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GDNF重组腺病毒的构建及促进多巴胺能神经元存活的研究
被引量：
6
1
作者
徐国恒
凌雁
+2 位作者
万有
王晓民
韩济生
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第1期42-47,共6页
利用体内同源重组原理，构建了能介导ＧＤＮＦ基因转移和表达的复制缺陷型重组腺病毒ＡｄＣＭＶｇｄｎｆ，其中ＧＤＮＦｃＤＮＡ插入腺病毒基因组的Ｅ１区并由ＣＭＶ启动子控制在人２９３细胞内通过同源重组包装生成重组腺病毒后，用形...
利用体内同源重组原理，构建了能介导ＧＤＮＦ基因转移和表达的复制缺陷型重组腺病毒ＡｄＣＭＶｇｄｎｆ，其中ＧＤＮＦｃＤＮＡ插入腺病毒基因组的Ｅ１区并由ＣＭＶ启动子控制在人２９３细胞内通过同源重组包装生成重组腺病毒后，用形态学方法、病毒ＤＮＡ酶切分析、ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ等方法进行鉴定正确．经测定病毒滴度达到１０１０ｐｆｕ／ｍｌ．用免疫沉淀方法从重组腺病毒感染的２９３细胞及其培养基上清中均检测到大量ＧＤＮＦ蛋白．用重组腺病毒直接感染或者用其条件培养基处理，分别使胚胎大鼠中脑原代多巴胺能神经元的数目增加８８．２％和９６．４％，明显增加多巴胺能神经元存活。
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关键词
GDNF
重组腺病毒
基因治疗
帕金森氏病
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职称材料
GDNF重组腺病毒增加MN9D细胞多巴胺合成与释放
被引量：
3
2
作者
凌雁
徐国恒
+2 位作者
万有
王晓民
韩济生
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第1期128-131,共4页
有表达ＧＤＮＦ的重组腺病毒直接感染中脑多巴胺能神经元来源的ＭＮ９Ｄ细胞并经神经毒素ＭＰＰ＋处理．感染３６ｈ分别收获细胞及其培养基，用反相高效液相色谱方法测定多巴胺含量．结果显示，经ＧＤＮＦ重组腺病毒感染的ＭＮ９Ｄ细胞...
有表达ＧＤＮＦ的重组腺病毒直接感染中脑多巴胺能神经元来源的ＭＮ９Ｄ细胞并经神经毒素ＭＰＰ＋处理．感染３６ｈ分别收获细胞及其培养基，用反相高效液相色谱方法测定多巴胺含量．结果显示，经ＧＤＮＦ重组腺病毒感染的ＭＮ９Ｄ细胞内及其培养基中的多巴胺水平分别增加５０．７％和５３．５％．给予神经毒素ＭＰＰ＋损伤后，细胞内多巴胺含量降低５３．５％，但同时给予ＧＤＮＦ腺病毒则可抑制这种降低，并使多巴胺水平增加１４１．３％．以上结果提示ＧＤＮＦ腺病毒可提高细胞内的多巴胺水平并促进其释放，同时还具有对抗神经毒素ＭＰＰ＋损伤作用，表明ＧＤＮＦ重组腺病毒用于帕金森氏病基因治疗具有良好的前景．
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关键词
GONF
重组腺病毒
多巴胺
帕金森氏病
基因治疗
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职称材料
题名
GDNF重组腺病毒的构建及促进多巴胺能神经元存活的研究
被引量：
6
1
作者
徐国恒
凌雁
万有
王晓民
韩济生
机构
北京医科大学神经科学研究所卫生部神经科学重点实验室
河南
医科大
学病理学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第1期42-47,共6页
基金
国家自然科学基金
国家教委跨世纪优秀人才基金
+1 种基金
"九.五"科技攻关项目
中国博士后基金
文摘
利用体内同源重组原理，构建了能介导ＧＤＮＦ基因转移和表达的复制缺陷型重组腺病毒ＡｄＣＭＶｇｄｎｆ，其中ＧＤＮＦｃＤＮＡ插入腺病毒基因组的Ｅ１区并由ＣＭＶ启动子控制在人２９３细胞内通过同源重组包装生成重组腺病毒后，用形态学方法、病毒ＤＮＡ酶切分析、ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ等方法进行鉴定正确．经测定病毒滴度达到１０１０ｐｆｕ／ｍｌ．用免疫沉淀方法从重组腺病毒感染的２９３细胞及其培养基上清中均检测到大量ＧＤＮＦ蛋白．用重组腺病毒直接感染或者用其条件培养基处理，分别使胚胎大鼠中脑原代多巴胺能神经元的数目增加８８．２％和９６．４％，明显增加多巴胺能神经元存活。
关键词
GDNF
重组腺病毒
基因治疗
帕金森氏病
Keywords
Glia cell line derived neurotrophic factor(GDNF)
Adenovirus
Gene Transfer
Gene Therapy
Parkinsons disease
分类号
R742.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
GDNF重组腺病毒增加MN9D细胞多巴胺合成与释放
被引量：
3
2
作者
凌雁
徐国恒
万有
王晓民
韩济生
机构
北京医科大学神经科学研究所卫生部神经科学重点实验室
河南
医科大
学病理学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第1期128-131,共4页
基金
国家自然科学基金
国家教委跨世纪优秀人才基金
+1 种基金
"九.五科技攻关项目
中国博士后基金
文摘
有表达ＧＤＮＦ的重组腺病毒直接感染中脑多巴胺能神经元来源的ＭＮ９Ｄ细胞并经神经毒素ＭＰＰ＋处理．感染３６ｈ分别收获细胞及其培养基，用反相高效液相色谱方法测定多巴胺含量．结果显示，经ＧＤＮＦ重组腺病毒感染的ＭＮ９Ｄ细胞内及其培养基中的多巴胺水平分别增加５０．７％和５３．５％．给予神经毒素ＭＰＰ＋损伤后，细胞内多巴胺含量降低５３．５％，但同时给予ＧＤＮＦ腺病毒则可抑制这种降低，并使多巴胺水平增加１４１．３％．以上结果提示ＧＤＮＦ腺病毒可提高细胞内的多巴胺水平并促进其释放，同时还具有对抗神经毒素ＭＰＰ＋损伤作用，表明ＧＤＮＦ重组腺病毒用于帕金森氏病基因治疗具有良好的前景．
关键词
GONF
重组腺病毒
多巴胺
帕金森氏病
基因治疗
Keywords
Glia cell line derived neurotrophic factor (GDNF),Adenovirus,Dopamine,Gene therapy,Parkinsons disease
分类号
R742.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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1
GDNF重组腺病毒的构建及促进多巴胺能神经元存活的研究
徐国恒
凌雁
万有
王晓民
韩济生
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999
6
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职称材料
2
GDNF重组腺病毒增加MN9D细胞多巴胺合成与释放
凌雁
徐国恒
万有
王晓民
韩济生
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999
3
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