鸡传染性支气管炎病毒研究进展 被引量：20

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作者 贺会利 魏小兵 +5 位作者 欧长波 徐敏 闫艺婷 刘明成 勾肖晶 刘兴友 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第7期73-77,共5页

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)主要侵害鸡的呼吸系统和泌尿生殖系统,可以引起鸡的呼吸道症状、肾脏损害、产蛋量和蛋的品质下降。由于IBV基因组的RNA酶缺乏严密的校正功能,容易发生变异,使该病毒的基因型、血清型复杂,给该病的防控带来很... 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)主要侵害鸡的呼吸系统和泌尿生殖系统,可以引起鸡的呼吸道症状、肾脏损害、产蛋量和蛋的品质下降。由于IBV基因组的RNA酶缺乏严密的校正功能,容易发生变异,使该病毒的基因型、血清型复杂,给该病的防控带来很大的困难,从而给养殖业造成了重大经济损失。从2003年起对IBV的分子生物学方面的研究也成了热点,寻找防控此病的有效措施。论文概述了近年来在IBV的基因组、结构蛋白、分子诊断及反向遗传学技术等方面的研究进展,为IBV的研究和防控提供参考。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 基因组结构 结构蛋白 分子生物学诊断 反向遗传学技术

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环境中病毒富集与检测方法研究进展 被引量：3

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作者 魏小兵 贺会利 +3 位作者 刘明成 勾肖晶 闫艺婷 刘兴友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期270-274,共5页

随着集约化养殖的发展和养殖密度的增大,环境中病毒存在会造成疫病的流行和传播,给人和动物的健康造成严重的危害,对养殖企业造成严重的经济损失。为及时了解养殖环境中病毒情况,需加强致病性病毒的环境监测,形成猪场疾病预警监测机制... 随着集约化养殖的发展和养殖密度的增大,环境中病毒存在会造成疫病的流行和传播,给人和动物的健康造成严重的危害,对养殖企业造成严重的经济损失。为及时了解养殖环境中病毒情况,需加强致病性病毒的环境监测,形成猪场疾病预警监测机制。作者就环境中的病毒富集和检测方法加以阐述,为进一步完善环境病毒监测预警机制奠定基础。 展开更多

关键词 环境病毒 病毒富集 病毒检测

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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)ZZ2004株核衣壳蛋白基因的克隆及原核表达 被引量：1

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作者 贺会利 徐敏 +4 位作者 余娟 魏小兵 闫艺婷 勾肖晶 刘兴友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第9期15-20,共6页

本研究旨在克隆并表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的核衣壳蛋白(N)。根据IBV ZZ2004株的N基因设计1对引物,提取IBV ZZ2004株的RNA,利用RT-PCR技术扩增大小约1.23kb的片段,将其插入克隆载体pGEM-T构建pGEMT-N。将pGEM-T-N用EcoRⅠ和XhoⅠ... 本研究旨在克隆并表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的核衣壳蛋白(N)。根据IBV ZZ2004株的N基因设计1对引物,提取IBV ZZ2004株的RNA,利用RT-PCR技术扩增大小约1.23kb的片段,将其插入克隆载体pGEM-T构建pGEMT-N。将pGEM-T-N用EcoRⅠ和XhoⅠ进行双酶切,将酶切后的N基因片段克隆到表达载体pGEX-6P-1,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳,结果显示外源基因获得了表达且为可溶性蛋白;Western blotting检测结果显示N蛋白可与相应的IBV ZZ2004阳性血清发生特异性反应,结果表明N蛋白有一定的生物活性。本研究为IBV诊断试剂盒及新型IBV重组亚单位疫苗研制奠定基础。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒(IBV) 核衣壳蛋白 克隆 可溶性表达

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鸡传染性支气管病毒ZZ2004株致SPF感染鸡小肠损伤的病理与超微病变研究

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作者 朱广蕊 潘耀谦 +3 位作者 夏银可 银梅 唐海蓉 刘兴友 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期859-863,共5页

为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)ZZ2004株引起鸡生长缓慢的发病机理,本实验将100只7日龄SPF雏鸡平均分为两组。实验组经口服病毒进行感染,对照组口服生理盐水,通过临床检查、病理学检查及超微病变观察进行研究。病理解剖学检查表明,实... 为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)ZZ2004株引起鸡生长缓慢的发病机理,本实验将100只7日龄SPF雏鸡平均分为两组。实验组经口服病毒进行感染,对照组口服生理盐水,通过临床检查、病理学检查及超微病变观察进行研究。病理解剖学检查表明,实验组鸡各肠段有不同程度卡他性出血性炎性变化。病理组织学显示,小肠绒毛变短,上皮细胞脱落,固有层内炎性细胞增多。扫描电镜观察表明,肠绒毛的游离端常断裂,固有层裸露,在肠上皮细胞之间有大量杯状细胞的开口,并见大块状的分泌物渗出。透射电镜检查显示,残存的肠上皮细胞的微绒毛严重破坏;粗面内质网脱颗粒,滑面内质网明显扩张,呈囊状或泡状,在内质网中出现大量病毒颗粒;核周隙扩张,在核质中能够检出成熟的病毒颗粒。本研究结果表明:IBV ZZ2004株可以在肠上皮细胞中增殖,引起肠的吸收上皮和肠绒毛的一系列退行性病变,从而导致感染鸡代谢障碍,生长缓慢。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 SPF鸡 肠道 病理

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传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及其弱毒疫苗的研究进展 被引量：5

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作者 闫艺婷 勾肖晶 +3 位作者 刘静 黄亚明 杨激辉 刘兴友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1587-1591,共5页

传染性支气管炎是一种急性、高度接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为B类疫病,对世界养禽业的发展造成了严重威胁。目前,传染性支气管炎的主要预防措施仍然是接种疫苗,但由于传染性支气管炎病毒具有血清型众多、变异速度快且交叉... 传染性支气管炎是一种急性、高度接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为B类疫病,对世界养禽业的发展造成了严重威胁。目前,传染性支气管炎的主要预防措施仍然是接种疫苗,但由于传染性支气管炎病毒具有血清型众多、变异速度快且交叉保护性弱等特点,使得传染性支气管炎的防制一直是养禽业面临的重大难题。文章主要对传染性支气管炎病毒的分子生物学特征及其弱毒疫苗的发展历程和免疫策略等方面进行了阐述,以期为新型传染性支气管炎弱毒疫苗的开发及应用提供科学参考。 展开更多

关键词 传染性支气管炎病毒 S蛋白 M蛋白 N蛋白 弱毒疫苗

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鸡传染性支气管炎病毒弱毒株ZZ-V_(35)在鸡胚中的增殖规律 被引量：1

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作者 闫艺婷 潘耀谦 +5 位作者 王青 勾肖晶 刘静 黄亚明 杨激辉 刘兴友 《动物医学进展》 北大核心 2015年第9期42-45,共4页

为了研究鸡传染性支气管炎病毒弱毒株(IBV ZZ-V35)在鸡胚中的增殖规律,用尿囊腔接种法给11日龄的SPF鸡胚接种IBV ZZ-V35弱毒,并构建了阳性质粒,采用Taq Man探针实时定量PCR(real-time PCR)法建立了标准曲线,分别检测感染鸡胚尿囊液中36... 为了研究鸡传染性支气管炎病毒弱毒株(IBV ZZ-V35)在鸡胚中的增殖规律,用尿囊腔接种法给11日龄的SPF鸡胚接种IBV ZZ-V35弱毒,并构建了阳性质粒,采用Taq Man探针实时定量PCR(real-time PCR)法建立了标准曲线,分别检测感染鸡胚尿囊液中36、48、52、56、60、64、68、72、76、80、88、96、120、144h的病毒含量。结果显示,在鸡胚发育不同的时间点IBV ZZ-V35弱毒的拷贝数分别为1.416×106、1.791×106、2.056×106、3.027×106、3.664×106、1.854×106、1.380×106、1.109×106、7.976×105、5.408×105、2.958×105、2.512×105、4.365×104、1.130×104。研究发现,IBV ZZ-V35弱毒的拷贝数在60h达到最高值,即3.664×106。这为IBV ZZ-V35弱毒株疫苗的研究提供了新的依据。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 鸡胚尿囊液 增殖规律 实时定量PCR

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猪圆环病毒3型研究概况 被引量：8

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作者 胡会龙 魏小兵 +6 位作者 朱红晓 王秋霞 欧长波 张绣林 闫艺婷 刘兴友 吕玉琼 《动物医学进展》 北大核心 2019年第8期110-113,共4页

猪圆环病毒(PCV)是引起圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要致病病原。之前发现的猪圆环病毒只有2种血清型,分别为圆环病毒1型(PCV1)与圆环病毒2型(PCV2),其中起主要致病作用的是PCV2。2016年,美国学者Palinski等从具有皮炎肾病综合征(PDNS)... 猪圆环病毒(PCV)是引起圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要致病病原。之前发现的猪圆环病毒只有2种血清型,分别为圆环病毒1型(PCV1)与圆环病毒2型(PCV2),其中起主要致病作用的是PCV2。2016年,美国学者Palinski等从具有皮炎肾病综合征(PDNS)症状和繁殖障碍的母猪中发现了一种新型圆环病毒,并命名为圆环病毒3型(PCV3)。随后波兰、韩国、中国、瑞典等国家也检测到了PCV3的存在。目前PCV3在世界范围内多个国家均有流行。鉴于PCV2对养猪业造成的重大危害,PCV3的发现应引起人们的重视。论文主要从生物学特性、流行病学和国内外流行情况,以及PCV3的最新研究进展进行了综述,以期对PCV3的后续研究有所帮助。 展开更多

关键词 圆环病毒3型 生物学特性 流行病学 流行状况

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食品中黄曲霉毒素总量免疫分析方法研究进展 被引量：3

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作者 王亚楠 王晓斐 +3 位作者 牛琳琳 雷壮 张海棠 王自良 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期344-351,共8页

黄曲霉毒素(aflatoxins,AFs)污染食品的广泛性、严重性和危害性倍受食品行业的关注,单一黄曲霉毒素检测已不能满足行业的需求。针对食品黄曲霉毒素总量检测目前普遍采用理化分析方法,相比之下由于免疫分析技术具有高特异性、高灵敏性、... 黄曲霉毒素(aflatoxins,AFs)污染食品的广泛性、严重性和危害性倍受食品行业的关注,单一黄曲霉毒素检测已不能满足行业的需求。针对食品黄曲霉毒素总量检测目前普遍采用理化分析方法,相比之下由于免疫分析技术具有高特异性、高灵敏性、简便性等技术优势,已成为今后的发展方向和重要的研究课题。本文就食品黄曲霉毒素总量免疫分析技术的研究进展作简要综述,旨在为食品AFs总量免疫分析提供新的方法和思路。 展开更多

关键词 食品 黄曲霉毒素总量 免疫分析 研究进展

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益生菌发酵饲料对仔猪生长和免疫功能影响的研究进展 被引量：46

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作者 张秀林 魏小兵 +6 位作者 欧长波 王秋霞 刘明成 陈晴 郑卓亚 闫艺婷 刘兴友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第2期476-481,共6页

饲用抗生素作为促生长剂在饲料中被长期添加,造成了畜禽产品的药物残留、耐药菌株的出现和环境污染等问题。益生菌发酵饲料是改变当前养殖状况极具潜力的解决方案之一。益生菌发酵饲料能减少原料中抗营养因子,产生有益代谢产物和可溶性... 饲用抗生素作为促生长剂在饲料中被长期添加,造成了畜禽产品的药物残留、耐药菌株的出现和环境污染等问题。益生菌发酵饲料是改变当前养殖状况极具潜力的解决方案之一。益生菌发酵饲料能减少原料中抗营养因子,产生有益代谢产物和可溶性多肽等小分子物质,从而提高饲料营养水平,起到促生长和提高免疫功能的作用。作者就益生菌发酵饲料对仔猪生长和免疫功能方面的影响进行综述,以期为进一步研究益生菌发酵饲料对仔猪生长和免疫的影响提供一定理论依据。 展开更多

关键词 益生菌 发酵饲料 仔猪 生长性能 免疫功能

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无抗发酵饲粮对猪小肠黏膜形态和杯状细胞的影响 被引量：14

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作者 魏小兵 张秀林 +4 位作者 王秋霞 刘明成 朱红晓 胡会龙 刘兴友 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1797-1805,共9页

本试验旨在研究无抗发酵饲粮对猪小肠黏膜形态和杯状细胞的影响。试验选取遗传背景相似的初生健康乳猪120头,随机分为试验组和对照组,每组6个重复,每个重复10头猪。对照组饲喂含抗生素的基础饲粮,试验组饲喂以10%发酵饲粮代替部分无抗... 本试验旨在研究无抗发酵饲粮对猪小肠黏膜形态和杯状细胞的影响。试验选取遗传背景相似的初生健康乳猪120头,随机分为试验组和对照组,每组6个重复,每个重复10头猪。对照组饲喂含抗生素的基础饲粮,试验组饲喂以10%发酵饲粮代替部分无抗生素基础饲粮的试验饲粮,营养和能量水平调到与对照组相当。结果表明:1)试验组和对照组在小肠黏膜形态上有一定的差异。2)在44日龄时,试验组空肠绒毛高度比对照组提高7.19%(P<0.05)。在44和75日龄时,试验组回肠绒毛高度显著高于对照组(P <0.05)。3)对照组十二指肠、空肠、回肠隐窝深度均高于试验组,但差异不显著(P>0.05)。4)在44日龄时,试验组回肠绒毛高度/隐窝深度(V/C)比对照组提高17.18%(P<0.01)。5)在44日龄时,对照组十二指肠、空肠和回肠黏膜上皮间杯状细胞数量极显著高于试验组(P<0.01)。在75日龄时,对照组十二指肠黏膜上皮间杯状细胞数量极显著高于试验组(P<0.01)。综上所述,无抗发酵饲粮能改善小肠黏膜形态,增大吸收面积,从而促进小肠对营养物质的吸收。 展开更多

关键词 无抗发酵饲粮 猪 小肠黏膜 杯状细胞

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黄曲霉毒素B_1半抗原分子设计与抗原合成及抗体特性研究进展 被引量：3

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作者 王亚楠 王晓斐 +3 位作者 牛琳琳 雷壮 张海棠 王自良 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期367-376,共10页

本文综述了国内外半抗原分子设计方法、基本要求、应遵循原则、抗原合成方法等方面的研究进展,尤其是对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)半抗原分子设计与抗原合成及抗体特性进行了详尽阐述,旨在为AFB_1制备AFB_1及其他小分子半抗原高质量的抗体提... 本文综述了国内外半抗原分子设计方法、基本要求、应遵循原则、抗原合成方法等方面的研究进展,尤其是对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)半抗原分子设计与抗原合成及抗体特性进行了详尽阐述,旨在为AFB_1制备AFB_1及其他小分子半抗原高质量的抗体提供新的方法和思路。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 半抗原分子设计 抗原合成 抗体特性

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食品总铬质量浓度icELISA试剂盒的研制及初步应用 被引量：1

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作者 王亚楠 王晓斐 +2 位作者 张雅凌 张海棠 王自良 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1868-1876,共9页

为研制食品中总铬质量浓度检测间接竞争ELISA(icELISA)试剂盒(Cr-Kit)。利用蛋白质连接技术合成免疫原Cr^(3+)-iEDTA-BSA,紫外扫描(UV)和电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)进行鉴定;用Cr^(3+)-iEDTA-BSA免疫BALB/c小鼠,细胞融合技... 为研制食品中总铬质量浓度检测间接竞争ELISA(icELISA)试剂盒(Cr-Kit)。利用蛋白质连接技术合成免疫原Cr^(3+)-iEDTA-BSA,紫外扫描(UV)和电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)进行鉴定;用Cr^(3+)-iEDTA-BSA免疫BALB/c小鼠,细胞融合技术筛选抗Cr^(3+)-EDTA mAb细胞株,体内诱生腹水法制备Cr^(3+)-EDTA mAb,并对其特性进行分析;应用Cr^(3+)-EDTA mAb研制Cr-Kit,测定其性能并进行初步应用。结果表明,免疫原制备成功,Cr^(3+)-iEDTA-BSA中Cr^(3+)和BSA的质量浓度分别为140.8mg/L和5.81g/L;筛选出2A3C11、2A3D9、2A11G5共3株杂交瘤细胞株,其中2A11G5最好,经6次传代分泌抗体稳定,亲和常数(Ka)为2.69×109 L/mol,与其他重金属离子无交叉反应;Cr-Kit标准曲线的线性范围为1.0~264μg/L,检测限为1.0μg/L,IC50为8.37μg/L,河水样、大米样、面粉样和猪肉样的平均加标回收率分别为101.7%、96.47%、95.8%和84.3%,Cr-Kit与国标(GB5009.123-2014)石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS)的符合率为100%。本研究成功研制了Cr-Kit,可满足食品总铬残留的检测要求。 展开更多

关键词 CR3+ 免疫原 单克隆抗体 间接竞争ELISA试剂盒 总铬质量浓度

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