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UPLC-MS/MS高通量测定鸡粪中81种抗菌药物残留方法的建立
1
作者
刘田
赵芮敏
+7 位作者
李木子
李泽慧
孙瑞
杨智和
孙晓亮
赵思俊
宋翠平
霍乃蕊
《农业环境科学学报》
北大核心
2025年第1期260-268,共9页
通过比较、优化样品前处理方法,建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)高通量、快速测定鸡粪中磺胺类、大环内酯类、喹诺酮类、四环素类等4类81种抗菌药物残留检测方法。样品经EDTA-Mcllvaine与10%乙腈/乙酸(5∶15,V/V)混合...
通过比较、优化样品前处理方法,建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)高通量、快速测定鸡粪中磺胺类、大环内酯类、喹诺酮类、四环素类等4类81种抗菌药物残留检测方法。样品经EDTA-Mcllvaine与10%乙腈/乙酸(5∶15,V/V)混合溶液提取,HLB固相萃取柱净化过柱后,在UPLC-MS/MS多反应监测模式下进行定性及定量分析。加标回收试验结果显示,鸡粪中81种药物在1.0~100.0μg·kg^(-1)范围内线性关系良好(R^(2)>0.99),检出限为1.0~2.5μg·kg^(-1),待测药物的回收率为60.24%~118.70%。该方法简单可靠,提取效果好,适用于鸡粪中多类抗菌药物残留的大批样品筛查和确证。
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关键词
鸡粪
超高效液相色谱-串联质谱法
抗菌药物
残留
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职称材料
牛多杀性巴氏杆菌OmpA抗原间接ELISA方法的建立
2
作者
王润清
孙航
+4 位作者
孙雨
李歌
李琦
侯晓林
阚威
《中国动物检疫》
2025年第2期87-94,共8页
为建立一种快速检测牛多杀性巴氏杆菌的方法,分析多杀性巴氏杆菌OmpA序列信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接至pET32a载体上,构建相应的重组质粒pET32a-OmpA;将重组质粒转化...
为建立一种快速检测牛多杀性巴氏杆菌的方法,分析多杀性巴氏杆菌OmpA序列信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接至pET32a载体上,构建相应的重组质粒pET32a-OmpA;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞株中,经扩大培养成功诱导表达出了纯度较高的包涵体OmpA蛋白,将OmpA重组蛋白作为诊断抗原,经反应条件优化建立了间接ELISA抗体检测方法。经试验验证,该方法对其他相关的牛类病原无交叉反应,阳性血清稀释度为1:256时仍呈阳性,组内与组间变异系数均低于10%。结果表明,该方法特异性与敏感性较好,且具有良好的重复性与稳定性。本研究为进一步开发成熟的牛多杀性巴氏杆菌抗体检测试剂盒奠定基础。
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关键词
牛多杀性巴氏杆菌
OmpA蛋白
原核表达
蛋白纯化
ELISA
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职称材料
题名
UPLC-MS/MS高通量测定鸡粪中81种抗菌药物残留方法的建立
1
作者
刘田
赵芮敏
李木子
李泽慧
孙瑞
杨智和
孙晓亮
赵思俊
宋翠平
霍乃蕊
机构
山西农业大学
动物
医学
学院
中国
动物
卫生与流行病学中心
北京农学院动物医学学院
天津
农学院
动物
医学
学院
出处
《农业环境科学学报》
北大核心
2025年第1期260-268,共9页
基金
中国动物卫生与流行病学中心创新基金项目(2021221200)。
文摘
通过比较、优化样品前处理方法,建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)高通量、快速测定鸡粪中磺胺类、大环内酯类、喹诺酮类、四环素类等4类81种抗菌药物残留检测方法。样品经EDTA-Mcllvaine与10%乙腈/乙酸(5∶15,V/V)混合溶液提取,HLB固相萃取柱净化过柱后,在UPLC-MS/MS多反应监测模式下进行定性及定量分析。加标回收试验结果显示,鸡粪中81种药物在1.0~100.0μg·kg^(-1)范围内线性关系良好(R^(2)>0.99),检出限为1.0~2.5μg·kg^(-1),待测药物的回收率为60.24%~118.70%。该方法简单可靠,提取效果好,适用于鸡粪中多类抗菌药物残留的大批样品筛查和确证。
关键词
鸡粪
超高效液相色谱-串联质谱法
抗菌药物
残留
Keywords
chicken manure
ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry
antimicrobial drug
residue
分类号
O657.63 [理学—分析化学]
X839.2 [环境科学与工程—环境工程]
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职称材料
题名
牛多杀性巴氏杆菌OmpA抗原间接ELISA方法的建立
2
作者
王润清
孙航
孙雨
李歌
李琦
侯晓林
阚威
机构
中国
动物
疫病预防控制中心
北京农学院
动物
医
学院
甘肃农业大学
动物
医
学院
青海省
动物
疫病预防控制中心
出处
《中国动物检疫》
2025年第2期87-94,共8页
基金
国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS39)。
文摘
为建立一种快速检测牛多杀性巴氏杆菌的方法,分析多杀性巴氏杆菌OmpA序列信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接至pET32a载体上,构建相应的重组质粒pET32a-OmpA;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞株中,经扩大培养成功诱导表达出了纯度较高的包涵体OmpA蛋白,将OmpA重组蛋白作为诊断抗原,经反应条件优化建立了间接ELISA抗体检测方法。经试验验证,该方法对其他相关的牛类病原无交叉反应,阳性血清稀释度为1:256时仍呈阳性,组内与组间变异系数均低于10%。结果表明,该方法特异性与敏感性较好,且具有良好的重复性与稳定性。本研究为进一步开发成熟的牛多杀性巴氏杆菌抗体检测试剂盒奠定基础。
关键词
牛多杀性巴氏杆菌
OmpA蛋白
原核表达
蛋白纯化
ELISA
Keywords
Pasteurella multocida bovis
OmpA protein
prokaryotic expression
protein purification
ELISA
分类号
S851.3 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
UPLC-MS/MS高通量测定鸡粪中81种抗菌药物残留方法的建立
刘田
赵芮敏
李木子
李泽慧
孙瑞
杨智和
孙晓亮
赵思俊
宋翠平
霍乃蕊
《农业环境科学学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
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职称材料
2
牛多杀性巴氏杆菌OmpA抗原间接ELISA方法的建立
王润清
孙航
孙雨
李歌
李琦
侯晓林
阚威
《中国动物检疫》
2025
0
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职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
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