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胚胎干细胞体外分化为心肌细胞诱导因素的探讨
被引量:
17
1
作者
刘兰英
杨琨
+6 位作者
朱振宇
刘玉川
余细勇
银巍
汤建
马涧泉
顾军
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第5期389-392,共4页
目的:用胚胎干细胞(ESC)体外诱导分化为心肌细胞,从分子水平上研究早期心脏发育相关基 因及其功能。方法:(1)胚胎干细胞的培养。(2)胚胎于细胞的分化培养。(3)被分化的心肌细胞鉴定:RNA的 提取;心脏特异性引物的...
目的:用胚胎干细胞(ESC)体外诱导分化为心肌细胞,从分子水平上研究早期心脏发育相关基 因及其功能。方法:(1)胚胎干细胞的培养。(2)胚胎于细胞的分化培养。(3)被分化的心肌细胞鉴定:RNA的 提取;心脏特异性引物的合成和RT-PCR反应;探针标记、纯化和比放射活性测定;RNA斑点杂交。结果:用最 适条件培养液对FSC定向诱导分化,可使80%以上的ESC分化为心肌细胞。心肌细胞以同步的方式进行收缩。 反转录PCR和斑点杂交的结果显示:心肌在早期发育就开始表达其特异性基因。结论:胚胎干细胞体外能诱导 分化为心肌细胞。胎牛血清、二甲基亚砜和维甲酸的浓度及它们之间的组成不同,对ES细胞定向诱导为心肌 细胞均有影响。最佳诱导条件是用2nmol/L维甲酸、0.6%二甲基亚砜和20%胎牛血清组成的条件培养液。
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关键词
胚胎
干细胞
基因表达
心肌细胞
ESC
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职称材料
人类心脏发育相关基因的初步筛选
2
作者
刘兰英
顾军
+1 位作者
汤建
马涧泉
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第9期784-788,共5页
目的:从人胎儿心脏cDNA文库和成人心脏cDNA文库,通过差减杂交,筛选心脏发育相关基因。方法:(1)用23周和27周的人胎心脏组织构建2个cDNA文库,分别命名为ibF和LibS,用成人心脏构建了1个cDNA文库,...
目的:从人胎儿心脏cDNA文库和成人心脏cDNA文库,通过差减杂交,筛选心脏发育相关基因。方法:(1)用23周和27周的人胎心脏组织构建2个cDNA文库,分别命名为ibF和LibS,用成人心脏构建了1个cDNA文库,命名为LibA。(2)探针的合成、纯化和比放射活性测定。(3)差减杂效和牧民性探针的富集。(4)菌落原位和。(5)差减阳性克隆的斑点杂交。
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关键词
RNA
信使
先天性心脏病
原位杂交
CDNA文库
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职称材料
题名
胚胎干细胞体外分化为心肌细胞诱导因素的探讨
被引量:
17
1
作者
刘兰英
杨琨
朱振宇
刘玉川
余细勇
银巍
汤建
马涧泉
顾军
机构
中山
医科大
学分子医学
研究
中心
广东省人民医院
心血管
研究所
北京医科大学基础心血管研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第5期389-392,共4页
基金
国家攀登计划基金资助
文摘
目的:用胚胎干细胞(ESC)体外诱导分化为心肌细胞,从分子水平上研究早期心脏发育相关基 因及其功能。方法:(1)胚胎干细胞的培养。(2)胚胎于细胞的分化培养。(3)被分化的心肌细胞鉴定:RNA的 提取;心脏特异性引物的合成和RT-PCR反应;探针标记、纯化和比放射活性测定;RNA斑点杂交。结果:用最 适条件培养液对FSC定向诱导分化,可使80%以上的ESC分化为心肌细胞。心肌细胞以同步的方式进行收缩。 反转录PCR和斑点杂交的结果显示:心肌在早期发育就开始表达其特异性基因。结论:胚胎干细胞体外能诱导 分化为心肌细胞。胎牛血清、二甲基亚砜和维甲酸的浓度及它们之间的组成不同,对ES细胞定向诱导为心肌 细胞均有影响。最佳诱导条件是用2nmol/L维甲酸、0.6%二甲基亚砜和20%胎牛血清组成的条件培养液。
关键词
胚胎
干细胞
基因表达
心肌细胞
ESC
Keywords
Embryonic
Stem cell
Myocaldium
Cene expression
分类号
R542.202 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
人类心脏发育相关基因的初步筛选
2
作者
刘兰英
顾军
汤建
马涧泉
机构
中山
医科大
学分子医学
研究
中心
北京医科大学基础心血管研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第9期784-788,共5页
基金
国家攀登计划和博士点资助
文摘
目的:从人胎儿心脏cDNA文库和成人心脏cDNA文库,通过差减杂交,筛选心脏发育相关基因。方法:(1)用23周和27周的人胎心脏组织构建2个cDNA文库,分别命名为ibF和LibS,用成人心脏构建了1个cDNA文库,命名为LibA。(2)探针的合成、纯化和比放射活性测定。(3)差减杂效和牧民性探针的富集。(4)菌落原位和。(5)差减阳性克隆的斑点杂交。
关键词
RNA
信使
先天性心脏病
原位杂交
CDNA文库
Keywords
mRNA, messenger
Deoxyribonucleosides
Hybridization
Heart
分类号
R541.102 [医药卫生—心血管疾病]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胚胎干细胞体外分化为心肌细胞诱导因素的探讨
刘兰英
杨琨
朱振宇
刘玉川
余细勇
银巍
汤建
马涧泉
顾军
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000
17
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职称材料
2
人类心脏发育相关基因的初步筛选
刘兰英
顾军
汤建
马涧泉
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999
0
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