兽医学(中医药)重点实验室建设对学生创新创业能力培养的实践与探索 被引量：2

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作者 崔德凤 董虹 +5 位作者 王建舫 李佳 张涛 姜代勋 李焕荣 穆祥 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期123-125,共3页

中(兽)医药学是我国的传统医学宝库之一。2020年6月总书记强调,要加强古典医籍精华的梳理和挖掘,建设一批科研支撑平台,改革完善中药审评审批机制,促进中药新药研发和产业发展,要强化中医药特色人才建设,打造一支高水平的国家中医疫病... 中(兽)医药学是我国的传统医学宝库之一。2020年6月总书记强调,要加强古典医籍精华的梳理和挖掘,建设一批科研支撑平台,改革完善中药审评审批机制,促进中药新药研发和产业发展,要强化中医药特色人才建设,打造一支高水平的国家中医疫病防治队伍。兽医学(中医药)北京市重点实验室始建于2006年12月,经北京市科学技术委员会和北京市教育委员会批准成立,依托单位为北京农学院,是国内较早从事中兽医药学研究的省部级重点实验室。 展开更多

关键词 北京农学院 兽医学 疫病防治 重点实验室建设 创新创业能力培养 科学技术委员会 古典医籍 中医药特色

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原核表达技术在动物传染病疫苗生产中的应用 被引量：1

2

作者 朱梦涵 李桂萍 +2 位作者 霍彩云 孙英健 孙惠玲 《动物医学进展》 北大核心 2024年第10期96-100,共5页

原核表达技术是基因表达中开发最早、使用最广泛的蛋白表达技术。因具有成本低廉,遗传背景清晰,培养周期短,可大量收获等特点,而在动物传染病疫苗的生产中广泛应用。论文主要总结了利用原核表达技术生产动物传染病疫苗时目的基因的选择... 原核表达技术是基因表达中开发最早、使用最广泛的蛋白表达技术。因具有成本低廉,遗传背景清晰,培养周期短,可大量收获等特点,而在动物传染病疫苗的生产中广泛应用。论文主要总结了利用原核表达技术生产动物传染病疫苗时目的基因的选择,宿主菌的选择、以及疫苗的安全性和免疫效力的检测方法,并对原核表达技术在动物传染病疫苗生产中的安全性与制备成本的优势进行了讨论,以期为今后利用原核表达技术研发和生产疫苗提供参考和借鉴。 展开更多

关键词 原核表达技术 目的基因 宿主菌 疫苗安全性检测 疫苗免疫效力检测

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北京某猪场断奶仔猪呼吸道疾病的诊断 被引量：2

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作者 陈泓岑 刘世洲 +8 位作者 王乐 常可欣 卢天航 雒星辰 邓杨 李子萱 刘博文 张永红 崔德凤 《猪业科学》 2022年第10期66-69,共4页

病毒、细菌和环境应激等诸多因素可诱发呼吸道疾病综合征(Porcine respiratory syndrome,PRDC),其病毒类病原主要包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRSV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus... 病毒、细菌和环境应激等诸多因素可诱发呼吸道疾病综合征(Porcine respiratory syndrome,PRDC),其病毒类病原主要包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRSV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus,PCV2)、猪巨大细胞病毒等;细菌类病原包括猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida,Pm)和副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hs)等。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 呼吸道疾病 环境应激 病毒类 断奶仔猪 PCV2 细菌类

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基于网络药理学联合16SrDNA高通量测序技术分析丹参对感染大肠杆菌小鼠肠道菌群的影响 被引量：5

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作者 王乐 陈泓岑 +7 位作者 张永红 吴琼 侯佳佳 王天祎 卢天航 黄传发 张华 崔德凤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3695-3711,共17页

本研究旨在通过网络药理学联合16S rDNA高通量测序技术分析丹参对感染大肠杆菌小鼠肠道菌群的影响。利用传统中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选丹参有效成分及靶点基因。使用基因数据库(Genecards)获得E.coli靶点基因。两者靶... 本研究旨在通过网络药理学联合16S rDNA高通量测序技术分析丹参对感染大肠杆菌小鼠肠道菌群的影响。利用传统中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选丹参有效成分及靶点基因。使用基因数据库(Genecards)获得E.coli靶点基因。两者靶点基因取交集,通过STRING平台进行蛋白质相互作用分析,构建PPI网络,并运用Cytoscape 3.8.2软件构建“丹参活性成分-潜在作用靶点”网络。利用DAVID在线工具进行基因本体论(GO)功能富集分析,Metascape数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。试验选用110只雄性昆明小鼠,随机分为对照组、大肠杆菌组和低、中、高剂量丹参大肠杆菌感染组,每组22只。连续灌胃丹参液28 d后,用E.coli O_(101)进行腹腔注射,对照组注射无菌生理盐水,观察24 h后,收集各组粪便。应用16S rDNA高通量测序技术对各组小鼠肠道菌群进行分析。结果显示:1)网络药理学丹参有效成分36个,作用靶点669个,Genecards数据库搜索E.coli靶点8902个,对两者取交集去除孤立点获得丹参治疗E.coli潜在靶点51个;GO、KEGG分析,获得关键靶点18个、关键通路47条,其中生物过程(BP)、分子功能(MF)和细胞成分(CC)各为174、76、45条;2)通过Illumina Miseq测序共获得950855条有效序列,2537个操作分类单元(OTUs);3)Alpha多样性分析结果表明,不同剂量丹参组肠道菌群多样性与对照组具有显著差异,大肠杆菌组肠道菌群多样性显著低于对照组(P<0.05);4)相比于大肠杆菌感染组,在门水平上,低、中、高剂量丹参大肠杆菌感染组Bacteroidetes(拟杆菌门)丰度极显著增高(P<0.01),Firmicutes(厚壁菌门)丰度显著增高(P<0.05),Proteobacteria(变形菌门)极显著降低(P<0.01),在属水平上Bacteroides(拟杆菌属)丰度极显著增高(P<0.01);5)基于LEfSe分析,对照组、大肠杆菌感染组、丹参高剂量大肠杆菌感染组共发现14种显著差异菌群;6)PICRUSt功能预测分析发现,丹参对大肠杆菌感染小鼠肠道菌群调节功能主要富集的途径是氨基酸、碳水化合物运输与代谢,翻译、核糖体结构和生物转化,细胞壁/膜/生物合成等方面。综上,基于网络药理学联合16S rDNA高通量测序技术全面揭示了丹参多成分、多靶点、多途径调节相关菌群生物丰富度,对大肠杆菌感染小鼠的肠道菌群紊乱有缓解作用,为临床应用丹参治疗大肠杆菌感染提供理论依据。 展开更多

关键词 丹参 网络药理学 肠道菌群 高通量测序 小鼠

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气调包装保鲜技术对猪肉冷藏保鲜效果的影响 被引量：14

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作者 栗云鹏 高晨 +4 位作者 王蕊 施乾东 郑宇 李玉勇 孙英健 《北京农学院学报》 2017年第1期43-47,共5页

【目的】研究经气调包装的鲜猪肉在0~4℃冷藏条件下的保鲜效果。【方法】以新鲜猪肉为对象,采用空气及含不同比例气体(O2、CO2、N2)的充气包装鲜猪肉,通过检测肉品中菌落总数、大肠菌群最近似数及致病微生物、肉品总挥发性盐基氮含量及p... 【目的】研究经气调包装的鲜猪肉在0~4℃冷藏条件下的保鲜效果。【方法】以新鲜猪肉为对象,采用空气及含不同比例气体(O2、CO2、N2)的充气包装鲜猪肉,通过检测肉品中菌落总数、大肠菌群最近似数及致病微生物、肉品总挥发性盐基氮含量及pH值,对不同包装肉品在冷藏条件下的肉品品质进行评价。【结果】经气调包装的肉品在冷藏过程中菌落总数、大肠菌群数量增加缓慢,沙门氏菌出现较晚,挥发性盐基氮和pH在新鲜肉的标准范围内,其中70%O2+25%CO2+5%N2的气调包装保存鲜猪肉的综合评价效果最好,保质期可达10d。【结论】市售肉品采用气调包装可延长鲜肉制品的保存期。 展开更多

关键词 鲜猪肉 保鲜 气调包装 微生物检测

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咯利普兰对猪中性粒细胞表达Mac-1的作用及有关信号机制

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作者 张旭日 张溪园 +4 位作者 王恩慈 郭雨楠 李姣 黄安琦 姜代勋 《北京农学院学报》 2024年第1期52-57,共6页

【目的】阐明咯利普兰为代表的磷酸二酯酶4抑制剂的抗炎新机制。【方法】采用密度梯度离心法分离猪中性粒细胞,流式细胞术检测猪中性粒细胞表达巨噬细胞表面分子抗原-1(Macrophage surface molecular antigen-1,Mac-1);Real-time qPCR和... 【目的】阐明咯利普兰为代表的磷酸二酯酶4抑制剂的抗炎新机制。【方法】采用密度梯度离心法分离猪中性粒细胞,流式细胞术检测猪中性粒细胞表达巨噬细胞表面分子抗原-1(Macrophage surface molecular antigen-1,Mac-1);Real-time qPCR和Western blot技术检测猪中性粒细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p65核转录因子(p65 NF-κB)mRNA表达和磷酸化活性。【结果】佛波酯(phorbol myristate acetate, PMA)可显著上调中性粒细胞表达Mac-1(P<0.01),咯利普兰对PMA上调的中性粒细胞表达Mac-1有一定抑制作用,其中,5μmol/L咯利普兰可极显著抑制中性粒细胞表达Mac-1(P<0.01);PMA可极显著上调中性粒细胞p38 MAPK、ERK和p65 NF-κB mRNA表达和磷酸化活性(P<0.01),5μmol/L咯利普兰对PMA升高的中性粒细胞p38 MAPK、p65 NF-κB mRNA表达有极显著抑制作用(P<0.01),对ERK mRNA表达有显著抑制作用(P<0.05),对PMA升高的中性粒细胞p38 MAPK、ERK和p65 NF-κB磷酸化活性有极显著抑制作用(P<0.01)。【结论】咯利普兰可显著抑制中性粒细胞表达Mac-1,其机制与阻遏p38 MAPK、ERK、p65 NF-κB基因表达和磷酸化活性有关。 展开更多

关键词 巨噬细胞表面分子抗原-1 p38丝裂原活化蛋白激酶 细胞外调节蛋白激酶 p65核转录因子 咯利普兰 中性粒细胞 猪

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人工感染PRRSV仔猪心脏的临床表现和病理变化

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作者 李汉奇 刘杨 +3 位作者 郭玮 傅业全 王建舫 张涛 《北京农学院学报》 2024年第2期62-65,共4页

【目的】了解PRRSV感染对仔猪心脏的损伤特点。【方法】以PRRSV JXA1株感染约5周龄长白仔猪,出现临床症状后,使用听诊器检查人工感染组和正常对照组仔猪的心音变化,发病第3天,剖检并取左心室壁组织,制作石蜡切片,HE染色观察病理变化,免... 【目的】了解PRRSV感染对仔猪心脏的损伤特点。【方法】以PRRSV JXA1株感染约5周龄长白仔猪,出现临床症状后,使用听诊器检查人工感染组和正常对照组仔猪的心音变化,发病第3天,剖检并取左心室壁组织,制作石蜡切片,HE染色观察病理变化,免疫组织化学染色检测PRRSV N蛋白分布。【结果】心脏听诊结果显示,感染仔猪第二心音显著性增强,部分仔猪心动过速或心律不齐,偶有轻微心包拍水音;剖检结果显示,感染仔猪心包膜略增厚,心包腔少量积液,心脏横径略大,质地较软,心肌有出血点;HE染色结果显示,感染仔猪心肌组织出现淤血、淋巴细胞浸润、颗粒变性等病理性变化;免疫组织化学染色结果显示,PRRSV N蛋白在心肌组织分布广泛,不仅分布于心肌细胞,也分布于血管内皮细胞。【结论】PRRSV JXA1株人工感染第3天,即引起仔猪心脏功能变化和心肌组织病变,这表明在该病毒病的治疗中应尽早加强对心脏功能的保护。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 心脏听诊 血管内皮细胞 病理变化 淤血

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绿原酸对小鼠不同组织巨噬细胞增殖、分泌及吞噬功能的影响 被引量：7

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作者 张永红 官佳懿 +4 位作者 崔德凤 谷崇高 徐双 李洋 沈红 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第9期46-51,共6页

为观察绿原酸(CHA)对小鼠不同组织巨噬细胞功能的影响,采用无菌操作制备小鼠腹腔、骨髓和脾脏巨噬细胞,体外培养在含有脂多糖(LPS)和绿原酸的RPMI1640培养液中,用MTT法检测细胞增殖,ELISA和Griess法分别分析细胞分泌TNF-α和NO的水平,瑞... 为观察绿原酸(CHA)对小鼠不同组织巨噬细胞功能的影响,采用无菌操作制备小鼠腹腔、骨髓和脾脏巨噬细胞,体外培养在含有脂多糖(LPS)和绿原酸的RPMI1640培养液中,用MTT法检测细胞增殖,ELISA和Griess法分别分析细胞分泌TNF-α和NO的水平,瑞氏-吉姆萨染色法测定巨噬细胞吞噬能力。结果与对照组和LPS组相比,腹腔、脾脏和骨髓3种不同组织巨噬细胞CHA组和LPS联合CHA组A值均有所降低,即3种巨噬细胞增殖转化率均有所下降,3种不同组织巨噬细胞CHA组和CHA+LPS组NO分泌量明显增加,且具有剂量依赖性。较之LPS组,不同组织巨噬细胞CHA组TNF-α分泌量降低,而脾脏和骨髓巨噬细胞LPS联合CHA组分泌TNF-α量显著提高,腹腔巨噬细胞组不显著。CHA显著提高LPS刺激的腹腔巨噬细胞吞噬能力。此外,CHA可显著提高环磷酰胺处理小鼠脾脏和骨髓巨噬细胞存活率,但使脾脏和腹腔巨噬细胞分泌NO量显著减少。结果提示绿原酸对小鼠不同组织巨噬细胞增殖、TNF-α和NO分泌以及吞噬能力均有不同程度影响。 展开更多

关键词 绿原酸 巨噬细胞 增殖 分泌 吞噬 小鼠

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程序化冷冻前后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎的Hba-α蛋白分布和差异表达 被引量：3

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作者 刘迪 倪和民 +6 位作者 顾美超 李征 王力红 盛熙晖 齐晓龙 王相国 郭勇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期579-584,共6页

目的利用程序化冷冻的方法,探究冷冻前、后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中Hba-α蛋白的分布和差异表达的变化,为今后开发和利用新型哺乳动物源抗冻蛋白提供理论依据。方法从妊娠d5小鼠体内获取孵化囊胚;从小鼠延迟着床模型获取休眠胚胎,利用C... 目的利用程序化冷冻的方法,探究冷冻前、后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中Hba-α蛋白的分布和差异表达的变化,为今后开发和利用新型哺乳动物源抗冻蛋白提供理论依据。方法从妊娠d5小鼠体内获取孵化囊胚;从小鼠延迟着床模型获取休眠胚胎,利用Confocal显微镜和Western Blot技术对程序化冷冻前、后的各组胚胎进行Hba-α蛋白的分布和表达检测。结果孵化囊胚和休眠胚胎在程序化冷冻前、后均有Hba-α蛋白的表达;孵化囊胚经程序化冷冻后Hba-α蛋白的表达与冷冻前相比差异无显著性(P>0.05);冷冻前休眠胚胎与程序化冷冻前后的孵化囊胚相比,Hba-α蛋白的表达量显著下调(P<0.05);冷冻后休眠胚胎Hba-α蛋白的表达量显著低于其他各组(P<0.05)。结论程序化冷冻处理对小鼠休眠胚胎Hba-α蛋白的表达影响明显大于孵化囊胚;Hba-α基因具有作为新型哺乳动物源抗冻蛋白的潜力。 展开更多

关键词 小鼠 孵化囊胚 休眠胚胎 程序化冷冻 Hba-α蛋白

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大鼠肺微血管内皮细胞的体外分离培养与纯化 被引量：2

10

作者 梁宏伟 冯波 +3 位作者 朱雯宇 王建舫 张涛 穆祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2143-2150,共8页

旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法。取5~7日龄SD大鼠分离外周肺组织,组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞,37℃、5%CO_2培养箱中传代培养,采用免疫磁珠法对其进行分离纯化,并对... 旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法。取5~7日龄SD大鼠分离外周肺组织,组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞,37℃、5%CO_2培养箱中传代培养,采用免疫磁珠法对其进行分离纯化,并对分离纯化后的细胞进行免疫荧光及流式细胞鉴定,通过MTT比色分析法准确、安全、可靠地检测纯化后传代肺微血管内皮细胞的增殖情况。结果显示：倒置显微镜下观察单个细胞呈短梭形或多角形,汇合后呈铺路石样,单层贴壁生长,细胞分离纯化后经免疫荧光检测CD31呈阳性,流式细胞仪检测淋巴管内皮细胞表面特有标记VEGFR-3呈阴性（P=0.1,且P〈0.5）,且复苏后经MTT测得传代细胞的增殖情况良好。成功建立了一种分离高纯度大鼠肺微血管内皮细胞的体外培养方法。 展开更多

关键词 大鼠 肺微血管内皮细胞 体外分离培养 免疫磁珠纯化

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赤芍水提物对金黄色葡萄球菌肠毒素及蛋白A表达的影响 被引量：2

11

作者 张鹏鹏 李增顺 +3 位作者 汤鹏 段慧琴 孙英健 穆祥 《动物医学进展》 北大核心 2016年第9期75-78,共4页

探讨了赤芍水提物在体外对金黄色葡萄球菌肠毒素A、B及蛋白A分泌及mRNA转录的影响。试验中采用微量倍比稀释法测定赤芍对金黄色葡萄球菌ATCC29213的最小抑菌浓度(MIC);采用Western blot和实时荧光定量PCR检测亚抑菌浓度下赤芍水提物对... 探讨了赤芍水提物在体外对金黄色葡萄球菌肠毒素A、B及蛋白A分泌及mRNA转录的影响。试验中采用微量倍比稀释法测定赤芍对金黄色葡萄球菌ATCC29213的最小抑菌浓度(MIC);采用Western blot和实时荧光定量PCR检测亚抑菌浓度下赤芍水提物对金黄色葡萄球菌肠毒素A、B及蛋白A在mRNA转录和毒素蛋白分泌表达的影响。结果表明,赤芍水提物对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC值为6.3mg/mL;在亚抑菌浓度下,赤芍水提物可以明显抑制肠毒素A、B及蛋白A在蛋白水平和转录水平的表达,且呈现明显的浓度依赖性。 展开更多

关键词 赤芍 金黄色葡萄球菌 肠毒素 蛋白A

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仔猪感染PCV2后空肠黏膜免疫系统中相关免疫细胞变化 被引量：5

12

作者 邹战明 乔金增 +3 位作者 杨宁 朱琳琳 武子函 李焕荣 《北京农学院学报》 2016年第1期50-54,共5页

【目的】分析PCV2感染后对仔猪空肠免疫功能的影响。【方法】将6头断奶仔猪随机分为PCV2感染组和空白组,通过流式细胞术分析仔猪空肠中诱导部位和效应部位相关免疫细胞变化。【结果】结果显示,与空白组相比,PCV2感染组诱导部位PP结中总... 【目的】分析PCV2感染后对仔猪空肠免疫功能的影响。【方法】将6头断奶仔猪随机分为PCV2感染组和空白组,通过流式细胞术分析仔猪空肠中诱导部位和效应部位相关免疫细胞变化。【结果】结果显示,与空白组相比,PCV2感染组诱导部位PP结中总T淋巴细胞、活化/记忆T细胞和细胞毒性T细胞百分率极显著增高(P<0.01),B细胞百分率显著增加(P<0.05);效应部位固有层中树突状细胞(DCs)、B细胞、活化/记忆T细胞和细胞毒性T细胞百分率极显著增高(P<0.01),DCs表面抗原递呈相关分子CD80/86与MHCⅡ表达量、总T淋巴细胞、NK细胞百分率显著上调(P<0.05),而黏膜层中总T淋巴细胞、活化/记忆T细胞和细胞毒性T细胞、NK细胞百分率极显著增高(P<0.01)。【结论】结果表明PCV2感染导致空肠黏膜免疫系统中树突状细胞及各类淋巴细胞数量的增加,可能影响了空肠黏膜的免疫功能,提示其与PCV2临床感染引起肠炎的发生存在一定相关性。 展开更多

关键词 PCV2 仔猪 空肠 免疫细胞

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白头翁复方口服液药效学研究 被引量：3

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作者 张永红 杨光 +4 位作者 李琼 崔德凤 王天祎 刘凤华 李焕荣 《北京农学院学报》 2016年第1期69-72,共4页

【目的】研究白头翁、黄连、大青叶等复方药效学作用。【方法】白头翁复方口服液体外大肠杆菌抑菌杀菌试验、大鼠足跖肿胀法抗炎试验、小鼠番泻叶法止泻试验和小鼠冰醋酸法镇痛试验。【结果】白头翁复方口服液最小抑菌浓度(minimum inhi... 【目的】研究白头翁、黄连、大青叶等复方药效学作用。【方法】白头翁复方口服液体外大肠杆菌抑菌杀菌试验、大鼠足跖肿胀法抗炎试验、小鼠番泻叶法止泻试验和小鼠冰醋酸法镇痛试验。【结果】白头翁复方口服液最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)1×2-3,生药含量为125mg/mL;最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)1×2-2,生药含量为250mg/mL;对二甲苯刺激导致的大鼠炎性反应有抗炎作用,剂量为1.5g/kg·bw;连续饲喂小鼠3d,剂量为0.75、1.5g/kg·bw时对番泻叶造成的小鼠腹泻有治疗作用;剂量为0.75、1.5、3.0g/kg·bw,对冰醋酸造成的小鼠腹痛有止痛效果。【结论】白头翁复方口服液具有明显的抗菌、抗炎、止泻与镇痛作用。 展开更多

关键词 白头翁复方口服液 抗菌 抗炎 止泻 镇痛

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椎间盘脱出模型大鼠脊髓巢蛋白和音猬因子变化及电针效应 被引量：3

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作者 程鹏 李伟 +3 位作者 李拓 高蕊 姜代勋 陈武 《北京农学院学报》 2016年第1期42-45,共4页

【目的】研究椎间盘脱出模型大鼠脊髓巢蛋白(Nestin)和音猬因子(SHH)变化及电针效应,分析神经组织代偿性修复的机理。【方法】大鼠随机分为空白组(n=9)、模型组(n=15)和电针组(n=15),在T13段脊髓左腹侧填塞硅胶片建立椎间盘脱出模型。... 【目的】研究椎间盘脱出模型大鼠脊髓巢蛋白(Nestin)和音猬因子(SHH)变化及电针效应,分析神经组织代偿性修复的机理。【方法】大鼠随机分为空白组(n=9)、模型组(n=15)和电针组(n=15),在T13段脊髓左腹侧填塞硅胶片建立椎间盘脱出模型。模型建立后4、7、14d处死大鼠取压迫部位脊髓组织,荧光抗体法观察Nestin阳性细胞数量,ELISA法检测Nestin和SHH含量。【结果】14d时,与模型组相比,电针组运动机能评分极显著升高(P<0.01),SHH含量和Nestin阳性细胞数量极显著升高(P<0.01),Nestin含量显著升高(P<0.05)。【结论】本研究成功建立椎间盘脱出模型,脊髓受压后自我修复过程中可表达Nestin。电针干预后大鼠运动机能极显著改善,提示其与电针升高Nestin和SHH含量有关。 展开更多

关键词 大鼠 椎间盘脱出 巢蛋白 音猬因子 电针

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屎肠球菌细菌素Enterocin E9 SPE/HPLC分离纯化方法的建立 被引量：2

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作者 鲍宇晖 张永红 +4 位作者 王建舫 李佳 崔德凤 马梦 王惠川 《北京农学院学报》 2014年第4期59-64,共6页

为了获得单一的细菌素Enterocin E9成分,使其发挥最大抑菌活性,建立在线SPE/HPLC分离Enterocin E9的方法。通过细菌培养,上清液收集、浓缩,获得细菌素粗提样品,采用Sepbox 2D-250全自动二维液相分离系统,确认流动相组成,流速和洗脱时间... 为了获得单一的细菌素Enterocin E9成分,使其发挥最大抑菌活性,建立在线SPE/HPLC分离Enterocin E9的方法。通过细菌培养,上清液收集、浓缩,获得细菌素粗提样品,采用Sepbox 2D-250全自动二维液相分离系统,确认流动相组成,流速和洗脱时间等因素。提取的单一成分其抑菌效果是浓缩样品的2.4倍。该方法省时、省力、精密度高,为细菌素结构与功能的研究提供一条有效途径和方法。 展开更多

关键词 ENTEROCIN E9 SPE/HPLC 分离纯化 抑菌活性

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NTE基因ShRNA慢病毒载体的构建与鉴定

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作者 张银花 李秋明 +1 位作者 孙英健 沈红 《北京农学院学报》 2017年第2期6-9,共4页

【目的】构建神经病靶酯酶(NTE)蛋白低表达的ShRNA重组慢病毒表达系统。【方法】依照ShRNA序列设计原则设计带酶切位点的NTE ShRNA序列,与表达载体pLL3.7连接构建NTE ShRNA重组表达质粒,转染DH5α菌观察重组表达状况,与pCVM-VSV-G包膜... 【目的】构建神经病靶酯酶(NTE)蛋白低表达的ShRNA重组慢病毒表达系统。【方法】依照ShRNA序列设计原则设计带酶切位点的NTE ShRNA序列,与表达载体pLL3.7连接构建NTE ShRNA重组表达质粒,转染DH5α菌观察重组表达状况,与pCVM-VSV-G包膜质粒和pCMV-dr8.2dvpr表达质粒共转染293T细胞,包装得到重组慢病毒。用病毒稀释法以绿色荧光蛋白(GFP)为标记,确定转染效率及病毒含量。【结果】经酶切及测序鉴定结果显示成功构建pLL3.7-NTE ShRNA慢病毒载体。重组慢病毒质粒与辅助质粒共转染293T细胞后获得高表达的细胞,共转染48h后,收集病毒液检测病毒滴度达4.5×10~4/mL。【结论】成功构建NTE ShRNA慢病毒重组表达系统。 展开更多

关键词 pLL3.7 慢病毒载体 短发卡结构RNA NTE

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鸡传染性支气管炎病毒介导的细胞内受体及抗病毒基因的表达

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作者 李德银 张彤 +3 位作者 许磊 梅晨 吴国娟 侯晓林 《北京农学院学报》 2016年第1期64-68,共5页

【目的】研究传染性支气管炎病毒对细胞模式识别受体(PRRS)及天然抗病毒基因转录的激活作用。【方法】IBV M41毒株感染DF-1细胞,应用荧光定量PCR测定细胞内受体(MDA5、LGP2、MAVS和NLRC5)和抗病毒相关基因(IRF7,IFN-α/β,NF-κB1)在禽... 【目的】研究传染性支气管炎病毒对细胞模式识别受体(PRRS)及天然抗病毒基因转录的激活作用。【方法】IBV M41毒株感染DF-1细胞,应用荧光定量PCR测定细胞内受体(MDA5、LGP2、MAVS和NLRC5)和抗病毒相关基因(IRF7,IFN-α/β,NF-κB1)在禽传染性支气管炎感染过程中不同时间点的转录水平表达变化。【结果】在感染的细胞中几种细胞内受体在感染不同时间点均有不同程度的升高。IFN-α、IRF7和NF-κB1的表达在感染后显著升高,而IFN-β在感染36h内被抑制,48h被激活。【结论】鸡传染性支气管炎病毒体外感染DF-1细胞后能显著激活细胞内受体及抗病毒基因的表达。 展开更多

关键词 传染性支气管炎病毒 细胞内受体 干扰素

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一株抗逆性凝结芽孢杆菌的分离与鉴定 被引量：16

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作者 赵文龙 王龙 +3 位作者 张永红 鲍宇晖 郤小宁 崔德凤 《北京农学院学报》 2014年第2期36-39,共4页

凝结芽孢杆菌是一类能形成芽孢的乳酸菌,作为动物和人类的益生菌广泛应用。本试验从健康猪肠道分离细菌,将分离到的细菌进行形态特征观察,以及生理生化鉴定,并进行耐酸、耐胆盐、热稳定性及抑菌试验。结果表明,分离菌为乳酸凝结芽孢杆菌... 凝结芽孢杆菌是一类能形成芽孢的乳酸菌,作为动物和人类的益生菌广泛应用。本试验从健康猪肠道分离细菌,将分离到的细菌进行形态特征观察,以及生理生化鉴定,并进行耐酸、耐胆盐、热稳定性及抑菌试验。结果表明,分离菌为乳酸凝结芽孢杆菌,具有优秀的抗逆性能,能够抵抗pH 3.0处理3h,0.3%胆盐处理8h,能够耐受100℃、30min处理,抑菌试验表明,该菌株对大肠杆菌、沙门氏菌均有较强的抑制作用。这些特征使该菌具有作为益生菌候选菌应用的潜力。 展开更多

关键词 凝结芽孢杆菌 分离鉴定 生长特性

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迷迭香精油对金葡菌感染小鼠的干预作用 被引量：14

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作者 刘倩 曹硕 +2 位作者 张昊 沈红 张永红 《北京农学院学报》 2019年第2期71-76,共6页

【目的】为了探明迷迭香精油在体内外试验中的抗菌作用。【方法】采用药敏试验检测迷迭香精油体外抑菌效果;通过金黄色葡萄球菌(金葡菌)滴鼻法建立小鼠肺炎模型,小鼠每天2次吸入迷迭香精油,每次30分连续7d,试验结束小鼠称重、采血,生化... 【目的】为了探明迷迭香精油在体内外试验中的抗菌作用。【方法】采用药敏试验检测迷迭香精油体外抑菌效果;通过金黄色葡萄球菌(金葡菌)滴鼻法建立小鼠肺炎模型,小鼠每天2次吸入迷迭香精油,每次30分连续7d,试验结束小鼠称重、采血,生化分析仪分析血常规指标,组织固定制备石蜡切片,显微镜观察组织病变,细菌定殖检测。【结果】迷迭香精油组大肠杆菌、金葡菌和链球菌抑菌圈分别为(12.4±2.4)、(12.6±1.2)、(11.5±0.5)mm,茶树精油有抑菌圈出现,薰衣草精油组无抑菌圈。模型组小鼠金葡菌感染后反应明显增强、采食减少、体重明显减轻,肺指数升高,肺细菌定殖率高,白介素-6 (IL-6)和炎性细胞数量明显增加;肉眼观察到小鼠肺脏肿胀充血、色泽暗红,肺叶上均有大小不等的出血斑,肺组织有硬肿块,肺门淋巴结肿大;镜检发现肺脏结构改变明显,肺泡间隙有炎性细胞聚集和浸润,组织实变明显,肺泡壁增厚,肺泡组织结构完整性破坏,肺泡腔内可见出血。与模型组比较,迷迭香组小鼠反应温和,采食和体重增加,肺脏指数降低和细菌定植率下降,后期IL-6和炎性细胞数量明显减少;小鼠肺组织充血减轻,肺泡间隙炎性细胞浸润减少,肺泡结构完整性逐步恢复,接近对照组小鼠。【结论】迷迭香精油体外具有良好的抗菌作用,体内缓解金葡菌引起的肺炎炎症症状。 展开更多

关键词 迷迭香精油 小鼠 金葡菌 肺炎 抗菌作用

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胡黄连与牛蒡子有效成分对猪磷酸二酯酶7A2活性的影响 被引量：3

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作者 付源 李佳 +2 位作者 孙胜永 姜代勋 陈武 《北京农学院学报》 2014年第4期65-68,共4页

从牛蒡子、胡黄连中筛选对猪磷酸二酯酶(PDE)7A2具有抑制作用的中药单体成分,为PDE亚型抑制剂研究积累资料。使用高效液相色谱法(HPLC)测定绿原酸、牛蒡子苷、β-谷甾醇和胡黄连苷-Ⅱ对体外原核表达的猪PDE7A2的抑制作用。结果表明:在... 从牛蒡子、胡黄连中筛选对猪磷酸二酯酶(PDE)7A2具有抑制作用的中药单体成分,为PDE亚型抑制剂研究积累资料。使用高效液相色谱法(HPLC)测定绿原酸、牛蒡子苷、β-谷甾醇和胡黄连苷-Ⅱ对体外原核表达的猪PDE7A2的抑制作用。结果表明:在反应质量浓度为1,5,10,50,100μmol/L时,绿原酸对猪PDE7A2的活性抑制率分别为12.55%,46.29%,56.17%,68.52%,47.12%;牛蒡子苷抑制率分别为21.60%,41.35%,70.16%,88.27%,80.07%;β-谷甾醇抑制率分别为40.53%,54.52%,71.81%,96.50%,94.86%;胡黄连苷-Ⅱ抑制率分别为69.34%,94.03%,96.50%,103.09%,101.44%。绿原酸、牛蒡子苷、β-谷甾醇和胡黄连苷-Ⅱ对体外表达的猪PDE7A2均有抑制作用,其中胡黄连苷-Ⅱ对猪PDE7A2的抑制作用最强。 展开更多

关键词 猪 磷酸二酯酶7A2 胡黄连 牛蒡子

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