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促红细胞生成素基因表达载体的构建及其在CHO细胞中表达的研究
被引量：
2
1
作者
崔振中
沈恒
+2 位作者
刘维全
刘朋朋
齐顺章
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第6期691-696,共6页
用从基因文库中所克隆的促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因组基因，构建了３种由不同启动子调控的表达载体——ｐＯＰ１３／ＥＰＯ，ｐＲＳＶ／ＥＰＯ，ｐＣＭＶ／ＥＰＯ，在这３个表达载体的构建过程中对基因的转录起始效率、内含子的剪接...
用从基因文库中所克隆的促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因组基因，构建了３种由不同启动子调控的表达载体——ｐＯＰ１３／ＥＰＯ，ｐＲＳＶ／ＥＰＯ，ｐＣＭＶ／ＥＰＯ，在这３个表达载体的构建过程中对基因的转录起始效率、内含子的剪接、５′非翻译区和３′非翻译区对基因表达的影响等因素都加以考虑．用脂质体转染法分别将上述３个载体导入ＣＨＯ细胞，经瞬时表达，用ＥＬＩＳＡ方法检测，表达量分别为１９０ｍＩＵ／ｍｌ、１６０ｍＩＵ／ｍｌ、４４７ｍＩＵ／ｍｌ．用表达载体ｐＯＰ１３／ＥＰＯ转染ＣＨＯ－Ｋ１２细胞，在４００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８浓度下筛选稳定表达细胞克隆，获得了表达量约为１６０ＩＵ／１０６细胞（４８ｈ）的Ｃ１０细胞株．表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测发现了ＥＰＯ阳性条带．用ＴＦ－１细胞对ＥＰＯ进行了生物活性检测，初步证实所表达的ＥＰＯ有生物活性．
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关键词
促红细胞生成素
CHO细胞
瞬时表达
稳定表达
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题名
促红细胞生成素基因表达载体的构建及其在CHO细胞中表达的研究
被引量：
2
1
作者
崔振中
沈恒
刘维全
刘朋朋
齐顺章
机构
中
国农业
大学
生物
学院
动物生化室
北京医科大学基础医学院神经科学中心
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第6期691-696,共6页
基金
国家自然科学基金
文摘
用从基因文库中所克隆的促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因组基因，构建了３种由不同启动子调控的表达载体——ｐＯＰ１３／ＥＰＯ，ｐＲＳＶ／ＥＰＯ，ｐＣＭＶ／ＥＰＯ，在这３个表达载体的构建过程中对基因的转录起始效率、内含子的剪接、５′非翻译区和３′非翻译区对基因表达的影响等因素都加以考虑．用脂质体转染法分别将上述３个载体导入ＣＨＯ细胞，经瞬时表达，用ＥＬＩＳＡ方法检测，表达量分别为１９０ｍＩＵ／ｍｌ、１６０ｍＩＵ／ｍｌ、４４７ｍＩＵ／ｍｌ．用表达载体ｐＯＰ１３／ＥＰＯ转染ＣＨＯ－Ｋ１２细胞，在４００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８浓度下筛选稳定表达细胞克隆，获得了表达量约为１６０ＩＵ／１０６细胞（４８ｈ）的Ｃ１０细胞株．表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测发现了ＥＰＯ阳性条带．用ＴＦ－１细胞对ＥＰＯ进行了生物活性检测，初步证实所表达的ＥＰＯ有生物活性．
关键词
促红细胞生成素
CHO细胞
瞬时表达
稳定表达
Keywords
Erythropoietin
CHO cell
Transient expression
Stable expression
分类号
Q753 [生物学—分子生物学]
Q57 [生物学—生物化学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
促红细胞生成素基因表达载体的构建及其在CHO细胞中表达的研究
崔振中
沈恒
刘维全
刘朋朋
齐顺章
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998
2
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