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大鼠肝脏细胞核白蛋白基因转录活性测定 被引量:1
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作者 李丽英 陈孟华 +1 位作者 王海燕 童坦君 《北京医科大学学报》 CSCD 1996年第3期202-204,共3页
目的:探讨在有限实验条件下,应用游离细胞核基因转录活性测定方法的可能性。方法:采用三因素、二水平正交设计表。结果:对大鼠肝脏白蛋白基因转录活性的最适测定条件为:cDNA上样量2μg;细胞核与底物孵育最适温度30℃;[... 目的:探讨在有限实验条件下,应用游离细胞核基因转录活性测定方法的可能性。方法:采用三因素、二水平正交设计表。结果:对大鼠肝脏白蛋白基因转录活性的最适测定条件为:cDNA上样量2μg;细胞核与底物孵育最适温度30℃;[α-32P]-UTP的使用量1480kBq。结论:应用此实验条件可使放射性核素及cDNA探针用量减少,降低核基因转录活性实验成本,提高其应用可行性。 展开更多
关键词 转录 遗传 核蛋白 肝脏
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含重组人血小板生成素基因的小鼠成纤维细胞的克隆筛选与鉴定 被引量:3
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作者 韩安平 陆爱丽 +2 位作者 王申五 侯纬敏 王德炳 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第2期110-112,123,共4页
获取稳定表达重组人血小板生成素的NIH3T3成纤维细胞克隆,为开展成纤维细胞介导的TPO基因治疗研究提供细胞学基础。方法:以重组人TPOcDNA为目的基因,构建真核细胞表达重组体pcDNA3/TPO,脂质体将其转染于... 获取稳定表达重组人血小板生成素的NIH3T3成纤维细胞克隆,为开展成纤维细胞介导的TPO基因治疗研究提供细胞学基础。方法:以重组人TPOcDNA为目的基因,构建真核细胞表达重组体pcDNA3/TPO,脂质体将其转染于NIH3T3细胞,经G418筛选,获得稳定表达重组人TPO的细胞克隆,应用PCR,RT-PCR及Western印迹等技术鉴定目的基因的导入及表达。 展开更多
关键词 血小板生成素 成纤维细胞 基因表达 克隆 筛选
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