动物源菌株对7种消毒剂的抗药性分析

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作者 陆彦 钱昕蕊 +3 位作者 王海地 焦奥 万进 王聪 《北京农学院学报》 2023年第4期63-67,共5页

【目的】探明不同种类的消毒剂对动物源菌株的消毒效果。【方法】将宠物收容站、肉鸡养殖场和鹌鹑养殖场来源采集的样品进行分离培养和生化鉴定;采用微量肉汤法测定7种常用消毒剂对不同动物源菌株的最小抑菌浓度(MIC);通过PCR方法检测... 【目的】探明不同种类的消毒剂对动物源菌株的消毒效果。【方法】将宠物收容站、肉鸡养殖场和鹌鹑养殖场来源采集的样品进行分离培养和生化鉴定;采用微量肉汤法测定7种常用消毒剂对不同动物源菌株的最小抑菌浓度(MIC);通过PCR方法检测动物源菌株携带的消毒剂抗性相关基因。【结果】从动物源样品中分离鉴定得到1株Escherichia coli、Pasteurella、Staphylococcus aureus、Streptococcus和3株Salmonella。药物敏感性试验结果表明鹌鹑源Salmonella typhimurium F35对部分阳离子表面活性剂类、过氧化物类消毒剂抗药;宠物源Staphylococcus aureus和Streptococcus对多种消毒剂抗药性增加。抗药基因检测鹌鹑源Salmonella F35菌株携带mer A、int I1、qac EΔ1基因,宠物源Staphylococcus aureus检测出teh A基因,宠物源Streptococcus检测出teh A和int I1基因。【结论】鹌鹑源Salmonella typhimurium F35通过整合子以及外排泵等机制介导其对阳离子表面活性剂类消毒剂耐受;宠物源Staphylococcus aureus和Streptococcus通过外排泵机制介导对阳离子表面活性剂类、含氯消毒剂以及季铵盐类消毒剂耐受。 展开更多

关键词 沙门氏菌 消毒剂 抗药性 耐药基因

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猪源分泌性白细胞蛋白酶抑制因子的原核表达及单克隆抗体制备 被引量：1

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作者 付明智 李新新 +1 位作者 刘雪威 李焕荣 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2556-2565,共10页

【目的】制备猪源分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)及其单克隆抗体,为建立猪源SLPI检测方法及其功能研究提供试验材料。【方法】将经串联的猪源SLPI基因克隆至pET-28a(+)、pGEX-6P-1载体构建重组表达载体;利用大肠杆菌表达系统表达重... 【目的】制备猪源分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)及其单克隆抗体,为建立猪源SLPI检测方法及其功能研究提供试验材料。【方法】将经串联的猪源SLPI基因克隆至pET-28a(+)、pGEX-6P-1载体构建重组表达载体;利用大肠杆菌表达系统表达重组蛋白,采用SDS-PAGE分析重组蛋白的诱导表达情况;重组菌经超声破碎以镍柱对重组蛋白进行纯化,并进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。用纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合制备杂交瘤细胞,采用间接ELISA筛选和鉴定所制备单克隆抗体和亚类,利用Western blotting及间接免疫荧光(IFA)方法鉴定单克隆抗体的特异性。【结果】试验成功构建了pGEX-6P-1-SLPI、pET-28a-SLPI重组质粒,获得纯度较高的His-SLPI、GST-SLPI重组蛋白,分子质量分别为27和50 ku,前者为包涵体表达,后者为可溶性表达;获得3株可稳定分泌抗猪SLPI单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中,9D10为IgG3亚类,9G11、10E2为IgG2b亚类;3株单克隆抗体均可与猪肠上皮细胞内的SLPI结合,9D10在细胞核中显示较强的荧光信号,而9G11、10E2在细胞浆和细胞核中均有荧光信号。【结论】本研究成功制备了重组His-SLPI和GST-SLPI蛋白,获得3株稳定分泌抗猪源SLPI单克隆抗体,特异性良好,为进一步研究猪源SLPI特性及其在黏膜免疫中的作用搭建技术平台。 展开更多

关键词 猪 分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI) 原核表达 单克隆抗体

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对氯间甲酚及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的抑杀效果 被引量：3

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作者 何学柏 迟依明 +3 位作者 梁圣杰 李澍 杜孟泽 李秋明 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期8-14,共7页

为验证苯酚类消毒剂对鸡球虫卵囊的抑杀作用,采用不同浓度的单体和复方对氯间甲酚消毒剂与未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊共孵育,检测其对卵囊孢子化率的影响;与孢子囊共同孵育,通过子孢子脱囊率评价其对子孢子释放的干扰。孢子化卵囊经... 为验证苯酚类消毒剂对鸡球虫卵囊的抑杀作用,采用不同浓度的单体和复方对氯间甲酚消毒剂与未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊共孵育,检测其对卵囊孢子化率的影响;与孢子囊共同孵育,通过子孢子脱囊率评价其对子孢子释放的干扰。孢子化卵囊经过不同浓度消毒剂直接浸泡、粪便干扰下浸泡或喷雾处理后经口接种雏鸡,通过OPG和盲肠病变记分探究消毒剂处理对卵囊的繁殖力和鸡的致病性的影响。结果显示,2种消毒剂均可使孢子化率和子孢子脱囊率显著下降,且3种浓度的复方对氯间甲酚与3%氨水对照组(PC)的消毒效果无显著差异。直接浸泡处理试验结果显示,2%和3%复方对氯间甲酚(HTS2和HTS3)具有更为显著的抑杀效果,与PC无显著差异;粪便干扰试验结果显示,粪便作用下这两种消毒剂对球虫卵囊仍有理想的抑杀效果;喷雾处理试验结果显示,3%对氯间甲酚(HT3)对球虫卵囊抑杀效果最好,显著优于PC组(P<0.05),而2%对氯间甲酚(HT2)、HTS2和HTS3组的抑杀效果与PC组无显著差异。研究结果表明,不同浓度下这2种消毒剂对孢子化和未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊都有一定的抑杀作用,综合比较,复方对氯间甲酚消毒剂具有更强的抑杀球虫卵囊效果,具有代替氨水成为鸡球虫消毒剂的潜能。 展开更多

关键词 对氯间甲酚 柔嫩艾美耳球虫 OPG 卵囊孢子化率 子孢子脱囊率

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猪源SLPI对小鼠皮肤损伤愈合的效果

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作者 肖瑞龙 郭津彤 +2 位作者 李新新 刘雪威 李焕荣 《北京农学院学报》 2024年第1期47-51,共5页

【目的】探究猪源分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(Secretory Leukocyte Protease Inhibitor, SLPI)对皮肤创伤愈合过程中的治疗效果,以开发其潜在的使用价值。【方法】使用重组表达的猪源SLPI处理小鼠创伤,筛选蛋白的最佳作用浓度,再以此... 【目的】探究猪源分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(Secretory Leukocyte Protease Inhibitor, SLPI)对皮肤创伤愈合过程中的治疗效果,以开发其潜在的使用价值。【方法】使用重组表达的猪源SLPI处理小鼠创伤,筛选蛋白的最佳作用浓度,再以此浓度探索其抗损伤愈合情况。设置创伤组、SLPI处理组及阳性药对照组(阳性药物为百灵金方抑菌液),观察不同时间大体病理变化与显微病理变化,对创伤愈合进行临床评分,来评判SLPI对伤口恢复的影响作用。【结果】结果显示,SLPI最佳作用浓度为0.25 mg/mL。三组小鼠创伤溃疡面随时间延长均逐渐减小;与创伤组相比,从第3天开始,SLPI处理组病理打分均低于创伤组(P<0.05或P<0.01),而与阳性药组表现接近(P<0.05);在第7天,阳性药组和SLPI组均可观察到毛囊生长,但创伤组变化不明显。显微病理变化显示,SLPI组和阳性药组在第5天可观察到表皮层和皮脂腺,在第7天成纤维细胞数量明显较多,炎性细胞浸润减少。【结论】重组表达的猪源SLPI对小鼠皮肤创伤愈合有一定效果,为开发针对猪体皮肤损伤有效药物提供了试验数据。 展开更多

关键词 猪源 分泌性白细胞蛋白酶 抑制因子 皮肤创面愈合 小鼠

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泰万菌素对白羽鸡鸡毒支原体阳性率控制试验 被引量：3

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作者 陆彦 苑中奇 +4 位作者 牛志强 王雨 刘一闻 张雯露 李新国 《中国动物保健》 2018年第11期48-50,共3页

本试验采用血清学平板凝集法检测白羽肉种鸡鸡毒支原体抗体水平,通过鸡毒支原体抗体阳性率的变化,分析泰万菌素对白羽肉种鸡鸡毒支原体病的防控效果。试验设置两栋规模和日龄相同的白羽肉种鸡舍作为试验组和对照组,试验组在泰万菌素给药... 本试验采用血清学平板凝集法检测白羽肉种鸡鸡毒支原体抗体水平,通过鸡毒支原体抗体阳性率的变化,分析泰万菌素对白羽肉种鸡鸡毒支原体病的防控效果。试验设置两栋规模和日龄相同的白羽肉种鸡舍作为试验组和对照组,试验组在泰万菌素给药前1d及停药后1d随机抽取50只鸡,对照组同批次于另一鸡舍随机抽取50只鸡,由翅中静脉采全血后分离血清;采用血清平板凝集法检测样品中血清鸡毒支原体抗体水平,计算鸡毒支原体抗体阳性率。试验组给药前鸡毒支原体血清抗体阳性率为54%,给药后为34%;对照组给药前鸡毒支原体血清抗体阳性率为40%,给药后为38%。白羽肉种鸡给药泰万菌素后,能明显降低血清中鸡毒支原体抗体的阳性率,反映出泰万菌素对肉种鸡鸡毒支原体有很好的疗效。 展开更多

关键词 血清学方法 泰万菌素 鸡毒支原体

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4例犬尿石症的临床调查研究

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作者 常迪 于泓小莹 +3 位作者 吴春阳 王相国 肖龙菲 倪和民 《现代畜牧兽医》 2023年第4期44-47,共4页

犬尿石症是一种十分常见的宠物营养代谢类疾病。文章通过收集北京农学院动物医院犬尿石症临床病例4例,跟进诊断与治疗过程,探讨最佳临床处理方法,旨在为临床医生和宠主提供明确的诊疗方向。通过查阅资料,进一步讨论分析了尿石症诊疗过... 犬尿石症是一种十分常见的宠物营养代谢类疾病。文章通过收集北京农学院动物医院犬尿石症临床病例4例,跟进诊断与治疗过程,探讨最佳临床处理方法,旨在为临床医生和宠主提供明确的诊疗方向。通过查阅资料,进一步讨论分析了尿石症诊疗过程中的注意事项和预防措施。4例病例中1例手术治疗,3例保守治疗,目前均恢复良好。 展开更多

关键词 尿石症 犬 膀胱结石 尿道结石 肾脏结石

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地鳖肽对CCl4诱导的慢性肝损伤小鼠的抗氧化保护作用的研究 被引量：12

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作者 刘丹 曹硕 +4 位作者 刘阳 刘杰 王朕 张永红 沈红 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期73-80,共8页

目的探讨地鳖肽对CCl4致诱导的慢性肝损伤小鼠的抗氧化保护作用。方法小鼠随机分为正常组、模型组、地鳖肽组(50、100、200 mg/kg)及阳性药组,正常组小鼠灌服生理盐水,地鳖肽组小鼠每天灌服不同剂量地鳖肽、阳性药组小鼠每天灌胃水飞蓟... 目的探讨地鳖肽对CCl4致诱导的慢性肝损伤小鼠的抗氧化保护作用。方法小鼠随机分为正常组、模型组、地鳖肽组(50、100、200 mg/kg)及阳性药组,正常组小鼠灌服生理盐水,地鳖肽组小鼠每天灌服不同剂量地鳖肽、阳性药组小鼠每天灌胃水飞蓟素(100 mg/kg),连续6周,同时除正常组小鼠腹腔注射花生油溶液外,其余组小鼠腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10 m L/kg,每周2次连续6周,末次给药24 h后小鼠称重处死取肝组织,HE染色观察肝组织学变化,分光光度法检测肝功能酶(AST、ALT)、抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)、过氧化物(MDA),荧光定量PCR法测定炎症因子、凋亡因子、纤维化因子基因表达,ELISA测定炎症因子蛋白水平。结果显微镜观察结果正常组小鼠肝细胞未见异常,模型组小鼠肝细胞出现充血、坏死、纤维化现象、肝小叶消失,地鳖肽组小鼠肝细胞形态结构损伤,随地鳖肽剂量增加肝细胞损伤程度明显减弱,小鼠肝脾指数明显低于模型组;与模型组比较,地鳖肽组小鼠血清中AST、ALT活力显著降低、肝中MDA含量明显降低、抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)活力显著提高,炎症因子(IL-6、TNF-α、i NOS)蛋白与基因表达水平均显著降低,促凋亡因子(Bax、Caspase-3)和纤维化因子(α-SMA、TGF-β)基因水平表达也明显降低。结论地鳖肽可有效改善CCl4致小鼠慢性肝损伤,其保护效应可能与地鳖肽抗氧化作用密切相关。 展开更多

关键词 小鼠 地鳖肽 四氯化碳 抗氧化 肝纤维化

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苦豆子抗炎机制的网络药理学分析及试验验证 被引量：9

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作者 范秋雨 武建文 +3 位作者 李春晓 王金全 李焕荣 王秀敏 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2951-2965,共15页

【目的】基于网络药理学和试验验证探究苦豆子的抗炎作用机制。【方法】依托HERB数据库筛选苦豆子有效成分并利用SIB在线工具检索相应靶点,利用Cytoscape 3.6.1软件构建有效成分-靶点网络图;结合NCBI、GeneCards、OMIM等数据库检索苦豆... 【目的】基于网络药理学和试验验证探究苦豆子的抗炎作用机制。【方法】依托HERB数据库筛选苦豆子有效成分并利用SIB在线工具检索相应靶点,利用Cytoscape 3.6.1软件构建有效成分-靶点网络图;结合NCBI、GeneCards、OMIM等数据库检索苦豆子抗炎相关靶点,上传至STRING平台,构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络图;利用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析;选择PPI中度值最高的靶点与关键药效成分进行分子对接;通过体外试验检测苦豆子关键活性成分(槐定碱、苦参碱)对小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞毒性,以及对脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞后一氧化氮(NO)相对产生量的影响。【结果】苦豆子中主要含有槐定碱、苦参碱、金雀花碱、槐胺碱、槐果碱等10种有效成分,可作用于核因子κB激酶亚基β抑制因子(IKBKB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)和基质金属蛋白酶2(MMP2)等55个关键抗炎靶点。GO功能富集分析得到121个GO条目(P<0.01),其中与生物过程相关的条目61个,包括信号转导、蛋白质磷酸化、对药物的反应、炎症反应等;与分子功能相关的条目37个,包括蛋白质结合、蛋白激酶活性、酶结合等;与细胞组分相关的条目23个,包括质膜、胞浆、细胞表面、大分子复合物等;涉及KEGG信号通路104条,可通过调节磷脂酰激醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)、核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF)、趋化因子等信号通路发挥抗炎作用。分子对接结果显示,槐定碱与热休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)靶点、苦参碱与组蛋白去乙酰化酶11(HDAC11)靶点紧密结合。细胞毒性试验结果显示,0.02~1.28 mg/mL的槐定碱和苦参碱对RAW264.7细胞无毒副作用。炎症细胞模型试验结果显示,槐定碱和苦参碱可抑制由LPS刺激的RAW264.7细胞中NO的产生。【结论】苦豆子可能通过槐定碱、苦参碱等活性成分作用于IKBKB、NLRP3、MAPK14和MMP2等关键靶标,调控PI3K-Akt、MAPK、NF-κB、TNF等信号通路发挥抗炎作用,这为进一步深入阐明苦豆子的抗炎作用机制提供依据。 展开更多

关键词 苦豆子 网络药理学 抗炎活性 RAW264.7细胞 细胞毒性

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10批金银花有效成分的高效液相色谱测定 被引量：7

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作者 刘莹 赵雅芬 +4 位作者 朴美憬 李焕荣 傅业全 李佳 王建舫 《北京农学院学报》 2023年第1期109-114,共6页

【目的】用高效液相色谱建立金银花中有效成分含量的检测方法。【方法】采用梯度洗脱方法,对金银花75%甲醇提取液中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、芦丁和木犀草苷8种成分的含量进行研究。【结果】8种... 【目的】用高效液相色谱建立金银花中有效成分含量的检测方法。【方法】采用梯度洗脱方法,对金银花75%甲醇提取液中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、芦丁和木犀草苷8种成分的含量进行研究。【结果】8种成分在各自范围内线性关系均良好(R^(2)>0.9990);平均回收率为98.98%~102.84%(n=6);相对标准偏差为0.90%~4.11%。10批金银花样品均表现为绿原酸含量最高,含量为26.93~31.90 mg/g,且8种成分含量的RSD均符合标准。【结论】该方法简单稳定,适合金银花中有效成分的定量测定。 展开更多

关键词 金银花 高效液相色谱 绿原酸 异绿原酸A 木犀草苷

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牧乐星对种鸡鸡毒支原体阳性率的防控试验分析

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作者 陆彦 温炎佳 +2 位作者 牛志强 王雨 李新国 《中国动物保健》 2018年第12期37-41,共5页

本试验根据草种鸡血清中鸡毒支原体抗体水平变化和鸡毒支原体抗体阳性率变化,验证牧乐星对种鸡鸡毒支原体阳性率的影响。本试验采用ELISA方法测定草种鸡血清中鸡毒支原体的抗体,通过草种鸡血清中鸡毒支原体抗体水平变化和鸡毒支原体抗... 本试验根据草种鸡血清中鸡毒支原体抗体水平变化和鸡毒支原体抗体阳性率变化,验证牧乐星对种鸡鸡毒支原体阳性率的影响。本试验采用ELISA方法测定草种鸡血清中鸡毒支原体的抗体,通过草种鸡血清中鸡毒支原体抗体水平变化和鸡毒支原体抗体阳性率变化,评价牧乐星对草种鸡鸡毒支原体的防控效果及给药疗程,为牧乐星防治草种鸡鸡毒支原体病的给药方案提供参考。结果表明,给药后鸡毒支原体抗体水平在给药前两周在降低,后两周升高趋向于未给药的正常水平。牧乐星对草种鸡鸡毒支原体抗体阳性率在给药后两周表现出明显的抑制,从第三周起鸡毒支原体抗体阳性率逐渐增高。综上,种鸡给药牧乐星后,能明显降低血清中鸡毒支原体抗体的阳性率,反映出牧乐星对肉种鸡鸡毒支原体有很好的疗效。 展开更多

关键词 牧乐星 ELISA 鸡毒支原体 阳性率

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迷迭香精油对金葡菌感染小鼠的干预作用 被引量：14

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作者 刘倩 曹硕 +2 位作者 张昊 沈红 张永红 《北京农学院学报》 2019年第2期71-76,共6页

【目的】为了探明迷迭香精油在体内外试验中的抗菌作用。【方法】采用药敏试验检测迷迭香精油体外抑菌效果;通过金黄色葡萄球菌(金葡菌)滴鼻法建立小鼠肺炎模型,小鼠每天2次吸入迷迭香精油,每次30分连续7d,试验结束小鼠称重、采血,生化... 【目的】为了探明迷迭香精油在体内外试验中的抗菌作用。【方法】采用药敏试验检测迷迭香精油体外抑菌效果;通过金黄色葡萄球菌(金葡菌)滴鼻法建立小鼠肺炎模型,小鼠每天2次吸入迷迭香精油,每次30分连续7d,试验结束小鼠称重、采血,生化分析仪分析血常规指标,组织固定制备石蜡切片,显微镜观察组织病变,细菌定殖检测。【结果】迷迭香精油组大肠杆菌、金葡菌和链球菌抑菌圈分别为(12.4±2.4)、(12.6±1.2)、(11.5±0.5)mm,茶树精油有抑菌圈出现,薰衣草精油组无抑菌圈。模型组小鼠金葡菌感染后反应明显增强、采食减少、体重明显减轻,肺指数升高,肺细菌定殖率高,白介素-6 (IL-6)和炎性细胞数量明显增加;肉眼观察到小鼠肺脏肿胀充血、色泽暗红,肺叶上均有大小不等的出血斑,肺组织有硬肿块,肺门淋巴结肿大;镜检发现肺脏结构改变明显,肺泡间隙有炎性细胞聚集和浸润,组织实变明显,肺泡壁增厚,肺泡组织结构完整性破坏,肺泡腔内可见出血。与模型组比较,迷迭香组小鼠反应温和,采食和体重增加,肺脏指数降低和细菌定植率下降,后期IL-6和炎性细胞数量明显减少;小鼠肺组织充血减轻,肺泡间隙炎性细胞浸润减少,肺泡结构完整性逐步恢复,接近对照组小鼠。【结论】迷迭香精油体外具有良好的抗菌作用,体内缓解金葡菌引起的肺炎炎症症状。 展开更多

关键词 迷迭香精油 小鼠 金葡菌 肺炎 抗菌作用

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基于高效液相色谱法的金银花指纹图谱研究 被引量：3

12

作者 张芸苒 刘莹 +3 位作者 陈可艺 李焕荣 周双海 王建舫 《北京农学院学报》 2023年第1期115-120,共6页

【目的】旨在建立金银花高效液相色谱指纹图谱方法,并将其应用于不同批次的金银花样品检测。【方法】色谱条件:YMC-Pack ODS-A C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.6%乙酸(0~30 min,92%~72%)和乙腈(0~30 min,8%~28%),梯度洗... 【目的】旨在建立金银花高效液相色谱指纹图谱方法,并将其应用于不同批次的金银花样品检测。【方法】色谱条件:YMC-Pack ODS-A C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.6%乙酸(0~30 min,92%~72%)和乙腈(0~30 min,8%~28%),梯度洗脱,检测波长330 nm;流速1.0 mL/min;色谱柱温度25℃。方法学考察合格后,检测14批金银花样品,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统建立指纹图谱,进行相似度评价。用SPSS 20.0软件进行聚类分析和主成分分析。【结果】建立金银花的高效液相色谱指纹图谱,14批金银花样品的相似度在0.971~1.000之间,共标定出11个共有峰。通过对照品指认其中的8个,分别为异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁和木犀草苷。14批金银花共有峰峰面积占总峰面积的平均值为96.31%,RSD为0.47%。聚类分析将14批金银花样品分为4个,但主成分分析后缩减为3个,其中主成分1包括异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和2个未知成分,主成分2仅包括1个未知成分,主成分3则包括芦丁和木犀草苷。【结论】该方法快速可靠,稳定性和重复性好,可用于金银花的质量控制检测。 展开更多

关键词 金银花 高效液相色谱 指纹图谱 聚类分析 主成分

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凝结芽孢杆菌发酵条件的优化 被引量：5

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作者 侯佳佳 王天祎 +3 位作者 李志军 王超男 张永红 崔德凤 《北京农学院学报》 2018年第4期64-67,共4页

【目的】,为了获得凝结芽孢杆菌高产活菌的最优发酵条件和碳氮源。【方法】利用单因素试验的方法,对凝结芽孢杆菌培养基中碳源、氮源以及培养条件中温度、初始pH值等因素进行优化。【结果】建立最佳培养基为:无水葡萄糖20g/L,K_2HPO_4&#... 【目的】,为了获得凝结芽孢杆菌高产活菌的最优发酵条件和碳氮源。【方法】利用单因素试验的方法,对凝结芽孢杆菌培养基中碳源、氮源以及培养条件中温度、初始pH值等因素进行优化。【结果】建立最佳培养基为:无水葡萄糖20g/L,K_2HPO_4·3H_2O 1g/L,MgSO_4·7H_2O 0.2g/L,MnSO4·H2O 0.02g/L,玉米浆粉17g/L,最佳培养条件为:温度40℃,pH 5.5,摇瓶装液量150mL/500mL,摇床转速200r/min,培养时间20h。【结论】获得凝结芽孢杆菌高产活菌的最优发酵条件和碳氮源,筛选出培养凝结芽孢杆菌的优质低价原料,为下一步规模化发酵提供了依据。 展开更多

关键词 凝结芽孢杆菌 发酵培养 发酵条件 原料 优化

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7批北苍术样品药效组分的高效液相色谱测定 被引量：1

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作者 文君 赵雅芬 +2 位作者 冯莹莹 田晔林 王建舫 《北京农学院学报》 2021年第3期83-87,共5页

[目的]建立高效液相色谱同时检测北苍术中β-桉叶醇、苍术素和苍术酮的方法。[方法]采用YMC-Pack ODS-A(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-10%甲醇为流动相,梯度洗脱;检测波长200 nm;流速1.0 mL/min;柱温26℃。[结果]β-桉叶醇、... [目的]建立高效液相色谱同时检测北苍术中β-桉叶醇、苍术素和苍术酮的方法。[方法]采用YMC-Pack ODS-A(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-10%甲醇为流动相,梯度洗脱;检测波长200 nm;流速1.0 mL/min;柱温26℃。[结果]β-桉叶醇、苍术素和苍术酮进样质量浓度在0.0040~1.0000 mg/mL范围内均呈良好的线性关系,R2≥0.9992;平均回收率(n=6)分别为99.07%、100.18%和100.81%。[结论]该方法准确、简便,具有良好的重复性和稳定性,可用于北苍术药材中β-桉叶醇、苍术素和苍术酮含量的测定。 展开更多

关键词 北苍术 高效液相色谱 Β-桉叶醇 苍术素 苍术酮

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苍术高效液相色谱指纹图谱的建立 被引量：3

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作者 白悦然 赵世津 +1 位作者 傅业全 王建舫 《北京农学院学报》 2022年第1期70-76,共7页

【目的】建立苍术高效液相色谱指纹图谱。【方法】采用艾杰尔-飞诺美Venusil MP C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为水、甲醇和乙腈,梯度洗脱,检测波长270 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃。进行相似度、聚类分析和主成分分... 【目的】建立苍术高效液相色谱指纹图谱。【方法】采用艾杰尔-飞诺美Venusil MP C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为水、甲醇和乙腈,梯度洗脱,检测波长270 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃。进行相似度、聚类分析和主成分分析。【结果】建立了苍术的高效液相色谱指纹图谱,18批苍术样品的相似度在0.479~0.984之间,共标定出18个共有峰,并通过对照品指认了其中3个色谱峰。聚类分析将18批苍术样品分为6类,主成分分析后缩减为5个主成分。【结论】该方法快速可靠,稳定性和重复性好,可用于苍术的质量控制。 展开更多

关键词 苍术 高效液相色谱 指纹图谱 聚类分析 主成分分析

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药用槐花抗炎活性的网络药理学分析 被引量：10

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作者 范秋雨 武建文 李焕荣 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第9期3622-3632,共11页

【目的】基于网络药理学方法探究中药槐花主要活性成分的抗炎作用机制。【方法】依托TCMSP数据库筛选槐花有效成分及相应靶点,利用Uniprot数据库和Cytoscape 3.6.1软件构建有效成分-靶点网络图;结合NCBI、GeneCards、OMIM等数据库检索... 【目的】基于网络药理学方法探究中药槐花主要活性成分的抗炎作用机制。【方法】依托TCMSP数据库筛选槐花有效成分及相应靶点,利用Uniprot数据库和Cytoscape 3.6.1软件构建有效成分-靶点网络图;结合NCBI、GeneCards、OMIM等数据库检索槐花抗炎相关靶点,上传至STRING平台,构建蛋白互作网络图;利用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】槐花中主要有槲皮素、异鼠李素、山奈酚、β-谷甾醇、N-[6-9-吖啶基氨基己基]苯甲酰胺和槲皮素-3-甲基醚6种有效成分,可作用于IL10、NFKBIA、ICAM1、MMP2、BCL2L1、STAT1、VCAM1、IFNG、MAPK14和IL2等152个抗炎靶点。与生物过程相关的条目16个,即RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、正调控转录DNA模板、凋亡过程的负调控、基因表达的正调控、炎症反应和细胞对脂多糖的反应等;与分子功能相关的条目6个,即酶结合、转录因子结合、蛋白结合等;与细胞组分相关的条目2个,即细胞外间隙和细胞质基质;21条相关信号通路,即TNF信号通路、Toll样受体信号通路、T细胞受体信号通路、NOD样受体信号通路、癌症通路、乙型肝炎、HTLV-Ⅰ感染、甲型流感等。【结论】槐花可能通过槲皮素、异鼠李素、山奈酚、β-谷甾醇等活性成分作用于RB1、CDKN1A、IKBKB、CHUK、IL2和CXCL10等关键靶标,参与TNF信号通路、Toll样受体信号通路、T细胞受体信号通路、NOD样受体信号通路联合发挥抗炎作用,揭示了槐花多成分、多靶点、多通路的抗炎作用机制。 展开更多

关键词 网络药理学 槐花 抗炎活性 靶点 信号通路

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橙皮苷对3种霉菌毒素处理的HepG2细胞增殖和迁移的影响

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作者 晁雨竹 薛皓月 +2 位作者 邱思奇 李秋明 沈红 《动物医学进展》 北大核心 2020年第3期77-81,共5页

探讨橙皮苷对3种霉菌毒素处理的HepG2细胞增殖和迁移作用的影响。采用MTT、Griess、细胞划痕愈合试验分别检测细胞活力、细胞分泌NO、细胞迁移率。结果3种毒素对HepG2细胞增殖的影响随毒素浓度的增加呈现先促进后抑制的作用,低浓度DON、... 探讨橙皮苷对3种霉菌毒素处理的HepG2细胞增殖和迁移作用的影响。采用MTT、Griess、细胞划痕愈合试验分别检测细胞活力、细胞分泌NO、细胞迁移率。结果3种毒素对HepG2细胞增殖的影响随毒素浓度的增加呈现先促进后抑制的作用,低浓度DON、OTA(0.04μmol/L和0.08μmol/L),ZEN(<2μmol/L)显著提高HepG2细胞活力及促进增殖,高浓度霉菌毒素明显降低HepG2细胞活力及抑制细胞增殖。与霉菌毒素组比较,橙皮苷组HepG2细胞活力降低及增殖减弱,表示橙皮苷能缓解霉菌毒素对细胞的毒性。与空白对照组比较,霉菌毒素组HepG2分泌NO量显著降低,不同浓度及不同霉菌毒素对NO分泌没有明显影响;与霉菌毒素组比较,橙皮苷组不同浓度DON处理的细胞分泌NO差异不显著。低浓度DON毒素(0.08μmol/L^2μmol/L)处理HepG2细胞24、36、48 h后,DON毒素能极显著促进HepG2细胞迁移,随着霉菌毒素对细胞处理时间延长细胞迁移快,而高浓度DON毒素(10μmol/L、50μmol/L)对促细胞迁移影响显著低于低浓度DON。结果低浓度DON霉菌毒素促进HepG2细胞增殖及迁移,表明DON毒素对HepG2具有潜在的致癌性,橙皮苷能抑制HepG2细胞增殖及缓解霉菌毒素毒性的作用。 展开更多

关键词 橙皮苷 霉菌毒素 HEPG2细胞 增殖 迁移

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HPLC法检测萘普生注射液含量方法的建立

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作者 张雨桐 张永红 +5 位作者 李志军 杜继红 王建舫 李佳 崔德凤 孙志文 《北京农学院学报》 2018年第4期68-71,共4页

【目的】探明高效液相色谱法(HPLC)法测定萘普生含量的可靠性。【方法】高效液相色谱法:流动相由甲醇∶0.01mol/L KH2PO4 (75∶25,V/V)组成;流速1.0m L/min;检测波长为272nm。【结果】HPLC法的平均回收率为99.08%,相对标准偏差(RSD)0.5... 【目的】探明高效液相色谱法(HPLC)法测定萘普生含量的可靠性。【方法】高效液相色谱法:流动相由甲醇∶0.01mol/L KH2PO4 (75∶25,V/V)组成;流速1.0m L/min;检测波长为272nm。【结果】HPLC法的平均回收率为99.08%,相对标准偏差(RSD)0.5%小于标准2%,线性方程为Y=4.326 9+25.792 9 X,R=0.999 999。【结论】紫外分光光度法和高效液相色谱法测定萘普生注射液中萘普生含量的结果差异较小,建立的高效液相色谱法可以对萘普生注射液进行快速检测。 展开更多

关键词 萘普生 含量测定 高效液相色谱法 紫外分光光度法

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茶树精油对金黄色葡萄球菌抗菌作用的研究 被引量：8

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作者 曹硕 刘倩 +3 位作者 张昊 王朕 沈红 张永红 《北京农学院学报》 2019年第3期75-80,共6页

【目的】探讨茶树精油的抗菌作用。【方法】采用药敏试验检测茶树精油体外抑菌效果;通过滴鼻法建立金黄色葡萄球菌感染小鼠致肺炎模型,小鼠吸嗅30min茶树精油,每天2次连续7d,试验结束小鼠称重、采血,生化分析仪和细菌培养分别检测血常... 【目的】探讨茶树精油的抗菌作用。【方法】采用药敏试验检测茶树精油体外抑菌效果;通过滴鼻法建立金黄色葡萄球菌感染小鼠致肺炎模型,小鼠吸嗅30min茶树精油,每天2次连续7d,试验结束小鼠称重、采血,生化分析仪和细菌培养分别检测血常规和肺脏细菌定殖率,显微镜观察组织结构变化。【结果】茶树精油组抑菌圈大于10mm,茶树精油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有明显抑制作用。与对照组比较,模型组小鼠感染金黄色葡萄球菌后其反应明显增强、采食减少、体重明显减轻,肺脏指数升高,肺组织细菌定殖率升高,血液中炎性细胞数明显增加、IL-6含量升高;肉眼观察小鼠肺脏肿胀充血、肺叶上有出血斑,肺组织有硬肿块,肺门淋巴结肿大;镜检观察肺脏结构发生明显的变化。与模型组比较,茶树精油组小鼠吸嗅茶树精油后反应较温和,采食和体重稍有增加,肺脏指数降低,肺脏细菌定殖率下降,血液中IL-6和炎性细胞数明显降低;小鼠肺组织充血减轻,肺泡间隙炎性细胞浸润减少,肺泡结构完整性逐步恢复,接近对照组。【结论】茶树精油能明显缓解小鼠因金黄色葡萄球菌感染引起的炎症反应,其具有一定的抗菌作用。 展开更多

关键词 茶树精油 小鼠 金黄色葡萄球菌 肺炎 抗菌作用

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凝结芽孢杆菌对肉鸡免疫功能的影响 被引量：11

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作者 申维维 吴琼 +6 位作者 胡迪 吴显平 温海京 胡婷 范矿士 张永红 崔德凤 《北京农学院学报》 2021年第1期93-99,共7页

【目的】探讨凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)对肉鸡免疫功能的影响。【方法】取健康3日龄肉鸡随机分空白对照组(基础日粮),抗生素组(基础日粮加杆菌肽),BC低剂量组(基础日粮加凝结芽孢杆菌活菌数为2×107 CFU/mL)、BC中剂量组(... 【目的】探讨凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)对肉鸡免疫功能的影响。【方法】取健康3日龄肉鸡随机分空白对照组(基础日粮),抗生素组(基础日粮加杆菌肽),BC低剂量组(基础日粮加凝结芽孢杆菌活菌数为2×107 CFU/mL)、BC中剂量组(基础日粮加凝结芽孢杆菌活菌数为2×108 CFU/mL)、BC高剂量组(基础日粮加凝结芽孢杆菌活菌数为2×109 CFU/mL)。试验期35 d,试验结束肉鸡称量体质量、采血、剖检,分析免疫器官指数、血液T淋巴细胞转化、血液生化指标、测定IL-10和IgG含量。【结果】试验期第14天之后抗生素组与BC低剂量组、BC中剂量组、BC高剂量组肉鸡平均日增体质量显著提高,且随着试验期延长BC中剂量组肉鸡日增体质量最明显;试验期BC低剂量组、BC中剂量组、BC高剂量组肉鸡法氏囊指数均高于抗生素组,试验期14~28 d时BC中剂量组肉鸡脾脏指数均显著高于空白对照组,试验期7~28 d时BC中剂量组胸腺指数显著高于空白对照组;试验期14~35 d时BC低剂量组、BC中剂量组、BC高剂量组肉鸡血液T淋巴细胞转化率显著提高,明显高于空白对照组和抗生素组,2×108 CFU/mL凝结芽孢杆菌促进T淋巴细胞转化显著;试验期第14天时BC低剂量组、BC中剂量组、BC高剂量组肉鸡血清IL-10和IgG含量较高;试验期间BC低剂量组、BC中剂量组、BC高剂量组肉鸡生理生化指标与对照组差异不显著。【结论】凝结芽孢杆菌能增强T淋巴细胞转化,促进细胞因子分泌及免疫抗体产生,提高免疫器官指数,其中以凝结芽孢杆菌为2×108 CFU/mL时提高机体免疫功能效果最显著且优于杆菌肽。 展开更多

关键词 凝结芽孢杆菌 肉鸡 免疫功能

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