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PCR-DGGE方法分析内蒙古不同地区青贮玉米中乳酸菌群多样性 被引量:6
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作者 韩吉雨 侯先志 +4 位作者 杨凯 赵子夫 郭天龙 王丽 王海荣 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期974-981,共8页
本文旨在研究内蒙古不同地区青贮玉米中乳酸菌菌群结构的变化。试验采用氯化苄方法提取青贮玉米中微生物基因组DNA,以P2f和P3r为引物,对扩增的目的片段,利用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)法研究不同地区青贮玉米中乳酸菌菌群结构。结果表... 本文旨在研究内蒙古不同地区青贮玉米中乳酸菌菌群结构的变化。试验采用氯化苄方法提取青贮玉米中微生物基因组DNA,以P2f和P3r为引物,对扩增的目的片段,利用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)法研究不同地区青贮玉米中乳酸菌菌群结构。结果表明:3个地区9个牧场的青贮玉米中乳酸菌DGGE图谱相似性较高,大多数序列代表乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)类细菌,并以?-Lactobacillus类最多;窖藏半年以上的青贮玉米中仍能发现Lactococcus、Weissella、Leuconostoc3个球菌属菌存在。另外,10号条带与?-Acetobacter相似性达94%,4号条带与?-Lactobacillus相似性达93%,但仍不能鉴定到属的水平,这2株菌属于未培养的或者说是未经测序的菌株。 展开更多
关键词 变性梯度凝胶电泳 青贮玉米 不同地区 多样性
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PCR-DGGE方法分析玉米及苜蓿青贮动态发酵体系中菌群多样性 被引量:9
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作者 韩吉雨 王海荣 +3 位作者 侯先志 杨凯 赵子夫 郭天龙 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第19期8888-8892,共5页
[目的]探讨玉米青贮和苜蓿青贮动态发酵过程。[方法]以玉米和苜蓿为青贮原料,利用氯化苄方法对青贮中微生物基因组DNA进行提取,以P2f和P3r为引物扩增目的片段并利用PCR—DGGE方法对玉米青贮及苜蓿青贮进行动态发酵多样性研究。[结果]... [目的]探讨玉米青贮和苜蓿青贮动态发酵过程。[方法]以玉米和苜蓿为青贮原料,利用氯化苄方法对青贮中微生物基因组DNA进行提取,以P2f和P3r为引物扩增目的片段并利用PCR—DGGE方法对玉米青贮及苜蓿青贮进行动态发酵多样性研究。[结果]玉米青贮的pH值在发酵过程中维持在4.0~4.5,而苜蓿青贮则维持在5.5—6.0。PCR-DGGE分析显示2种物料青贮在0和1d、3和7d、20和60d相似性均很高,并且它们具有基本相似的谱带类型,其中条带1、3、13、14、17、21、22为所有样品共有,只是亮度上有差异。DGGE研究结果表明大多数序列代表乳酸菌(LAB)类细菌,并以Lactobacillus类最多;其次为Lactococcus和Weissella。[结论]该研究为青贮添加剂的制作奠定基础。 展开更多
关键词 PCR—DGGE 玉米青贮 苜蓿青贮 多样性
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亲和素磁珠分离毛竹SSR标记方法的优化 被引量:3
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作者 苗元 李潞滨 +3 位作者 唐征 杨凯 刘贯水 朱宝成 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期51-55,共5页
在参考其它文献报道的基础上,构建毛竹SSR位点富集文库。用EcoRⅠ分别和DraⅠ、EcoRⅤ、SmaⅠ、PvuⅡ四种平端限制性内切酶对毛竹基因组DNA进行双酶切,酶切片段回收后与根据抑制性PCR原理设计的接头连接。在利用亲和素磁珠富集含有SSR... 在参考其它文献报道的基础上,构建毛竹SSR位点富集文库。用EcoRⅠ分别和DraⅠ、EcoRⅤ、SmaⅠ、PvuⅡ四种平端限制性内切酶对毛竹基因组DNA进行双酶切,酶切片段回收后与根据抑制性PCR原理设计的接头连接。在利用亲和素磁珠富集含有SSR序列的DNA片段过程中,对杂交、漂洗及洗脱步骤进行优化。通过三引物特异PCR筛选含有SSR序列的阳性克隆并结合测序结果对富集SSR文库进行评价,确定了一条简单、经济、高效分离竹类植物SSR标记的方法。 展开更多
关键词 毛竹 SSR 亲和素磁珠 富集文库 评价
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