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基于病毒诱导的基因沉默(VIGS)方法的LsRGL1基因在生菜中的功能分析
1
作者
陈丽
范双喜
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期21-26,60,共7页
为了确定LsRGL1基因对生菜抽薹的影响,以S39生菜品种为试验材料,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从S39生菜品种中克隆得到LsRGL1基因;采用病毒诱导基因沉默(VIGS)方法,利用烟草脆裂病毒(TRV)载体对目的基因进行沉默;采用表型观察、石蜡...
为了确定LsRGL1基因对生菜抽薹的影响,以S39生菜品种为试验材料,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从S39生菜品种中克隆得到LsRGL1基因;采用病毒诱导基因沉默(VIGS)方法,利用烟草脆裂病毒(TRV)载体对目的基因进行沉默;采用表型观察、石蜡切片、实时荧光定量PCR(qPCR)方法、酶联免疫吸附法(ELISA)分别研究空白对照组(无TRV载体)、阴性对照组(按质量比1∶1同时注射TRV1空载体和TRV2空载体)和试验组(按质量比1∶1同时注射TRV1空载体和TRV2-LsRGL1重组载体)中植株表型、花芽分化、LsRGL1基因的相对表达量和内源激素质量分数的变化。结果表明:病毒侵染后,试验组植株的茎长相对于空白对照组和阴性对照组的茎长明显增大,且试验组各项表型数据均大于2个对照组的表型数据,而空白对照组与阴性对照组各项表型数据之间并未出现明显差异;石蜡切片结果表明试验组植株已经开始花芽分化,相较于对照组提前进入生殖生长时期;qPCR分析结果显示,试验组中LsRGL1基因的相对表达量相较于空白组和阴性对照组的显著下调,且下调幅度均超过50%。试验组中内源激素赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)、生长素(IAA)的含量显著高于对照组的含量,而茉莉酸(JA)含量显著下降。综上可知,沉默LsRGL1基因加快了生菜的抽薹。
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关键词
生菜
表达分析
内源激素
病毒诱导的基因沉默(VIGS)
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职称材料
生菜HSF基因家族的全基因组鉴定与表达分析
2
作者
陈丽
范双喜
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期51-59,共9页
利用生菜的全基因组数据,采用生物信息学方法,从生菜中鉴定出了35个LsHSF基因,按照其在染色体上的分布顺序命名为LsHSF1,LsHSF2,…,LsHSF35,并对其理化性质、染色体定位、与拟南芥的进化关系、蛋白保守基序、组织表达水平及褪黑素处理...
利用生菜的全基因组数据,采用生物信息学方法,从生菜中鉴定出了35个LsHSF基因,按照其在染色体上的分布顺序命名为LsHSF1,LsHSF2,…,LsHSF35,并对其理化性质、染色体定位、与拟南芥的进化关系、蛋白保守基序、组织表达水平及褪黑素处理后高温条件下的表达量进行分析。亚细胞定位预测分析结果显示,除LsHSF11、LsHSF17定位在叶绿体,LsHSF34定位在液泡外,其余基因都定位在细胞核中;35个LsHSF基因不均等地分布在9条染色体上;蛋白保守基序预测分析结果显示,所有LsHSF基因都含有Motif 1与Motif 2,且存在紧密联系;系统发育树分析结果表明,HSF蛋白分为A、B和C共3组,被划分为14个主要亚家族;组织表达水平分析结果表明,HSF等基因具有特异性表达模式;高温处理能够刺激HSF基因家族成员的表达。
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关键词
生菜
LsHSF基因
全基因组
高温胁迫
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职称材料
题名
基于病毒诱导的基因沉默(VIGS)方法的LsRGL1基因在生菜中的功能分析
1
作者
陈丽
范双喜
机构
湖南省蔬菜研究所
北京农业职业学院园艺园林学院
出处
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期21-26,60,共7页
基金
国家自然科学基金项目(3177110780)。
文摘
为了确定LsRGL1基因对生菜抽薹的影响,以S39生菜品种为试验材料,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从S39生菜品种中克隆得到LsRGL1基因;采用病毒诱导基因沉默(VIGS)方法,利用烟草脆裂病毒(TRV)载体对目的基因进行沉默;采用表型观察、石蜡切片、实时荧光定量PCR(qPCR)方法、酶联免疫吸附法(ELISA)分别研究空白对照组(无TRV载体)、阴性对照组(按质量比1∶1同时注射TRV1空载体和TRV2空载体)和试验组(按质量比1∶1同时注射TRV1空载体和TRV2-LsRGL1重组载体)中植株表型、花芽分化、LsRGL1基因的相对表达量和内源激素质量分数的变化。结果表明:病毒侵染后,试验组植株的茎长相对于空白对照组和阴性对照组的茎长明显增大,且试验组各项表型数据均大于2个对照组的表型数据,而空白对照组与阴性对照组各项表型数据之间并未出现明显差异;石蜡切片结果表明试验组植株已经开始花芽分化,相较于对照组提前进入生殖生长时期;qPCR分析结果显示,试验组中LsRGL1基因的相对表达量相较于空白组和阴性对照组的显著下调,且下调幅度均超过50%。试验组中内源激素赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)、生长素(IAA)的含量显著高于对照组的含量,而茉莉酸(JA)含量显著下降。综上可知,沉默LsRGL1基因加快了生菜的抽薹。
关键词
生菜
表达分析
内源激素
病毒诱导的基因沉默(VIGS)
Keywords
lettuce
expression analysis
endogenous hormone
virus-induced gene silencing(VIGS)
分类号
S636.2 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
生菜HSF基因家族的全基因组鉴定与表达分析
2
作者
陈丽
范双喜
机构
湖南省蔬菜研究所
北京农业职业学院园艺园林学院
出处
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期51-59,共9页
基金
国家自然科学基金项目(3177110780)。
文摘
利用生菜的全基因组数据,采用生物信息学方法,从生菜中鉴定出了35个LsHSF基因,按照其在染色体上的分布顺序命名为LsHSF1,LsHSF2,…,LsHSF35,并对其理化性质、染色体定位、与拟南芥的进化关系、蛋白保守基序、组织表达水平及褪黑素处理后高温条件下的表达量进行分析。亚细胞定位预测分析结果显示,除LsHSF11、LsHSF17定位在叶绿体,LsHSF34定位在液泡外,其余基因都定位在细胞核中;35个LsHSF基因不均等地分布在9条染色体上;蛋白保守基序预测分析结果显示,所有LsHSF基因都含有Motif 1与Motif 2,且存在紧密联系;系统发育树分析结果表明,HSF蛋白分为A、B和C共3组,被划分为14个主要亚家族;组织表达水平分析结果表明,HSF等基因具有特异性表达模式;高温处理能够刺激HSF基因家族成员的表达。
关键词
生菜
LsHSF基因
全基因组
高温胁迫
Keywords
lettuce
LsHSFgene
genome-wide
high-temperature stress
分类号
S636.2 [农业科学—蔬菜学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于病毒诱导的基因沉默(VIGS)方法的LsRGL1基因在生菜中的功能分析
陈丽
范双喜
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
生菜HSF基因家族的全基因组鉴定与表达分析
陈丽
范双喜
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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