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猪流行性腹泻病毒微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法的建立 被引量:4
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作者 曹洪志 王新杰 +6 位作者 高姗姗 孙晓明 邓飞 石艳萍 陈弟诗 陈昌英 李平顺 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期45-48,共4页
为了建立简便快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)荧光定量RT-qPCR检测方法,根据GenBank数据库公布的猪流行性腹泻病毒囊膜蛋白E基因,设计特异性引物和探针结合微芯片技术,建立微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法。该方法除对PEDV检测为阳性外,对... 为了建立简便快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)荧光定量RT-qPCR检测方法,根据GenBank数据库公布的猪流行性腹泻病毒囊膜蛋白E基因,设计特异性引物和探针结合微芯片技术,建立微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法。该方法除对PEDV检测为阳性外,对与其同源性较近的致病病毒的检测均为阴性;最低检测限为1 copies/μL,常规荧光RT-qPCR检测限为10 copies/μL。批内、批间重复性试验表明,Ct值变异系数均在2%以内,可对PEDV临床样本进行检测。建立的检测方法特异性好、敏感性高、检测时间短且重复性好,适用于临床检测。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 微芯片 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应 囊膜蛋白
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犬右侧乳区3个肿块的病理学观察
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作者 樊克锋 焦哲 +3 位作者 霍军 阴正兴 康静静 王新杰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第11期68-69,I0003,共3页
随着社会经济的发展,犬作为一种伴侣动物获得了更好的营养条件和免疫预防,平均寿命也得到了延长,因此患老年病(如肿瘤等)的机率也随之提高。犬乳腺肿瘤是兽医临床上最为常见的肿瘤之一,母犬乳腺肿瘤的发病率约占母犬全部肿瘤性疾病的5... 随着社会经济的发展,犬作为一种伴侣动物获得了更好的营养条件和免疫预防,平均寿命也得到了延长,因此患老年病(如肿瘤等)的机率也随之提高。犬乳腺肿瘤是兽医临床上最为常见的肿瘤之一,母犬乳腺肿瘤的发病率约占母犬全部肿瘤性疾病的50%,雄性犬也会发生乳腺肿瘤,但发生率较低(低于3%)[1],据报道老龄犬和未绝育犬更容易发生乳腺肿瘤[2]。犬乳腺肿瘤形态多种多样,不同个体的肿瘤之间或同一个体的不同肿瘤标本, 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 病理学观察 母犬 社会经济 免疫预防 营养条件 伴侣动物 平均寿命
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蚌毒灵散中黄芩的整体定量分析研究
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作者 樊克锋 汤法银 +2 位作者 孙素琴 周群 王新杰 《中国畜牧业》 2017年第1期55-57,共3页
目前,中兽药散剂在临床应用中仍占绝对优势(《兽药典》中85%以上的中兽药制剂仍然是散剂),其复杂多样的化学成分及作用机理仍然无法完全明晰,这给评价中兽药药理药效和质量标准制定带来了极大的困难。目前惯用方法仍然是模仿化学... 目前,中兽药散剂在临床应用中仍占绝对优势(《兽药典》中85%以上的中兽药制剂仍然是散剂),其复杂多样的化学成分及作用机理仍然无法完全明晰,这给评价中兽药药理药效和质量标准制定带来了极大的困难。目前惯用方法仍然是模仿化学药物的质量控制模式,即以已知单一或几个指标成分作为质量控制和评价标准,通过单一的定性和定量分析。 展开更多
关键词 定量分析 质量控制模式 中兽药制剂 黄芩 化学成分 评价标准 《兽药典》 临床应用
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H5和H7亚型高致病性禽流感病毒新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR方法的建立和初步应用 被引量:5
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作者 高晓艺 韩焘 +8 位作者 王乃迪 王传彬 杨林 王新杰 高姗姗 孙晓明 胡祥钰 石玉祥 刘玉良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期911-917,共7页
为建立鉴别检测H5和H7亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)双重荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据已登录的H5和H7亚型HPAIV HA基因裂解位点序列差异分别设计引物和探针,对反应体系各条件优化后首次建立了同时鉴别检测H5与H7亚型HPAIV的新型... 为建立鉴别检测H5和H7亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)双重荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据已登录的H5和H7亚型HPAIV HA基因裂解位点序列差异分别设计引物和探针,对反应体系各条件优化后首次建立了同时鉴别检测H5与H7亚型HPAIV的新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR方法。特异性试验结果显示,该方法除对H5和H7亚型HPAIV检测结果为阳性外,对其它几种常见的禽病病原检测结果均为阴性,该方法特异性强;敏感性试验结果显示,该方法检测下限为病毒浓度1×101TCID50/mL,而常规荧光定量RT-PCR检测下限为1×102TCID50/mL,敏感性高;标准曲线分析后结果显示,本研究所建立方法的扩增效率比常规荧光定量RT-PCR高,二者相关系数均为0.997;批内和批间重复性试验结果显示,Ct值的变异系数均小于2%以下,重复性高。临床样品检测结果显示,该方法所需样本微量仅为1μL^2μL;操作简便、快速,检测过程<40 min,可用于现场检测;而且利用该方法与常规荧光定量PCR方法以及测序对临床样品进行检测,三者结果完全吻合。本研究所建立的新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR检测方法为H5和H7亚型HPAIV监测和临床检测提供了可行的技术手段。 展开更多
关键词 H5亚型禽流感 H7亚型禽流感 HA裂解位点 双重荧光定量RT-PCR 微芯片
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