罗汉果提取物诱导肺癌细胞A549凋亡的研究 被引量：18

1

作者 刘灿 蔡天宇 +3 位作者 赵晓萌 马兰青 窦德泉 孙媛霞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1310-1314,共5页

目的探讨罗汉果醇诱导肺癌细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法通过分离、纯化得到罗汉果醇单体,以肺癌细胞A549为对象,采用MTT法检测罗汉果醇对肺癌细胞的抑制作用;利用荧光染色、流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期;以蛋白印迹法检... 目的探讨罗汉果醇诱导肺癌细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法通过分离、纯化得到罗汉果醇单体,以肺癌细胞A549为对象,采用MTT法检测罗汉果醇对肺癌细胞的抑制作用;利用荧光染色、流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期;以蛋白印迹法检测罗汉果醇对p21、Bcl-2蛋白表达的影响。结果罗汉果醇能抑制肺癌细胞的增殖,具有促进细胞凋亡、阻滞细胞周期的作用;蛋白印迹检测表明,罗汉果醇可以促进p21表达升高,Bcl-2表达下降。结论罗汉果醇通过调节p21、Bcl-2的表达来诱导细胞凋亡和周期阻滞,从而促进肺癌细胞A549的凋亡。 展开更多

关键词 罗汉果 肺癌细胞A549 药食两用 细胞凋亡 P21 蛋白免疫杂交

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农杆菌介导虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣的研究 被引量：6

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作者 罗在柒 郭辉力 +3 位作者 杨亚东 杨明峰 马兰青 王有年 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第10期101-109,共9页

【目的】白藜芦醇作为植物次生代谢产物不但能提高果树抗真菌能力,还能改善果品质量。遗传转化芪合酶基因能够增强植物的抗真菌能力,虎杖芪合酶基因具有较高的催化合成白藜芦醇的效率,研究虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣,以期获得具有抗... 【目的】白藜芦醇作为植物次生代谢产物不但能提高果树抗真菌能力,还能改善果品质量。遗传转化芪合酶基因能够增强植物的抗真菌能力,虎杖芪合酶基因具有较高的催化合成白藜芦醇的效率,研究虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣,以期获得具有抗真菌能力且改善枣果实品质的遗传转化新材料。【方法】通过组织培养再生体系与目的基因转化技术,优化获得茎诱导丛生芽,构建植物表达载体,优化遗传转化体系,采用农杆菌介导法将虎杖白藜芦醇生物合成关键酶基因Pc PKS5遗传转化壶瓶枣。【结果】优化壶瓶枣茎段诱导得到高分化率的丛生芽遗传转化体系,再生增植率为11.0,为壶瓶枣成功实现遗传转化奠定了基础。将壶瓶枣0.8-1.0 cm含茎尖和茎段的外植体材料置于农杆菌浓度OD600=0.6时侵染菌液中浸泡15.0 min,然后置于培养基上避光共培养3天;随后转入含Cb 300 mg·L^-1,AS 60 mg·L^-1的丛生芽诱导分化培养基中培养5-6周。将分化丛生芽转接至含4.0 mg·L^-1Basta的培养基中,获遗传转化植株173株;经Basta筛选,GUS显色、gDNA PCR、RT-PCR等检测证实,成功获得3个阳性转基因株系,荧光实时定量检测表明株系2表达效率较高。经植物化学成分分析,转化植株中目的基因得以表达,生成了目标产物白藜芦醇,其含量为0.45μg·g^-1（鲜质量）。【结论】本研究成功实现虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣,获得壶瓶枣遗传转化新材料。且Pc PKS5在枣树中异源表达,转基因材料中能够代谢合成白藜芦醇,有望提高转Pc PKS5基因壶瓶枣抗枣树病原真菌病能力。白藜芦醇是否在壶瓶枣遗传转化材料果实中积累,及转基因植株果实品质的影响仍需深入研究。 展开更多

关键词 遗传转化 虎杖芪合酶基因 枣树 农杆菌介导法 白藜芦醇

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苯醚甲环唑降解菌BMJHZ-01的分离鉴定及降解影响因素 被引量：3

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作者 蔡慧敏 曹之富 +3 位作者 赵建庄 魏朝俊 袁烁 梁丹 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期590-595,共6页

从江苏某农药厂污水区污泥中分离筛选出一株对苯醚甲环唑降解能力较强的细菌BM JHZ-01,对其进行形态学观察、生理生化鉴定、16S r DNA序列同源性比对及系统发育树分析,初步确定其为硝基还原假单胞菌Pseudomonas nitroreducens。通过研... 从江苏某农药厂污水区污泥中分离筛选出一株对苯醚甲环唑降解能力较强的细菌BM JHZ-01,对其进行形态学观察、生理生化鉴定、16S r DNA序列同源性比对及系统发育树分析,初步确定其为硝基还原假单胞菌Pseudomonas nitroreducens。通过研究该菌株降解苯醚甲环唑的影响因素,得出其最适宜降解条件为:培养箱转速200 r/min,培养温度30℃,初始p H值为7.0。在此培养条件下,采用高效液相色谱法检测,发现菌株BMJHZ-01在5 d内对180 mg/L苯醚甲环唑的降解率可达90%以上。BMJHZ-01可以以最高质量浓度为180 mg/L的苯醚甲环唑为惟一碳源进行生长繁殖并将其降解,对不良环境的高度适应性使其在环境治理中具有明显优势。 展开更多

关键词 苯醚甲环唑 降解菌 硝基还原假单胞菌 微生物降解

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生氰糖苷类物质的结构和代谢途径研究进展 被引量：8

4

作者 柳春梅 吕鹤书 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期294-299,共6页

生氰糖苷类成分作为多种植物的防御物质被广泛研究。随着对其研究的深入,发现在细菌、真菌、节肢动物和鳞翅目昆虫体内也存在该类物质,生氰糖苷具有防御和性信息素等作用。本文对该类物质的结构、合成和降解途径等方面进行了综述,为新... 生氰糖苷类成分作为多种植物的防御物质被广泛研究。随着对其研究的深入,发现在细菌、真菌、节肢动物和鳞翅目昆虫体内也存在该类物质,生氰糖苷具有防御和性信息素等作用。本文对该类物质的结构、合成和降解途径等方面进行了综述,为新农药先导化合物的发现提供理论依据。 展开更多

关键词 生氰糖苷 化学结构 代谢途径

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枣果皮组织结构与裂果关系研究 被引量：8

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作者 李彦玲 杨爱珍 +3 位作者 孟泽 王晓琴 师光禄 王有年 《北京农学院学报》 2016年第2期34-41,共8页

【目的】为寻求枣裂果防控、裂果机理和抗裂良种选育提供理论依据和参考。【方法】从花后15 d开始采样,每10 d采样1次,调查易裂品种‘京枣39’（Ziziphus jujube Mill.‘Jing39’）和抗裂品种‘郎家园枣’（Ziziphus jujube Mill.‘Lang... 【目的】为寻求枣裂果防控、裂果机理和抗裂良种选育提供理论依据和参考。【方法】从花后15 d开始采样,每10 d采样1次,调查易裂品种‘京枣39’（Ziziphus jujube Mill.‘Jing39’）和抗裂品种‘郎家园枣’（Ziziphus jujube Mill.‘Langjiayuanzao’）生长发育规律与裂果的关系,在果园中和室内统计裂果率,制作石蜡切片,观测正常果和裂果的果皮结构和细胞形态特征以及在不同生长发育时期的组织结构变化。【结果】（1）‘京枣39’生长比较迅速,细胞膨大期长,单果重在每个时期均大于‘郎家园枣’。‘郎家园枣’的横纵经均小于‘京枣39’。（2）‘京枣39’正常果的表皮层厚度和角质层厚度均显著大于裂果,同时显著大于‘郎家园枣’正常果和裂果,‘京枣39’表皮厚度和角质层厚度裂果/正常果的比值均分别小于‘郎家园枣’,正常果的表皮细胞和角质层细胞比裂果的排列紧密,正常果的表皮细胞和角质层细胞大多呈方形、长方形或长柱形,裂果的大多呈长圆形、椭圆形或卵圆形。（3）花后40~70 d‘京枣39’表皮层厚度和角质层厚度变化较大,细胞体积增长比较迅速,花后40 d之后,‘京枣39’果肉细胞中空腔大小和数量多于‘郎家园枣’。【结论】‘京枣39’比‘郎家园枣’膨大期长、细胞体积增长迅速,同一品种,表皮厚度是主要导致裂果的因素,与角质层无显著规律,‘京枣39’正常果的表皮层和角质层比裂果的厚,当降到一定值时将变为裂果,裂果表皮厚度/正常果表皮厚度和裂果角质层厚度/正常果角质层厚度的比值可以作为衡量枣果裂果的重要依据,其比值小将易裂果,果实发育后期果肉空腔数量越多、体积越大越容易发生裂果。 展开更多

关键词 枣 裂果 生长时期 组织结构 解剖结构

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抗猪圆环病毒2型病毒样颗粒单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：1

6

作者 侯强 侯绍华 +5 位作者 贾红 姜一曈 鑫婷 李明 陈青 朱鸿飞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期325-329,共5页

为制备能够特异性识别猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)的单克隆抗体(MAb),本研究利用杆状病毒表达系统分别制备了具有VLP结构的核衣壳蛋白(Cap)和去掉核定位信号肽的tCap蛋白,以前者为免疫原,后者为筛选抗原制备了一株杂交瘤细胞(1F... 为制备能够特异性识别猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)的单克隆抗体(MAb),本研究利用杆状病毒表达系统分别制备了具有VLP结构的核衣壳蛋白(Cap)和去掉核定位信号肽的tCap蛋白,以前者为免疫原,后者为筛选抗原制备了一株杂交瘤细胞(1F6),通过western blot、间接免疫荧光和透射电镜对其生物学特性进行鉴定。结果显示,1F6 MAb与PCV2 VLP具有良好的特异性反应,同时能够特异性识别天然PCV2和线性结构的Cap蛋白。本研究制备的MAb为PCV2抗原表位的鉴定和PCV2 VLP定量方法的建立提供了工具。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 单克隆抗体 核衣壳蛋白 病毒样颗粒

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草莓根腐病菌拮抗细菌GF-16的发酵条件研究 被引量：2

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作者 卜春亚 高菲 +1 位作者 靳永胜 师光禄 《农学学报》 2013年第1期20-25,共6页

本研究拟确定草莓根腐病菌拮抗细菌GF-16的最适发酵培养基配方和最佳发酵条件。本研究采用了单因素试验和正交试验的方法,进行草莓根腐病菌拮抗细菌GF-16的最适发酵培养基配方和最佳发酵条件的确定。研究表明:发酵液中的C、N源组合,C、... 本研究拟确定草莓根腐病菌拮抗细菌GF-16的最适发酵培养基配方和最佳发酵条件。本研究采用了单因素试验和正交试验的方法,进行草莓根腐病菌拮抗细菌GF-16的最适发酵培养基配方和最佳发酵条件的确定。研究表明:发酵液中的C、N源组合,C、N源及NaCl的含量都对拮抗细菌GF-16的抑菌活性有不同的影响,用1%的葡萄糖、1.5%的黄豆饼粉及0.5%的NaCl配制的发酵液对拮抗细菌GF-16的抑菌效果相对较好。在研究的几个发酵条件中,拮抗细菌GF-16的最适条件为发酵时间36h,pH7,接种量4%,摇瓶装液量比1.1/5,180r/min,28℃恒温培养。本研究结果表明拮抗细菌GF-16的最适培养基为1%葡萄糖、1.5%黄豆饼粉及0.5%NaCl,最适条件为发酵时间36h,pH7,接种量4%,摇瓶装液量比1.1/5,180r/min,28℃恒温培养。 展开更多

关键词 草莓根腐病菌 拮抗细菌GF-16 发酵条件

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棉铃虫氨肽酶N基因片段克隆、表达和内源蛋白检测 被引量：1

8

作者 刘京国 赵晓萌 +3 位作者 杨爱珍 于同泉 路苹 师光禄 《北京农学院学报》 2010年第1期20-22,26,共4页

氨肽酶N(APN)是苏云金芽孢杆菌杀虫毒素Cry在昆虫中肠中的一个重要受体。研究氨肽酶N在昆虫中肠中的分布特征对于阐明Cry毒素的杀虫机理和昆虫对Cry毒素的抗性机理具有重要的意义。通过RT-PCR的方法从棉铃虫中肠上皮细胞中克隆得到氨肽... 氨肽酶N(APN)是苏云金芽孢杆菌杀虫毒素Cry在昆虫中肠中的一个重要受体。研究氨肽酶N在昆虫中肠中的分布特征对于阐明Cry毒素的杀虫机理和昆虫对Cry毒素的抗性机理具有重要的意义。通过RT-PCR的方法从棉铃虫中肠上皮细胞中克隆得到氨肽酶N的基因片段APN1551,并诱导表达纯化得到其重组蛋白APN517。以此蛋白为抗原,制备其抗血清。用该抗血清能检测到棉铃虫中肠上皮细胞中的APN蛋白。为研究Cry毒素的作用机理奠定基础。 展开更多

关键词 氨肽酶N 棉铃虫 抗血清

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草莓枯萎病菌的分离鉴定及防治药剂筛选 被引量：31

9

作者 伊海静 陈艳 +3 位作者 刘正坪 王有年 杨晓 刘俊 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期626-635,共10页

草莓枯萎病是目前危害北京草莓产业的主要病害,为筛选出安全有效的杀菌剂,采用组织分离法从北京昌平地区采集的草莓枯萎病株中分离到引起草莓枯萎病的病原菌。经形态学和分子生物学手段鉴定该病原菌为尖孢镰刀菌草莓专化型(Fusarium oxy... 草莓枯萎病是目前危害北京草莓产业的主要病害,为筛选出安全有效的杀菌剂,采用组织分离法从北京昌平地区采集的草莓枯萎病株中分离到引起草莓枯萎病的病原菌。经形态学和分子生物学手段鉴定该病原菌为尖孢镰刀菌草莓专化型(Fusarium oxysporum Schlecht f.sp.fragariae Winks et Williams)。采用菌丝生长速率法对14种杀菌剂进行筛选,其中,206.7g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、φ=25%腈菌唑、w=60%嘧菌酯、w=70%代森锰锌、w=75%百菌清、w=50%异菌脲7种杀菌剂对草莓枯萎病具有显著的抑菌效果,其EC50值分别为0.003、0.63、0.73、5.91、8.90、78.54、229.09mg/L;另外,206.7g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、w=70%代森锰锌和w=75%百菌清4种杀菌剂的药效可持续96h以上,其他3种药剂处理48h后对草莓枯萎病的抑制效果显著下降。因此,206.7g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、w=70%代森锰锌和w=75%百菌清是草莓枯萎病防治的优先选择。 展开更多

关键词 草莓枯萎病 尖孢镰刀菌 EC50 杀菌剂防效

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非洲猪瘟疫苗研究进展 被引量：40

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作者 王西西 陈青 +2 位作者 吴映彤 郭晓宇 李金祥 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第2期89-94,共6页

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、热性和高度接触性传染病,可感染各品种及各年龄段家猪以及欧洲野猪,死亡率高达100%。近年来,非洲猪瘟在北高加索地区、俄罗斯境内多个州以及东欧多国扩散、流行,在全球分布呈扩大趋势并对我国... 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、热性和高度接触性传染病,可感染各品种及各年龄段家猪以及欧洲野猪,死亡率高达100%。近年来,非洲猪瘟在北高加索地区、俄罗斯境内多个州以及东欧多国扩散、流行,在全球分布呈扩大趋势并对我国养猪业构成潜在巨大威胁。由于非洲猪瘟病毒拥有庞大的基因组结构和复杂的免疫逃逸机制,使得该病目前仍未有有效疫苗问世。本文针对非洲猪瘟灭活疫苗、减毒活疫苗、病毒活载体疫苗、核酸疫苗和基因工程亚单位疫苗等研究进展进行概述,以期为该病疫苗研发提供参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 免疫逃逸 疫苗

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餐厨垃圾转化为生物肥料的探索研究 被引量：5

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作者 王娅亚 薛飞燕 +2 位作者 王有年 师光禄 陈必强 《农学学报》 2013年第1期36-40,78,共6页

为了解决餐厨垃圾回收处理难等问题,探索餐厨垃圾资源化利用,以学校食堂餐厨垃圾作为研究对象,经过固液粗分后,重点研究了废液发酵培养粘红酵母获得菌体的可行性,最后以大豆为试验材料,分别研究了固体垃圾和发酵菌体作为生物肥料的肥效... 为了解决餐厨垃圾回收处理难等问题,探索餐厨垃圾资源化利用,以学校食堂餐厨垃圾作为研究对象,经过固液粗分后,重点研究了废液发酵培养粘红酵母获得菌体的可行性,最后以大豆为试验材料,分别研究了固体垃圾和发酵菌体作为生物肥料的肥效。试验结果表明,粘红酵母可以利用餐饮废水,最佳发酵时间24h时获得菌体干重12g/L;粘红酵母最适宜生长pH为5.5;固体垃圾和发酵菌体对幼苗期大豆豆苗的生长有一定的促进作用,按照每公顷的最佳施用量为450kg。 展开更多

关键词 餐厨垃圾 粘红酵母 生物肥料

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QuEChERS-气相色谱法同时测定水果中多种农药残留量 被引量：7

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作者 聂鲲 赵建庄 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1174-1183,共10页

利用气相色谱（GC-ECD）建立了水果中53种农药残留同时测定的方法。样品中农药残留在超声振荡条件下用乙腈提取,经N-丙基乙二胺（PSA）、石墨化炭黑（Carb）净化后检测,方法的检出限为0.001~0.005 mg/kg,回收率为81.4%~104.3%,相对标准... 利用气相色谱（GC-ECD）建立了水果中53种农药残留同时测定的方法。样品中农药残留在超声振荡条件下用乙腈提取,经N-丙基乙二胺（PSA）、石墨化炭黑（Carb）净化后检测,方法的检出限为0.001~0.005 mg/kg,回收率为81.4%~104.3%,相对标准偏差为1.3%~5.1%。该方法的灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留测定的技术要求。 展开更多

关键词 水果 农药 气相色谱仪-配电子捕获检测器

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气相色谱-电子捕获检测器同时检测蔬菜中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯类农药 被引量：5

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作者 聂鲲 赵建庄 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第1期76-82,共7页

通过采用改进Qu ECh ERS法提取净化、气相色谱-电子捕获检测器(GC-ECD)检测,建立蔬菜中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯类共53种农药残留同时测定的方法,以提高农残检测效率和准确度。样品用乙腈进行超声辅助提取,提取液经N-丙基乙二胺(PSA... 通过采用改进Qu ECh ERS法提取净化、气相色谱-电子捕获检测器(GC-ECD)检测,建立蔬菜中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯类共53种农药残留同时测定的方法,以提高农残检测效率和准确度。样品用乙腈进行超声辅助提取,提取液经N-丙基乙二胺(PSA)和石墨化炭黑(Carb)净化后,采用GC-ECD进行分析测定,外标法定量。结果显示,53种农药的检出限为0.001~0.005mg/kg,回收率为85.1%~102.6%,相对标准偏差为0.9%~4.5%。该方法的灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留测定的技术要求,同传统方法相比,其具有节能环保、操作简单、节约成本、省时高效的特点。 展开更多

关键词 蔬菜 农药 同时测定 气相色谱-电子捕获检测器

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