值的检测NPTⅡ蛋白质的免疫印记方法并系统揭示了其在水稻中的表达特征.; 关键词转基因水稻 CaMV-35S启动子 NPTⅡ蛋白质免疫印迹技术; Keywords transgenic rice CaMV-35S promoter NPTⅡ protein Western blot; 分类号 Q7 [生物学—分子生物学] Q81 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的检测及其表达特征研究被引量：7: 2; 作者柴帅杰武鹏程荣瑞娟郝育杰史佳楠郭亚璐丁国涛韩宇宁赵志静魏健尹长城刘国振; 机构河北农业大学生命科学学院北京华大蛋白质研发中心有限公司; 出处《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期44-50,共7页; 基金高等学校博士学科点专项科研基金(20131302110006); 文摘为了建立转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的免疫学检测方法,并了解其在水稻生长过程中的表达特征,本研究在大肠杆菌中表达了CP4-EPSPS蛋白质,纯化后以其为免疫原免疫小鼠,经筛选获得了可识别CP4-EPSPS的单克隆抗体。建立了用免疫印记技术检测转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的方法,该方法可以从单粒稻米的0.63%材料中检测到CP4-EPSPS信号。对水稻不同发育时期代表性组织的检测结果表明,CP4-EPSPS蛋白质呈组成型表达,在花药、穗轴、颖壳及不同时期的叶片中的表达量较高,但在分蘖期基部茎节、叶鞘及成熟期种子胚中的表达量稍低。本研究建立的免疫学方法在转基因水稻检测中具有潜在的应用价值。; 关键词水稻转基因 CP4-EPSPS 除草剂免疫印迹; Keywords rice genetically modified organism（GMO） CP4-EPSPS herbicide Western blot; 分类号 S511 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多维离子交换色谱分离和串联质谱鉴定在小鼠肝脏膜蛋白质组分析中的应用被引量：2: 3; 作者王灼维彭福利王媛童维任艳徐宁志刘斯奇; 机构中国科学院北京基因组研究所北京华大蛋白质研发中心有限公司; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期115-122,共8页; 基金国家高技术研究与发展计划("863"计划)项目(No.2006AA02A308) 国家自然科学基金项目(No.30700378); 文摘膜蛋白质在变性剂作用下能够较充分地溶解。根据这一特点,我们试图在变性剂溶液中采用串联离子交换色谱法分离小鼠肝脏膜蛋白质。将小鼠肝脏膜蛋白质溶解于含有4mol/L尿素,20mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液(pH9.0)中,用Q-SepharoseFF和SephacrylS-200HR树脂组成的色谱柱结合大部分溶解的膜蛋白质,然后采用氯化钠线性梯度洗脱蛋白质,分步收集后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进一步分离洗脱组分的蛋白质。利用胶内胰蛋白酶消化技术将SDS-PAGE胶内分离的蛋白质降解为相应的肽段,然后以反相高效液相色谱分离和离子阱质谱仪鉴定肽段。根据文献报道和蛋白质的功能分类,在所鉴定的392个蛋白质中有306个可能为膜蛋白质或膜结合蛋白质。蛋白质的疏水性计算表明,GRAVY(grandaverageofhydropathicity)得分大于或等于0.00的蛋白质有83个。综上所述,我们有理由认为本实验方法基本符合小鼠肝脏膜蛋白质组学研究的要求。; 关键词多维离子交换色谱十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳反相高效液相色谱串联质谱膜蛋白质小鼠肝脏; Keywords multidimensional ion-exchange chromatography sodium-dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis（SDS-PAGE） reversed-phase high performance liquid chromatography（RP-HPLC） tandem mass spectrometry（MS/MS） membrane protein mouse liver; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转基因大米中氨基酸含量超高效液相色谱定量被引量：10: 4; 作者傅博强唐治玉王晶尹长城; 机构中国计量科学研究院医学与生物计量研究所北京华大蛋白质研发中心有限公司; 出处《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期110-115,共6页; 基金国家重大科技专项(2009ZX08012006); 文摘建立了一种6-氨基喹啉基--羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AQC）柱前衍生，超高效液相色谱（UPLC）对大米中17种氨基酸进行快速定量的方法。优化了6M盐酸和0．2％苯酚的加入量、水解时间等大米水解条件，采用1．7txm粒径的AccQ·TagULTRAC18色谱柱分离，260nnl检测，可在9．5rain内实现17种氨基酸衍生物的分离。结果表明，17种氨基酸的标准工作曲线的线性回归相关系数（r）均大于0．999，加标回收率在85．9％～102％之间，日内相对标准偏差（RSD）（n=5）2．64％-4．59％，日间相对标准偏差（n=3）1．43％-5．06％，方法简单、准确、快速、重复性和再现性良好。将该方法用于大米中氨基酸含量的分析，比较了4对转基因大米及其非转亲本之间氨基酸含量的差异，检验结果表明，所取样分析的转基因大米及其亲本之间在氨基酸含量上没有显著性差异。; 关键词转基因大米氨基酸超高效液相色谱定量; Keywords genetically modified rice, amino acids, ultra performance liquid chromatography, quantification; 分类号 O656.3 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名药用昆虫金环胡蜂及其混伪品DNA条形码鉴别研究被引量：7: 5; 作者许凯歌陈壮志杨自忠郭云胶李成功赵昱张成桂; 机构大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理大学药学与化学学院北京华大蛋白质研发中心有限公司大理大学中国西南药用昆虫及蛛形类资源开发利用德宏师专食用昆虫研究所; 出处《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第2期313-318,共6页; 基金国家自然科学基金委地区基金(81360679):金黄虎头蜂蜂毒抑制类风湿性关节炎炎症和血管生成的作用机制及物质基础研究负责人:张成桂 +4 种基金负责人:赵昱云南省教育厅负责人:赵昱; 文摘目的:以COI序列作为DNA条形码对药用昆虫金环胡蜂及其混伪品进行物种鉴别,探讨快速、准确鉴别金环胡蜂及其混伪品的方法。方法:以COI条形码序列为基础,对金环胡蜂及其近缘种混伪品黄纹大胡蜂进行总DNA提取、PCR扩增和双向测序,并比对Gen Bank中金环胡蜂及其混伪品的COI序列,继而用MEGA6.06软件对所有序列进行分析、计算种内及种间遗传距离,并用邻接(Neighbor-Joining,NJ)法构建出系统进化树。结果:金环胡蜂及黄纹大胡蜂COI序列扩增成功。金环胡蜂与其混伪品COI序列种间最小遗传距离为0.152±0.017,远大于金环胡蜂种内的最大遗传距离0.009±0.004。构建出的系统进化树图也明确显示,各物种都形成了独立的分支。结论:基于COI序列的DNA条形码技术可有效鉴别药用昆虫金环胡蜂及其混伪品,为其质量控制和市场监管提供了新的技术手段,保证金环胡蜂相关药材的安全性。; 关键词金环胡蜂 DNA条形码 COI序列物种鉴别; Keywords Vespa mandarinia DNA barcoding COI sequence species identification; 分类号 R931.5 [医药卫生—生药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	NPTⅡ蛋白质在转基因水稻中的表达特征研究	兰金苹武鹏程郭美岑史佳楠韦汉福荣瑞娟郝育杰杨烁白影影李莉云吴琳刘斯奇尹长城刘国振	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2015	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的检测及其表达特征研究	柴帅杰武鹏程荣瑞娟郝育杰史佳楠郭亚璐丁国涛韩宇宁赵志静魏健尹长城刘国振	《核农学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	多维离子交换色谱分离和串联质谱鉴定在小鼠肝脏膜蛋白质组分析中的应用	王灼维彭福利王媛童维任艳徐宁志刘斯奇	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	转基因大米中氨基酸含量超高效液相色谱定量	傅博强唐治玉王晶尹长城	《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心	2014	10	在线阅读下载PDF 职称材料
5	药用昆虫金环胡蜂及其混伪品DNA条形码鉴别研究	许凯歌陈壮志杨自忠郭云胶李成功赵昱张成桂	《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD	2017	7	在线阅读下载PDF 职称材料