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Gateway技术构建小鼠血管生成素-1慢病毒表达载体及其病毒包装
被引量：
2
1
作者
李秋平
马新娜
+4 位作者
张小英
许靖
章晟
王春枝
封志纯
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期866-870,共5页
目的构建携带小鼠血管生成素-1(Ang-1)基因的慢病毒载体并进行慢病毒包装。方法利用Gateway技术构建携带DsRed荧光蛋白的Ang-1慢病毒载体,经PCR及基因测序鉴定后,与辅助质粒pLV/helper-SL3、pLV/helper-SL4及pLV/helper-SL5混合采用脂...
目的构建携带小鼠血管生成素-1(Ang-1)基因的慢病毒载体并进行慢病毒包装。方法利用Gateway技术构建携带DsRed荧光蛋白的Ang-1慢病毒载体,经PCR及基因测序鉴定后,与辅助质粒pLV/helper-SL3、pLV/helper-SL4及pLV/helper-SL5混合采用脂质体法制备DNA-Lipofectamine 2000复合物,并共同转染293FT细胞进行慢病毒包装,产生相应慢病毒颗粒,通过荧光表达情况来测定病毒滴度和感染效率。结果通过PCR、基因测序证实,Ang-1慢病毒表达载体PLV.Ex3d.P/puro-CMV>Ang-1>IRES/DsRed-Express2构建成功。经转染293FT细胞包装出具高效感染力的慢病毒,经测定病毒滴度为5×108TU/ml。结论成功构建Ang-1慢病毒表达载体,并包装出具高效感染力的慢病毒颗粒,为进一步研究Ang-1基因功能及基因治疗提供实验基础。
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关键词
血管生成素-1
慢病毒
载体
GATEWAY技术
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职称材料
题名
Gateway技术构建小鼠血管生成素-1慢病毒表达载体及其病毒包装
被引量：
2
1
作者
李秋平
马新娜
张小英
许靖
章晟
王春枝
封志纯
机构
北京军区总医院
(
第二军医大学
临床
医学院
)
附属
八一
儿童
医院
出处
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期866-870,共5页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(No.81000265)
国家自然科学基金项目(No.81270059)
文摘
目的构建携带小鼠血管生成素-1(Ang-1)基因的慢病毒载体并进行慢病毒包装。方法利用Gateway技术构建携带DsRed荧光蛋白的Ang-1慢病毒载体,经PCR及基因测序鉴定后,与辅助质粒pLV/helper-SL3、pLV/helper-SL4及pLV/helper-SL5混合采用脂质体法制备DNA-Lipofectamine 2000复合物,并共同转染293FT细胞进行慢病毒包装,产生相应慢病毒颗粒,通过荧光表达情况来测定病毒滴度和感染效率。结果通过PCR、基因测序证实,Ang-1慢病毒表达载体PLV.Ex3d.P/puro-CMV>Ang-1>IRES/DsRed-Express2构建成功。经转染293FT细胞包装出具高效感染力的慢病毒,经测定病毒滴度为5×108TU/ml。结论成功构建Ang-1慢病毒表达载体,并包装出具高效感染力的慢病毒颗粒,为进一步研究Ang-1基因功能及基因治疗提供实验基础。
关键词
血管生成素-1
慢病毒
载体
GATEWAY技术
Keywords
angiopoietin-1
lentiviral
vector
Gateway technology
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Gateway技术构建小鼠血管生成素-1慢病毒表达载体及其病毒包装
李秋平
马新娜
张小英
许靖
章晟
王春枝
封志纯
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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