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人 TNF-α 分泌型、膜型和膜稳定型重组体的构建、表达及杀瘤效应研究
被引量：
4
1
作者
黄家强
卜夏
+3 位作者
史须
严宜明
李卓娅
龚非力
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
1998年第12期15-20,共6页
通过用ＩＬ－２信号肽编码序列置换ＴＮＦ前导肽编码序列，构建出一种在真核细胞中仅产生分泌型ＴＮＦ的重组体；通过缺失二型ＴＮＦ转换的酶解部位而构建出跨膜表达的膜稳定型ＴＮＦ重组体，并建立分别只表达分泌型或膜型及可同时表达...
通过用ＩＬ－２信号肽编码序列置换ＴＮＦ前导肽编码序列，构建出一种在真核细胞中仅产生分泌型ＴＮＦ的重组体；通过缺失二型ＴＮＦ转换的酶解部位而构建出跨膜表达的膜稳定型ＴＮＦ重组体，并建立分别只表达分泌型或膜型及可同时表达两型ＴＮＦ的真核细胞株，比较二型ＴＮＦ的杀瘤效应。结果显示，膜型ＴＮＦ主要经效－靶细胞间直接接触发挥胞毒效应，杀瘤谱比分泌型ＴＮＦ广；ＴＮＦ的分泌型和膜型具有协同效应。通过基因直接注射方式，使膜型及膜稳定型ＴＮＦ重组体稳定表达小于鼠体内，为膜型ＴＮＦ转基因应用奠定了基础。
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关键词
分泌型
TNF-Α
膜型
基因突变
杀瘤效应
转基因
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职称材料
膜稳定型TNF突变体的构建、表达及活性研究
被引量：
2
2
作者
黄家强
卜夏
+1 位作者
李卓娅
龚非力
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第4期178-180,197,共4页
目的 :TNF α可以分泌型 (S TNF)及其前体膜型 (M TNF)两种活性形式同时存在于体内。为膜型TNF的转基因应用 ,构建一种可表达于胞膜而不被酶解的膜稳定型TNF重组体 (mTNFm)。方法 :在克隆M TNFcDNA的基础上 ,删除两型TNF转换酶酶解部位...
目的 :TNF α可以分泌型 (S TNF)及其前体膜型 (M TNF)两种活性形式同时存在于体内。为膜型TNF的转基因应用 ,构建一种可表达于胞膜而不被酶解的膜稳定型TNF重组体 (mTNFm)。方法 :在克隆M TNFcDNA的基础上 ,删除两型TNF转换酶酶解部位的编码序列 ,构建出mTNFm并测序验证 ;建立只表达膜型TNF的真核细胞株。结果 :Westernblot分析及活性测定结果表明 ,mTNFm不再发生酶切转换且只通过效 靶细胞间直接接触发挥胞毒效应。通过基因直接注射方式 ,使mTNFm稳定表达于小鼠体内。结论
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关键词
膜型TNF-α
基因突变
真核表达
基因治疗
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职称材料
人重组GM－CSF／HAS－D3嵌合蛋白（GM－HSA）在大肠杆菌中的表达及其产物稳定性的研究
被引量：
3
3
作者
朱振齐
刘进
+2 位作者
马大龙
张颖妹
吴跃红
《生物化学杂志》
CSCD
1996年第3期284-288,共5页
将人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和人血清白蛋白第三功能区（ＨＳＡ－Ｄ３）的基因串联后，在Ｅ．ｃｏｌｉ中获高效表达，表达量占菌体蛋白的３２．６％。利用ＴＦ－１体外细胞活性测定表明，ＧＭ－ＨＳＡ的活性单位...
将人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和人血清白蛋白第三功能区（ＨＳＡ－Ｄ３）的基因串联后，在Ｅ．ｃｏｌｉ中获高效表达，表达量占菌体蛋白的３２．６％。利用ＴＦ－１体外细胞活性测定表明，ＧＭ－ＨＳＡ的活性单位为１．０４×１０＾６Ｕ／ｍｇ，虽然其比活性低于ＧＭ－ＣＳＦ，但比后者具有更高的体外热稳定性和储藏稳定性。
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关键词
嵌合蛋白
粒细胞
巨噬细胞
集落刺激因子
稳定性
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职称材料
题名
人 TNF-α 分泌型、膜型和膜稳定型重组体的构建、表达及杀瘤效应研究
被引量：
4
1
作者
黄家强
卜夏
史须
严宜明
李卓娅
龚非力
机构
同济
医科大
学
免疫
学教研室
北京医科大学免疫系分子免疫室
出处
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
1998年第12期15-20,共6页
基金
国家自然科学基金
文摘
通过用ＩＬ－２信号肽编码序列置换ＴＮＦ前导肽编码序列，构建出一种在真核细胞中仅产生分泌型ＴＮＦ的重组体；通过缺失二型ＴＮＦ转换的酶解部位而构建出跨膜表达的膜稳定型ＴＮＦ重组体，并建立分别只表达分泌型或膜型及可同时表达两型ＴＮＦ的真核细胞株，比较二型ＴＮＦ的杀瘤效应。结果显示，膜型ＴＮＦ主要经效－靶细胞间直接接触发挥胞毒效应，杀瘤谱比分泌型ＴＮＦ广；ＴＮＦ的分泌型和膜型具有协同效应。通过基因直接注射方式，使膜型及膜稳定型ＴＮＦ重组体稳定表达小于鼠体内，为膜型ＴＮＦ转基因应用奠定了基础。
关键词
分泌型
TNF-Α
膜型
基因突变
杀瘤效应
转基因
Keywords
Transmembrane TNF, Secretory TNF, Gene mutation, Eukaryotic expression, Tumor killing effect, Direct gene injection
分类号
R73－36 [医药卫生—肿瘤]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
膜稳定型TNF突变体的构建、表达及活性研究
被引量：
2
2
作者
黄家强
卜夏
李卓娅
龚非力
机构
北京医科大学免疫系分子免疫室
同济
医科大
学
免疫
学教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第4期178-180,197,共4页
基金
国家自然科学基金资助!((No.39270314)
文摘
目的 :TNF α可以分泌型 (S TNF)及其前体膜型 (M TNF)两种活性形式同时存在于体内。为膜型TNF的转基因应用 ,构建一种可表达于胞膜而不被酶解的膜稳定型TNF重组体 (mTNFm)。方法 :在克隆M TNFcDNA的基础上 ,删除两型TNF转换酶酶解部位的编码序列 ,构建出mTNFm并测序验证 ;建立只表达膜型TNF的真核细胞株。结果 :Westernblot分析及活性测定结果表明 ,mTNFm不再发生酶切转换且只通过效 靶细胞间直接接触发挥胞毒效应。通过基因直接注射方式 ,使mTNFm稳定表达于小鼠体内。结论
关键词
膜型TNF-α
基因突变
真核表达
基因治疗
Keywords
Transmembrane TNF-α Gene mutation Eukaryotic expression Direct gene injection Gene therapy
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
人重组GM－CSF／HAS－D3嵌合蛋白（GM－HSA）在大肠杆菌中的表达及其产物稳定性的研究
被引量：
3
3
作者
朱振齐
刘进
马大龙
张颖妹
吴跃红
机构
北京医科大学免疫系分子免疫室
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1996年第3期284-288,共5页
文摘
将人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和人血清白蛋白第三功能区（ＨＳＡ－Ｄ３）的基因串联后，在Ｅ．ｃｏｌｉ中获高效表达，表达量占菌体蛋白的３２．６％。利用ＴＦ－１体外细胞活性测定表明，ＧＭ－ＨＳＡ的活性单位为１．０４×１０＾６Ｕ／ｍｇ，虽然其比活性低于ＧＭ－ＣＳＦ，但比后者具有更高的体外热稳定性和储藏稳定性。
关键词
嵌合蛋白
粒细胞
巨噬细胞
集落刺激因子
稳定性
Keywords
Chimeric protein
Granulocyte-macrophage colony Stimulating factor
Humanserum albumin
Stability
分类号
Q513.02 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人 TNF-α 分泌型、膜型和膜稳定型重组体的构建、表达及杀瘤效应研究
黄家强
卜夏
史须
严宜明
李卓娅
龚非力
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
1998
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
膜稳定型TNF突变体的构建、表达及活性研究
黄家强
卜夏
李卓娅
龚非力
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人重组GM－CSF／HAS－D3嵌合蛋白（GM－HSA）在大肠杆菌中的表达及其产物稳定性的研究
朱振齐
刘进
马大龙
张颖妹
吴跃红
《生物化学杂志》
CSCD
1996
3
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职称材料
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