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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅲ.重组质粒fPGV-MT-LacZ在大鼠血管平滑肌细胞中的表达
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作者 朱小君 胡征 +3 位作者 毕万里 唐朝枢 周爱儒 汤健 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1994年第S1期120-123,共4页
为观察外源性基因在心血管细胞内的表达,本工作构建了含有外源性标记基因LacZ的逆转录病毒质粒fPGV-MT-LacZ。应用脂质体(Lipofectin)包裹质粒,转染培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,经G4l8筛选、克隆以... 为观察外源性基因在心血管细胞内的表达,本工作构建了含有外源性标记基因LacZ的逆转录病毒质粒fPGV-MT-LacZ。应用脂质体(Lipofectin)包裹质粒,转染培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,经G4l8筛选、克隆以及β-半乳糖苷酶的酶活测定,证明外源性基因可以在血管平滑肌细胞中表达。揭示血管平滑肌细胞可作为心血管疾病基因治疗的一种靶细胞。 展开更多
关键词 基因治疗 基因表达 标记基因LacZ 血管平滑肌细胞
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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅵ.一种新的体内基因转移方法
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作者 朱小君 姚阿卿 +3 位作者 赵民清 付爱华 周爱儒 汤健 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1994年第S1期131-133,共3页
将医用缝合线浸泡在质粒DNA溶液中,然后缝合在大鼠股四头肌上,可以观察到外源基因在肌肉组织中高效、稳定地表达,其表达量高于磷酸钙共沉淀和DNA沉淀块埋植法,较肌肉直接注射法表达量高10倍左右。
关键词 基因治疗 基因转移 医用缝合线 标记基因LacZ
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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅰ.重组质粒pN2-LacZ在体外的表达
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作者 姚阿卿 杨亚东 +5 位作者 朱小君 李岱宗 孙双丹 温进坤 周爱儒 汤健 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1994年第S1期111-114,共4页
构建了带有标记基因LacZ的逆转录病毒质粒pN2-LacZ。用磷酸钙共沉淀的方法,将pN2-LacZ转染培养的大鼠血管平滑肌细胞,G418筛选得到抗性集落。Southern和Northernblot分析表明,LacZ... 构建了带有标记基因LacZ的逆转录病毒质粒pN2-LacZ。用磷酸钙共沉淀的方法,将pN2-LacZ转染培养的大鼠血管平滑肌细胞,G418筛选得到抗性集落。Southern和Northernblot分析表明,LacZ基因已整合到细胞染色体上并转录出相应的mRNA。组化染色和酶活力测定结果表明,外源基因LacZ可在血管平滑肌细胞中表达出有活性的蛋白质产物。提示,血管平滑肌细胞可作为心血管疾病基因治疗的靶细胞。 展开更多
关键词 标记基因LacZ 血管平滑肌细胞 基因治疗
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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅱ.Pro-UK和t-pA基因的体外表达
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作者 姚阿卿 孙双丹 +6 位作者 李岱宗 温进坤 王贵春 周爱儒 黄培堂 俞炜源 汤健 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1994年第S1期115-119,共5页
构建了带有人的全长Pro-UK或t-pA基因cDNA的逆转录病毒质粒pN2-CMV-UK或pN2-CMV-tPA。重组质粒转染包装细胞PA3l7后获得含假病毒的培养上清。用假病毒上清感染培养的血管平滑肌细胞(VsMC... 构建了带有人的全长Pro-UK或t-pA基因cDNA的逆转录病毒质粒pN2-CMV-UK或pN2-CMV-tPA。重组质粒转染包装细胞PA3l7后获得含假病毒的培养上清。用假病毒上清感染培养的血管平滑肌细胞(VsMC),经G4l8筛选得到抗性集落。Southernblot分析表明,Pro-UK或t-pA基因已整合到宿主细胞染色体。在转染的VSMC中,Pro-UK和t-pA的含量分别为265ng/107细胞/24小时和5.6ng/107细胞/24小时。溶圈法测定结果证明,Pro-UK基因导入细胞后可以表达出有生物活性的尿激酶原。 展开更多
关键词 Pro-UK或t-pA基因 基因治疗 血管平滑肌细胞
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