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miRNA-25对人食管鳞状细胞癌细胞株TE1增殖的影响 被引量：1
1
作者 张伟 周勇慧 庞一强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1979-1985,共7页
目的:探讨过表达/沉默微小RNA-25(microRNA-25,miRNA-25)对人食管鳞状细胞癌细胞株TE1增殖能力的影响及其作用机制。方法:RT-PCR检测各临床样品组织中miRNA-25的表达水平。建立miRNA-25过表达/沉默的TE1细胞株,采用CCK-8法、Brd U实验... 目的:探讨过表达/沉默微小RNA-25(microRNA-25,miRNA-25)对人食管鳞状细胞癌细胞株TE1增殖能力的影响及其作用机制。方法:RT-PCR检测各临床样品组织中miRNA-25的表达水平。建立miRNA-25过表达/沉默的TE1细胞株,采用CCK-8法、Brd U实验和流式细胞术检测TE1细胞增殖能力的变化及细胞周期状态;Western blot法和RT-PCR法检测细胞周期调控因子细胞周期蛋白E1(cyclin E1)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的蛋白与mRNA表达水平。结果:miRNA-25在食管黏膜组织中具有特异性表达并在TE1细胞中呈高表达。CCK-8法和Brd U实验结果显示过表达miRNA-25的TE1细胞的增殖能力显著增加(P<0.05),而沉默miRNA-25抑制TE1细胞的增殖;流式细胞术检测结果显示过表达miRNA-25可明显促进TE1细胞从G0/G1期向S期转换,沉默miRNA-25则抑制其转换。同时Western blot和RT-PCR实验结果显示过表达miRNA-25后,cyclin E1和CDK2的蛋白和mRNA表达水平均显著增加(P<0.05),沉默miRNA-25后则显著减少(P<0.05)。结论:miRNA-25能够促进人食管鳞状细胞癌细胞株TE1的增殖,其作用机制可能与促进细胞周期转换及上调cyclin E1和CDK2的表达水平有关,提示miRNA-25可作为治疗食管鳞状细胞癌的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 微小RNA-25 人食管鳞状细胞癌细胞株TE1 细胞增殖 细胞周期蛋白E1 细胞周期蛋白依赖性激酶2
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新型VEGF单克隆抗体与全反式维甲酸联合应用对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用 被引量：1
2
作者 唐浩轩 孟楠峰 +2 位作者 杜美玲 王伟 何涛 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期344-351,共8页
目的:探讨新型血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体、全反式维甲酸(ATRA)、新型VEGF单克隆抗体与ATRA联合用药对乳腺癌MCF-7细胞的影响,为乳腺癌的临床治疗提供新方案。方法:将MCF-7乳腺癌细胞分为对照组(不做任何处理)、VEGF抗体组(20 mg... 目的:探讨新型血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体、全反式维甲酸(ATRA)、新型VEGF单克隆抗体与ATRA联合用药对乳腺癌MCF-7细胞的影响,为乳腺癌的临床治疗提供新方案。方法:将MCF-7乳腺癌细胞分为对照组(不做任何处理)、VEGF抗体组(20 mg·L~(-1)VEGF抗体)、ATRA组(10μmol·L~(-1)ATRA)和VEGF抗体+ATRA组(20 mg·L~(-1)VEGF抗体+10μmol·L~(-1)ATRA)4组,每组5个重复。加入不同药物处理MCF-7细胞48 h后,采用ELISA法检测新型VEGF抗体浓度,MTT法检测MCF-7细胞增殖率,流式细胞术检测MCF-7细胞凋亡率,免疫印迹法检测MCF-7细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达水平。结果:ELISA法检测,新型人类重组VEGF单克隆抗体浓度为200μg·L~(-1),与阳性抗体对照比较其质量良好。MTT法检测,与对照组比较,VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞增殖率明显降低(P<0.01)。流式细胞术检测,与对照组、VEGF抗体组和ATRA组比较,VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与对照组比较,VEGF抗体组和ATRA组MCF-7细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与VEGF抗体组比较,ATRA组MCF-7细胞凋亡率升高(P<0.01)。免疫印迹法检测,与对照组、VEGF抗体组和ATRA组比较,VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞中Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05);与对照组和VEGF抗体组比较,ATRA组MCF细胞中NF-κB蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:新型VEGF单克隆抗体和ATRA可以抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、促进细胞凋亡,而二者联合用药的效果要显著优于单独用药。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 血管内皮生长因子 单克隆抗体 全反式维甲酸 细胞凋亡 细胞增殖
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miR-126-5p靶向Notch2对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响 被引量：2
3
作者 王艳良 陈涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1006-1012,共7页
目的:探讨miR-126-5p对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法:用miR-126 mimic和pcDNA Notch2(pc-Notch2)等分别或同时转染结肠癌SW480细胞,用qPCR法检测miR-126-5p和Notch2的表达;荧光素酶报告实验观察miR-1... 目的:探讨miR-126-5p对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法:用miR-126 mimic和pcDNA Notch2(pc-Notch2)等分别或同时转染结肠癌SW480细胞,用qPCR法检测miR-126-5p和Notch2的表达;荧光素酶报告实验观察miR-126-5p和Notch2的靶向关系;CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell小室法和Annexin V/PI染色流式细胞术分别检测转染细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,Western blotting检测Notch2、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、cleaved Caspase-3、MMP-2和MMP-9的表达。结果:转染miR-126 mimic能显著升高SW480细胞miR-126-5p的表达水平(P<0.01)和显著抑制SW480细胞Notch2的表达(P<0.01),同时证实Notch2上存在miR-126-5p的结合位点。上调miR-126-5p显著抑制SW480细胞增殖并降低PCNA的表达水平(P<0.01)、升高细胞凋亡率和cleaved Caspase-9的表达水平(均P<0.01),pc-Notch2显著减弱miR-126 mimic对SW480细胞增殖和凋亡的调控作用;miR-126 mimic显著降低SW480细胞划痕愈合率和穿膜细胞数(均P<0.01)、抑制MMP-2和MMP-9的表达(P<0.01);pc-Notch2显著减弱miR-126 mimic对SW480细胞迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9表达的抑制作用(均P<0.01)。结论:miR-126-5p通过抑制Notch2表达,降低结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 结肠癌 SW480细胞 miR-126-5p NOTCH2 增殖 凋亡
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