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树鼩感染人乙肝病毒动物模型研究中的非特异性反应 被引量:7
1
作者 王凤水 陈红松 +3 位作者 王宇 刘艳 杜绍财 冯百芳 《北京医科大学学报》 CSCD 1996年第5期340-342,共3页
目的:观察树是否可成为感染人HBV的动物模型。方法:应用免疫组化及原位杂交技术,对实验组及对照组树肝组织进行研究分析。结果:应用羊抗-HBs多抗检测树肝组织中的HBsAg时,出现假阳性反应,阳性物为非目的抗原,应用生... 目的:观察树是否可成为感染人HBV的动物模型。方法:应用免疫组化及原位杂交技术,对实验组及对照组树肝组织进行研究分析。结果:应用羊抗-HBs多抗检测树肝组织中的HBsAg时,出现假阳性反应,阳性物为非目的抗原,应用生物素标记的HBVDNA探针进行肝组织原位杂交时,出现非特异性的显色反应,结论:提示在动物模型实验中,应设立严格的对照实验和应用不同反应系统进行校对考核。 展开更多
关键词 乙型肝炎 疾病模型 免疫组化
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广西HBsAg阳性母亲的胎儿肝、肾细胞中乙肝病毒DNA存在状态的研究 被引量:2
2
作者 陈健 刘启福 +2 位作者 魏琦 吴祥褆 王宇 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第5期611-615,共5页
采用核酸分子杂交Southern印迹法,以32P标记的HBVDNA为探针,检测HBsAg阳性母亲引产的40例胎儿的肝、肾组织。结果有2例胎肝和1例胎肾细胞DNA出现大于3.2kb的杂交带,表明HBVDNA已处于整合状... 采用核酸分子杂交Southern印迹法,以32P标记的HBVDNA为探针,检测HBsAg阳性母亲引产的40例胎儿的肝、肾组织。结果有2例胎肝和1例胎肾细胞DNA出现大于3.2kb的杂交带,表明HBVDNA已处于整合状态。胎肾细胞基因组中查出HBVDNA整合为首次报道。 展开更多
关键词 乙型肝炎 表面抗原 乙型肝炎病毒 DNA
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20种真菌抑制HBV的实验研究 被引量:20
3
作者 张正 陶其敏 +6 位作者 李敬轩 李壮 杜绍财 许向东 郭建平 孙炎 陶家平 《北京医科大学学报》 CSCD 1989年第6期455-458,共4页
本文研究了20种吉林长白山区产的真菌对HBV的抑制作用。使用体外试管法测定对HBV DNAP的抑制、细胞生物学方法及在感染乙肝病毒的幼鸭上行整体实验。结果证明:某些真菌有抑制HBV作用,以冬虫夏草及树舌作用较强。它们对HBV-DNAP抑制率可... 本文研究了20种吉林长白山区产的真菌对HBV的抑制作用。使用体外试管法测定对HBV DNAP的抑制、细胞生物学方法及在感染乙肝病毒的幼鸭上行整体实验。结果证明:某些真菌有抑制HBV作用,以冬虫夏草及树舌作用较强。它们对HBV-DNAP抑制率可达85%,抑制PLC/PRF/5细胞分泌HBsAg作用超过50%,并能抑制鸭体内的鸭乙肝病毒(DHBV)感染。通过实验提出一种系统研究抑制HBV药物的实验方法。 展开更多
关键词 DNAP 冬虫夏草 乙型肝炎病毒 真菌 抑制
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治疗性疫苗治疗慢性乙型肝炎的研究进展 被引量:5
4
作者 仝文斌 张春英 陶其敏 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1998年第2期71-72,共2页
治疗性疫苗治疗慢性乙型肝炎的研究进展仝文斌张春英陶其敏作者单位:100044北京医科大学人民医院肝病研究所慢性乙型肝炎病毒感染及其所致疾病是严重危害我国人民身体健康的主要传染病之一,除干扰素有一定疗效外,目前仍无实际... 治疗性疫苗治疗慢性乙型肝炎的研究进展仝文斌张春英陶其敏作者单位:100044北京医科大学人民医院肝病研究所慢性乙型肝炎病毒感染及其所致疾病是严重危害我国人民身体健康的主要传染病之一,除干扰素有一定疗效外,目前仍无实际可用的治疗手段和药物。近年部分国内... 展开更多
关键词 乙型肝炎 慢性 疫苗 治疗性
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EBV转化B淋巴细胞中丙型肝炎病毒抗原表达的免疫组化研究 被引量:2
5
作者 程计林 耿直 +4 位作者 仝文斌 范涛 高建恩 马文彬 冯百芳 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2001年第2期92-94,共3页
观察丙型肝炎患者外周血单个核细胞 (PBMC)体外转化培养后其中是否仍有丙型肝炎病毒 (HCV)存在。用EB病毒感染患者HCV阳性PBMC并使其转化 ,获得永生化B细胞 (EBVTB)。而后 ,用套式RT -PCR检测培养细胞和上清中的HCVRNA ,用免疫组化SP法... 观察丙型肝炎患者外周血单个核细胞 (PBMC)体外转化培养后其中是否仍有丙型肝炎病毒 (HCV)存在。用EB病毒感染患者HCV阳性PBMC并使其转化 ,获得永生化B细胞 (EBVTB)。而后 ,用套式RT -PCR检测培养细胞和上清中的HCVRNA ,用免疫组化SP法观察HCV抗原在细胞中的表达。HCV在传代细胞中持续存在 ,而培养细胞中的HCVRNA负链和培养上清中的HCV间断阳性。免疫组化发现HCVNS3、NS5和C抗原分布于胞浆、细胞膜和核膜周围也可见阳性着色 ,细胞核阴性。HCV可以在体外EB病毒转化B细胞系中较长时间存在和复制。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 B淋巴细胞 EBV 抗原 免疫组织化学
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口服干扰素治疗慢性乙型肝炎的研究 被引量:8
6
作者 高燕 冯百芳 +1 位作者 陶其敏 孙炎 《北京医科大学学报》 CSCD 1993年第2期97-99,共3页
本文报道40例慢性乙型肝炎患者口服干扰素随机双盲对照治疗一年,结果表明肝功能改善治疗组为50%,对照组为10%;HBSAg滴度下降,eAg转阴同时伴eAb转阳治疗组为30%,对照组为10%。其机理及扩大临床应用有待进一步研究。
关键词 乙型肝炎 干扰素 谷草转氨酶
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丙型肝炎诊断试剂的研究 被引量:4
7
作者 陶其敏 孟勤 +1 位作者 杜绍财 郭建平 《北京医科大学学报》 CSCD 1992年第4期317-321,共5页
本文用分子生物学方法根据中国人HCV基因特点进行多肽合成,研究丙型肝炎C区、E区酶标试剂的临床应用以及与抗C 100-3试剂的比较,并以 RT双 PCR的方法建立了HCV RNA的检测试剂及临床应用。结果发现抗-CP试剂敏感性、特异性均优于抗C100-3... 本文用分子生物学方法根据中国人HCV基因特点进行多肽合成,研究丙型肝炎C区、E区酶标试剂的临床应用以及与抗C 100-3试剂的比较,并以 RT双 PCR的方法建立了HCV RNA的检测试剂及临床应用。结果发现抗-CP试剂敏感性、特异性均优于抗C100-3,从临床检测结果看,在自然人群中感染率抗-CP为2.8%,抗C100-3为2.1%,特别在输血后肝炎中,抗 CP阳性率高达 71.7%~75.9%。因此提出对HCV的诊断确立与愈后判断各类试剂有各自的作用,不能只根据某一试剂的某一次结果而简单地否定 HCV感染。HCV RNA测定,建立了5’末端非编码区及非结构区(NS 1),采用双PCR观察结果抗-CP阳性者绝大多数为RNA阳性,并提示将有助于抗病毒药物疗效的观察指标。 展开更多
关键词 丙型肝炎 氨基酸序列
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抗HBs固相放免试剂盒系统研究
8
作者 张正 冯百芳 +2 位作者 李新富 孙炎 陶其敏 《北京医科大学学报》 CSCD 1991年第1期29-31,共3页
高灵敏度抗-HBs固相放免试剂盒(以下简称“抗HBs RIA盒”)的系统研究为本所接受国家“七五”攻关课题之一,经五年研制结果表明,HBsAg质量可通过定量测定HBsAg活性蛋白含量提供高质稳定的原料,根据卫生部检定所国家标准品检定抗HBs RIA... 高灵敏度抗-HBs固相放免试剂盒(以下简称“抗HBs RIA盒”)的系统研究为本所接受国家“七五”攻关课题之一,经五年研制结果表明,HBsAg质量可通过定量测定HBsAg活性蛋白含量提供高质稳定的原料,根据卫生部检定所国家标准品检定抗HBs RIA的科研试剂盒在敏感性、特异性及定量抗体检测的线性关系上均得到较好结果。中试后可稳定投产,临床验证与美国Abbott试剂盒比较,在质量上接近该种试剂的国际水平,该项国产试剂已达到国家级鉴定要求。 展开更多
关键词 抗HBsRIA盒 鉴定 敏感性 特异性
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乙型肝炎病毒DNA转染人T淋巴细胞株的研究
9
作者 郭建平 王茜 +2 位作者 王宇 冯百芳 陶其敏 《北京医科大学学报》 CSCD 1993年第1期21-23,共3页
本文试用磷酸钙DNA共沉淀法将HBV DNA转染于培养的人T淋巴细胞株-CEM细胞中,HBV可在转染后的细胞中复制和转录,转染后的细胞培养液中,用酶联免疫吸附法可检测出HBsAg,细胞中可检测出3.2Kb和2.2Kb的HBV DNA片段,HBV DNA对体外培养的人 T... 本文试用磷酸钙DNA共沉淀法将HBV DNA转染于培养的人T淋巴细胞株-CEM细胞中,HBV可在转染后的细胞中复制和转录,转染后的细胞培养液中,用酶联免疫吸附法可检测出HBsAg,细胞中可检测出3.2Kb和2.2Kb的HBV DNA片段,HBV DNA对体外培养的人 T淋巴细胞株的成功转染将有助于HBV致病机理的研究。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 转染 细胞培养
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丙型肝炎病毒E2基因激发小鼠细胞免疫的实验研究
10
作者 谢尧 高建恩 +1 位作者 梁庆华 陶其敏 《北京医科大学学报》 CSCD 2000年第2期102-104,共3页
目的 :研究丙型肝炎病毒E2基因接种能否诱导机体产生细胞免疫以及乙型肝炎病毒preS基因对其诱导细胞免疫能力的影响。方法 :以BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞株 (SP2 /O)为宿主细胞 ,建立表达丙肝病毒E2蛋白的靶细胞 ,将其注射于E2基因或 preS... 目的 :研究丙型肝炎病毒E2基因接种能否诱导机体产生细胞免疫以及乙型肝炎病毒preS基因对其诱导细胞免疫能力的影响。方法 :以BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞株 (SP2 /O)为宿主细胞 ,建立表达丙肝病毒E2蛋白的靶细胞 ,将其注射于E2基因或 preS与E2融合蛋白基因免疫的小鼠腹腔 ,记录小鼠接种瘤细胞后的存活期 ,以小鼠存活期的长短作为反映基因免疫小鼠对HCVE2蛋白细胞免疫的有无或强弱的指标。结果 :靶细胞表达了相对分子质量约为 70 0 0 0的E2蛋白 ,E2基因接种小鼠的存活期长于对照组 ,单独E2基因接种组的存活期显著长于对照组 ,也长于 preS与E2融合蛋白基因免疫组。 结论 :E2基因接种能诱导细胞免疫 ,但与 preS融合后 ,其诱导细胞免疫的能力会降低。 展开更多
关键词 丙型肝炎 E2基因 细胞免疫 实验研究
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PCR在HBsAg污染牙钻消毒试验中的应用研究
11
作者 许向东 杜绍财 +4 位作者 朱凌 刘金祥 陈苹 陶其敏 赵宝荣 《北京医科大学学报》 CSCD 1992年第5期383-384,共2页
本文报告了应用聚合酶链反应(PCR)在口腔科HBsAg污染牙钻消毒试验中的应用,并在7种消毒剂中,筛选出3种对HBV有消毒效果者并确定其对HBV消毒的最佳浓度。结果表明,对HBV遗传物质DNA有消毒作用的消毒剂对HBsAg均有消毒作用;对HBsAg有消毒... 本文报告了应用聚合酶链反应(PCR)在口腔科HBsAg污染牙钻消毒试验中的应用,并在7种消毒剂中,筛选出3种对HBV有消毒效果者并确定其对HBV消毒的最佳浓度。结果表明,对HBV遗传物质DNA有消毒作用的消毒剂对HBsAg均有消毒作用;对HBsAg有消毒作用的消毒剂则不可能对DNA有消毒作用。本文结果提示对控制医院交叉感染,消毒剂使用浓度的重要性。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 消毒剂 乙型肝炎病毒
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丙型肝炎病毒NS3蛋白真核表达载体的构建及其基因免疫研究
12
作者 范涛 高建恩 陶其敏 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第4期383-384,共2页
基因免疫是指将编码特异抗原的目的基因重组表达载体直接接种到宿主组织内,在体内表达基因产物,进而激发宿主产生特异性免疫反应。自1990年首次报道发现基因免疫以来,这一新的免疫技术已经在基础免疫学研究和疫苗研制等许多领域... 基因免疫是指将编码特异抗原的目的基因重组表达载体直接接种到宿主组织内,在体内表达基因产物,进而激发宿主产生特异性免疫反应。自1990年首次报道发现基因免疫以来,这一新的免疫技术已经在基础免疫学研究和疫苗研制等许多领域得到广泛应用。对许多疾病(如流感)... 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 NS3蛋白 真核表达载体 基因免疫
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肝炎诊断试剂的临床验证研究
13
作者 张正 冯百芳 +1 位作者 陶其敏 李新富 《北京医科大学学报》 CSCD 1991年第6期449-451,共3页
肝炎诊断试剂的临床验证研究为我国肝炎诊断试剂标准化、系列化研究不可缺少的环节,几年中,本文收集诊断明确的1564份血清,对3类12种24个试剂进行了有同种同类国外参比品的临床验证。文中报告了该项研究工作的方法及总体结果,并对其临... 肝炎诊断试剂的临床验证研究为我国肝炎诊断试剂标准化、系列化研究不可缺少的环节,几年中,本文收集诊断明确的1564份血清,对3类12种24个试剂进行了有同种同类国外参比品的临床验证。文中报告了该项研究工作的方法及总体结果,并对其临床意义及课题中的作用进行了讨论。 展开更多
关键词 病毒性肝炎 试剂 诊断
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丙型肝炎分子生物学、血清学诊断方法的研究和临床应用
14
作者 陶其敏 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第5期469-472,共4页
Using techniques of molecular biology and serology, we research on the establishment of HCV diagnotic quality control standard, HCV diagnostic materials, anti-HCV EIA diagnostic method, detection of serum HCV RNA,dete... Using techniques of molecular biology and serology, we research on the establishment of HCV diagnotic quality control standard, HCV diagnostic materials, anti-HCV EIA diagnostic method, detection of serum HCV RNA,detection of HCV RNA in liver tissue by in situ PCR, and the establishment of monoclonal hybridoma cell line of HCV C33c and NS5a. Successfully prepared diagnostic kits have applied in screening of blood donor, clinical diagnosis,observation of treatment effect and research on pathogenesis of hepatitis C. After the use of these reagents, the transmission rate of HCV through blood product has been dramatically reduced. 展开更多
关键词 丙型肝炎 分子生物学 血清诊断
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丙型肝炎病毒NS5b区酶切基因分型及其在干扰素治疗中的应用 被引量:3
15
作者 许青田 杜绍财 +3 位作者 季颖 王会民 李新月 陶其敏 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2001年第4期231-232,共2页
探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。应用逆转录 -聚合酶链反应(RT -PCR)技术对 2 6 9例肝炎患者血清进行HCVNS5b区基因片段扩增 ,并对 5 6例阳性PCR产物进行酶切分型 ,同时观察干扰素α - 2b对其中 48例... 探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。应用逆转录 -聚合酶链反应(RT -PCR)技术对 2 6 9例肝炎患者血清进行HCVNS5b区基因片段扩增 ,并对 5 6例阳性PCR产物进行酶切分型 ,同时观察干扰素α - 2b对其中 48例慢性丙型肝炎的疗效。HCV单纯 1b型感染、1b基因变异及 2a型感染对干扰素的应答率分别为 70 % (14/ 2 0 )、9 5 % (2 / 2 1)、71 4% (5 / 7) ;其中完全应答分别为 45 % (9/ 2 0 )、4 8% (1/ 2 1)、5 7 1% (4/ 7) ;部分应答分别为 2 5 % (5 / 2 0 )、4 8% (1/ 2 1)、14 3 % (1/ 7)。 1b基因变异组同单纯 1b型及 2a型感染组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,而单纯 1b型感染组与 2a型感染组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。HCV单纯 1b型感染或 2a型感染者对干扰素敏感 ,而 1b基因变异者干扰素治疗效果极差 ,可作为预测干扰素疗效的一项新的重要指标。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 基因分型 聚合酶链反应 干扰素 NS56区酶切分型
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基因扩增产物的固相杂交-酶联显色方法的建立 被引量:4
16
作者 王凤水 王宇 +1 位作者 陈红松 丛旭 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期192-198,共7页
建立基于基因扩增技术的简便、快速的病毒核酸定量检测方法.将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的病毒基因产物,与通过共价键结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取... 建立基于基因扩增技术的简便、快速的病毒核酸定量检测方法.将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的病毒基因产物,与通过共价键结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取光密度值.应用本方法对血清中乙型、丙型肝炎病毒核酸定量检测,灵敏度分别可达1-5拷贝/反应.此方法简便、快速、特异性好、敏感性高、半定量指标客观,可广泛应用于肝炎病毒感染的临床诊断和疗效评价. 展开更多
关键词 核酸定量 固相杂交 酶联显色 PCR 肝炎病毒
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肝癌和肝硬化患者庚型肝炎病毒RNA及NS3区cDNA酶切分析 被引量:3
17
作者 杜绍财 程恳 常锦红 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1998年第3期153-155,共3页
目的探讨肝癌及肝硬化患者中HGV的感染状态及NS3区部分基因的酶切分析。采用RTPCR技术检测HGVRNA,酶切分析比较中国株与美国GBV-C株两种基因型的酶切位点。结果81例肝癌样品中9例HGVRNA阳性(11.1... 目的探讨肝癌及肝硬化患者中HGV的感染状态及NS3区部分基因的酶切分析。采用RTPCR技术检测HGVRNA,酶切分析比较中国株与美国GBV-C株两种基因型的酶切位点。结果81例肝癌样品中9例HGVRNA阳性(11.11%),28例肝硬化中,3例HGVRNA阳性(10.7%)。酶切位点分析结果表明,中国HGV感染患者在GBV-C4351位存在TSP509I(AA↓TT)切点,美国和日本发表的11株GBV-C和1株HGV中仅2株存在此切点。结论酶切分析结果提示GBV-C株与中国HGV感染株。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝硬化 庚型肝炎病毒 RNA PCP CDNA 酶切
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慢性病毒性肝炎患者自身抗体及干扰素抗体的检测 被引量:10
18
作者 仝文斌 张春英 +3 位作者 孙焱 王豪 冯百芳 陶其敏 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第1期43-45,共3页
目的;分析自身抗体和干扰素抗体在慢性病毒性肝炎患者干扰素治疗时的检出情况及其与治疗效果的关系。方法:自身抗体的检测为间接免疫荧光法;应用酶免疫法测定干扰素抗体之总抗体。结果:(1)与正常人相比,患者自身抗体及干扰素抗... 目的;分析自身抗体和干扰素抗体在慢性病毒性肝炎患者干扰素治疗时的检出情况及其与治疗效果的关系。方法:自身抗体的检测为间接免疫荧光法;应用酶免疫法测定干扰素抗体之总抗体。结果:(1)与正常人相比,患者自身抗体及干扰素抗体阳性率明显增高(P<0.01),而且干扰素抗体在慢乙肝及慢丙肝患者中存在显著性差异(P<0.05);(2)自身抗体的存在与否和疗效无相关性(P>0.05),干扰素抗体在治疗前已阳性和治疗后才转阳的患者,对干扰素治疗的反应可能有一定差异。结论:对于慢性病毒性肝炎患者来说,自身抗体及干扰素抗体的出现并不绝对意味着干扰素治疗效果的好坏。 展开更多
关键词 病毒性肝炎 自身抗体 干扰素
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汉防已甲素对肝细胞生长增殖的影响 被引量:7
19
作者 刘玉兰 李定国 +1 位作者 陆汉明 徐芹芳 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1995年第3期212-216,共5页
采用流式细胞技术观察不同浓度的汉防已甲素(Tet)对大鼠RBL肝细胞生长增殖的影响。结果表明,随着Tet浓度的增加(10~60μg/ml),G2→S期的进程加速,且S期DNA含量及G1和G2期蛋白质含量增加呈一定的量... 采用流式细胞技术观察不同浓度的汉防已甲素(Tet)对大鼠RBL肝细胞生长增殖的影响。结果表明,随着Tet浓度的增加(10~60μg/ml),G2→S期的进程加速,且S期DNA含量及G1和G2期蛋白质含量增加呈一定的量效关系。经加入外源性Ca ̄(2+)及ATP证实Tet促进肝细胞生长增殖的作用与阻断Ca ̄(2+)内流无关。提示具有钙通道阻断作用的Tet可促进肝细胞生长增殖。 展开更多
关键词 汉防已甲素 肝细胞 细胞生长 药理学
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在哺乳动物细胞中稳定表达丙型肝炎病毒E2糖蛋白 被引量:4
20
作者 吴朝栋 高建恩 陶其敏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期15-15,共1页
利用DNA重组技术,将Ⅲ型中国株HCVE2/NS1基因片段插入真核表达载体,然后转染哺乳动物细胞NIH3T3以表达E2糖蛋白.检测显示来自3月以上培养的细胞克隆中表达产物分子量为70kD,经Westernblot证实... 利用DNA重组技术,将Ⅲ型中国株HCVE2/NS1基因片段插入真核表达载体,然后转染哺乳动物细胞NIH3T3以表达E2糖蛋白.检测显示来自3月以上培养的细胞克隆中表达产物分子量为70kD,经Westernblot证实该表达产物能与抗HCV阳性血清进行特异性反应.以上表明首次在哺乳动物细胞中成功表达Ⅲ型中国株HCV的E2糖蛋白,并建立相应的稳定表达细胞系. 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 包膜蛋白 稳定表达 哺乳动物
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