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功能性寡糖缓解犊牛腹泻的机理研究进展
1
作者 张燕敏 刘帅 +4 位作者 滕战伟 谢红兵 夏小静 贺永惠 常美楠 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期979-994,共16页
犊牛腹泻是养牛业面临的重要问题,其发病率高、死亡率高、防治成本高,甚至愈后易出现发育迟缓、生产性能低下等现象,威胁着养牛业的可持续发展。而功能性寡糖作为一类水溶性膳食纤维和具有双歧因子特性的益生元,被广泛应用于维护肠道健... 犊牛腹泻是养牛业面临的重要问题,其发病率高、死亡率高、防治成本高,甚至愈后易出现发育迟缓、生产性能低下等现象,威胁着养牛业的可持续发展。而功能性寡糖作为一类水溶性膳食纤维和具有双歧因子特性的益生元,被广泛应用于维护肠道健康。本文综述了功能性寡糖的结构、功能以及犊牛腹泻的致病因子,并重点阐述了功能性寡糖缓解犊牛腹泻的作用机理研究进展,将为促进犊牛肠道健康与功能性寡糖的合理利用提供重要参考。 展开更多
关键词 功能性寡糖 犊牛腹泻 毒力机制 肠道菌群 免疫功能
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气管上皮细胞的分离培养及其在呼吸道冠状病毒感染中作用的研究进展
2
作者 郭倩倩 汤雨晴 +4 位作者 齐振昌 李庆豪 金鑫 马俊兴 孙娟 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1836-1843,共8页
近年来呼吸道冠状病毒成为研究热点,其主要感染宿主气管的纤毛细胞和杯状细胞,使细胞间丧失紧密连接,损害呼吸系统屏障的完整性,进而引发下呼吸道感染。气管上皮细胞(trachea epithelium cells, TECs)作为机体内阻挡病原入侵的重要屏障... 近年来呼吸道冠状病毒成为研究热点,其主要感染宿主气管的纤毛细胞和杯状细胞,使细胞间丧失紧密连接,损害呼吸系统屏障的完整性,进而引发下呼吸道感染。气管上皮细胞(trachea epithelium cells, TECs)作为机体内阻挡病原入侵的重要屏障,同时也是许多病原体的靶细胞,是研究呼吸道冠状病毒的重要模型。在宿主与病毒的相互作用中,呼吸道冠状病毒优先攻击纤毛细胞,导致纤毛清除功能障碍,破坏气管上皮的防御屏障,从而加剧继发性感染。笔者概述气管上皮细胞的形态结构和生理功能,重点总结了气管上皮细胞体外分离培养的方法及其优缺点,并进一步探讨了呼吸道病原体与宿主之间的作用机制,以期为气管上皮细胞的分离、培养提供参考,同时为研究呼吸道冠状病毒的感染机制和防治策略提供支撑。 展开更多
关键词 气管上皮细胞 分离 培养 呼吸道冠状病毒
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基于肠道紧密连接的细胞旁通透性研究进展
3
作者 李明 孙娟 +4 位作者 王曼茜 李庆豪 李艺雷 马俊兴 金鑫 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5209-5217,共9页
肠上皮细胞紧密连接作为肠道屏障的重要组成部分,不仅决定肠道的细胞旁通透性,还在维护肠道内环境稳定、防止有害物质侵入等方面发挥重要作用。当紧密连接的结构或功能受损时,肠道屏障的完整性遭到破坏,导致细胞旁通透性显著增加,细菌... 肠上皮细胞紧密连接作为肠道屏障的重要组成部分,不仅决定肠道的细胞旁通透性,还在维护肠道内环境稳定、防止有害物质侵入等方面发挥重要作用。当紧密连接的结构或功能受损时,肠道屏障的完整性遭到破坏,导致细胞旁通透性显著增加,细菌、内毒素、病毒及大分子物质便可通过细胞旁路途径进入组织和器官,从而引起肠道疾病发生。但是不同分子通过肠道紧密连接的途径也不同,目前证明主要有两种细胞旁路途径,即孔隙途径和渗漏途径。这两种途径在分子大小、通透性及调控机制方面有所不同,孔隙途径主要涉及小分子物质通过,通过调节紧密连接蛋白Claudin-2的表达影响孔隙途径通透性,进而影响肠道屏障功能;而渗漏途径主要涉及大分子物质通过,Occludin、Tricellulin、ZO-1等紧密连接蛋白在这一途径中发挥关键作用,以维护肠道屏障的完整性。笔者以影响孔隙途径和渗漏途径通透性的相关蛋白为出发点,阐明这些蛋白影响孔隙途径和渗漏途径通透性的调控机制,从而防止有毒有害物质进入体内,以期为肠上皮紧密连接屏障破坏引起肠道疾病的防治提供理论依据。 展开更多
关键词 紧密连接屏障 孔隙途径 渗漏途径
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猪萨佩罗病毒研究进展 被引量：1
4
作者 韩园园 王静雯 +4 位作者 阮静娴 王栋涵 夏璐 朱河水 胡慧 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2653-2660,共8页
猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus, PSV)属于小RNA病毒科萨佩罗病毒属,是一种无包膜单股正链RNA病毒。与其他猪肠道病毒相似,PSV主要通过粪-口途径传播,也可通过接触和气溶胶传播。仔猪对该病毒易感,其可引起仔猪神经系统、呼吸系统、... 猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus, PSV)属于小RNA病毒科萨佩罗病毒属,是一种无包膜单股正链RNA病毒。与其他猪肠道病毒相似,PSV主要通过粪-口途径传播,也可通过接触和气溶胶传播。仔猪对该病毒易感,其可引起仔猪神经系统、呼吸系统、消化系统等的功能紊乱,严重时可导致猪死亡,不同毒株之间毒力与组织嗜性存在差异。临床中PSV常与猪捷申病毒、猪流行性腹泻病毒、猪库布病毒等多种病毒混合感染,使其临床症状复杂、诊断难度增加,从而加快病毒传播速度。此外,PSV存在的基因重组现象及跨种传播风险,对养猪业造成潜在威胁。目前已有核酸水平、蛋白水平、血清学等多种检测方法可用于PSV的实验室检测,已有多种细胞系可建立其体外感染模型,用于该病毒的相关研究。截至目前,PSV的研究主要集中于流行病学研究及其分离鉴定,有关PSV感染和致病机制研究较少且无商品化疫苗和有效的抗病毒药物。笔者对PSV的病原学特征、流行病学、致病机制、临床防控等方面的研究进展进行综述,以期为PSV的进一步防控研究提供理论依据。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒(PSV) 流行病学 临床症状 致病机制
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病毒感染与宿主抗感染免疫之间“博弈”——凋亡、坏死和焦亡分子机制
5
作者 陈松彪 刘飞飞 +7 位作者 尚珂 余祖华 何雷 魏颖 陈建 张春杰 程相朝 丁轲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期59-70,共12页
细胞死亡是宿主抗病毒感染免疫的重要组成部分,病毒感染可引起不同形式宿主细胞死亡,包括溶解性和非溶解性两种细胞死亡类型。这两种细胞死亡类型不仅能够消除病毒感染细胞,而且还能够利用炎症因子释放进一步促进宿主先天和适应性免疫... 细胞死亡是宿主抗病毒感染免疫的重要组成部分,病毒感染可引起不同形式宿主细胞死亡,包括溶解性和非溶解性两种细胞死亡类型。这两种细胞死亡类型不仅能够消除病毒感染细胞,而且还能够利用炎症因子释放进一步促进宿主先天和适应性免疫进程。反之,病毒也发展出不同规避机制来抑制宿主细胞死亡进而促进自身感染。本文就病毒感染与宿主抗病毒感染免疫之间的“博弈”——凋亡、坏死和焦亡调控机制研究进展进行综述,旨在为深入理解病毒的分子致病机制以及开发新的抗病毒策略提供参考资料。 展开更多
关键词 病毒 宿主 博弈 凋亡 坏死 焦亡
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cGAS稳定表达细胞系的构建及功能鉴定
6
作者 赵呈彦 任豪杰 +2 位作者 万博 魏战勇 何文瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5317-5324,共8页
天然免疫系统会在病毒入侵机体后的第一时间对其进行识别,并合成分泌I型干扰素和炎症因子等细胞因子参与宿主抗病毒免疫反应。天然免疫应答的启动主要通过机体自身表达的模式识别受体对病毒来源的病原相关分子模式的识别来实现。cGAS是... 天然免疫系统会在病毒入侵机体后的第一时间对其进行识别,并合成分泌I型干扰素和炎症因子等细胞因子参与宿主抗病毒免疫反应。天然免疫应答的启动主要通过机体自身表达的模式识别受体对病毒来源的病原相关分子模式的识别来实现。cGAS是目前最公认的胞质DNA受体,在各种类型的细胞和组织中广泛表达。猪肾细胞PK-15是猪病毒性疾病研究过程中应用十分广泛的工具细胞,然而本研究前期的转录组学数据显示,PK-15细胞中cGAS的转录水平极低,蛋白水平几乎检测不到PK-15细胞系中cGAS的表达,这极大程度的限制了PK-15细胞在猪病毒性疾病感染与免疫机制探究中的应用。本研究旨在构建一株稳定表达cGAS的PK-15细胞系。通过慢病毒包装系统,将cGAS基因整合到靶细胞基因组,经嘌呤霉素加压筛选,获得能够稳定表达cGAS的PK-15细胞系,并以猪伪狂病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)和猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)为模式病毒,对cGAS在抗DNA病毒感染过程中的作用进行了验证。结果表明,cGAS基因成功整合到宿主细胞PK-15基因组,重组细胞系PK-15-cGAS能够稳定表达cGAS蛋白;PRV和PPV感染PK-15-cGAS细胞能诱导产生更高水平的干扰素相关基因,在PK-15-cGAS细胞中PRV和PPV的复制受到明显抑制。这些结果表明,稳定表达cGAS的PK-15细胞系构建成功,它可用于猪病毒性疾病感染与免疫机制相关探究,为后续探究该类病毒免疫逃逸机制提供了良好的试验材料。 展开更多
关键词 cGAS PK-15 稳定细胞系 慢病毒包装系统
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猪NLRC5的真核表达及多克隆抗体制备
7
作者 马梦瑶 贾鑫浩 +2 位作者 刘航 钱梦薇 郑兰兰 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4550-4558,共9页
【目的】NOD样受体家族成员C5(NLRC5)在哺乳动物中广泛表达,并参与调节免疫应答和抗原递呈过程。试验通过真核表达系统表达猪NLRC5基因重组表达产物,并制备猪NLRC5多克隆抗体,为后续研究猪NLRC5的分子机制提供基础支撑。【方法】通过生... 【目的】NOD样受体家族成员C5(NLRC5)在哺乳动物中广泛表达,并参与调节免疫应答和抗原递呈过程。试验通过真核表达系统表达猪NLRC5基因重组表达产物,并制备猪NLRC5多克隆抗体,为后续研究猪NLRC5的分子机制提供基础支撑。【方法】通过生物信息学在线网站分析NLRC5蛋白的跨膜结构和信号肽。采用PCR方法扩增猪NLRC5基因,构建真核表达载体pCAGGS-HA-NLRC5,并将其转染至HEK-293F细胞。利用Western blotting检测重组蛋白表达,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。使用间接ELISA法测定多克隆抗体效价,并检测抗体特异性。采用间接免疫荧光法(IFA)和Western blotting检测NLRC5多克隆抗体与不同细胞的反应原性。以NLRC5多克隆抗体为一抗,通过Western blotting检测经siRNA处理后ST细胞中NLRC5蛋白的表达情况。【结果】生物信息学分析结果显示,NLRC5蛋白不存在跨膜结构域,含有1个信号肽;试验成功构建真核表达质粒pCAGGS-HA-NLRC5。Western blotting结果显示,成功表达NLRC5蛋白,分子质量约203 ku;制备的NLRC5多克隆抗体效价为1∶25600,且具有良好的特异性。IFA和Western blotting结果表明该抗体能够与多种细胞系发生特异反应;siRNA技术验证其能用于检测细胞中NLRC5的表达。【结论】本研究利用真核表达系统成功获得猪NLRC5重组蛋白并制备兔源多克隆抗体,为下一步探究NLRC5在先天免疫反应中对外来感染的防御作用提供试验材料。 展开更多
关键词 NLRC5 猪 真核表达 多克隆抗体
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猪传染性胃肠炎病毒感染仔猪免疫器官的组织病理学观察 被引量：4
8
作者 贺叶青 左百姣 +4 位作者 李庆豪 孙娟 金鑫 夏璐 魏战勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4872-4879,共8页
为了探讨猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)感染对仔猪免疫器官的影响,选取10只健康状况良好的5日龄仔猪,随机分为空白对照组和TGEV感染组(n=5),感染病毒5 d后剖解仔猪,采集胸腺、脾、扁桃体、腹股沟淋巴... 为了探讨猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)感染对仔猪免疫器官的影响,选取10只健康状况良好的5日龄仔猪,随机分为空白对照组和TGEV感染组(n=5),感染病毒5 d后剖解仔猪,采集胸腺、脾、扁桃体、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、髂下淋巴结、颈浅淋巴结和下颌淋巴结,苏木精-伊红染色观察各组织器官的病理学变化,免疫组织化学检测TGEV在免疫器官的分布。组织病理学观察发现,TGEV感染主要引起仔猪胸腺小叶肿大,免疫细胞减少;脾红髓增多,大量血细胞浸润,脾索和脾窦界限不清晰;扁桃体淋巴滤泡减少;淋巴窦中有大量血细胞浸润并伴有铁锈色。免疫组化结果显示,TGEV存在于多种免疫器官,脾中的病毒载量最高,其次是颈浅淋巴结和腹股沟淋巴结,胸腺中病毒分布最少。上述结果说明TGEV能够感染仔猪免疫系统并引起仔猪免疫器官的病理损伤,降低机体免疫功能。本研究为TGEV的免疫致病机制提供理论依据。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 仔猪 免疫器官 病理损伤 分布
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类器官的培养方法及应用前景 被引量：5
9
作者 王曼茜 李庆豪 +2 位作者 孙娟 胡慧 金鑫 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2688-2696,共9页
近年来随着体外建模领域研究的不断深入,发现细胞试验存在着细胞单一、难以模拟机体复杂的组织结构和正常生理、病理状态等缺点,以及动物试验的昂贵费用和相关生理伦理等问题,类器官逐渐成为科学家们关注的热点。类器官来源于机体自身... 近年来随着体外建模领域研究的不断深入,发现细胞试验存在着细胞单一、难以模拟机体复杂的组织结构和正常生理、病理状态等缺点,以及动物试验的昂贵费用和相关生理伦理等问题,类器官逐渐成为科学家们关注的热点。类器官来源于机体自身组织及干细胞,是通过体外3D培养形成的具有原始组织及器官的三维结构细胞团块,在组织结构、细胞类型和功能等方面与来源组织高度一致。这种类器官模型的构建,不仅为替代再生组织及器官的研究提供更多方法,还在组织移植和修复等工作中发挥重要作用。作者主要对促进类器官成熟的培养方法进行介绍,详细阐述了微孔阵列法、微流体法、生物反应器法和水凝胶基质法4种方法,并回顾了有关类器官培养系统的历史演变,分析了近年来学者们在类器官研究领域中存在的诸多限制和未来挑战,以及类器官在新兴工程技术中的应用前景和展望,旨在为类器官培养方法的进一步完善及在相关领域的研究和应用提供更多的理论依据和新的思路。 展开更多
关键词 类器官 培养方法 3D细胞培养 应用现状
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空置猪场的猪流行性腹泻病毒检测
10
作者 李阳 张越 +6 位作者 路浩 邢金超 李振坤 董芳婷 徐盟龙 袁晋 魏战勇 《动物医学进展》 2025年第6期7-12,共6页
为探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)在规模化养殖场环境中的分布规律,制定精准有效的猪场生物安全防控措施,采用实时荧光定量PCR方法,对采集自河南省信阳市某空置6个月猪场的366份环境样品进行了PEDV核酸检测。结果显示,该猪场环境样品中有12... 为探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)在规模化养殖场环境中的分布规律,制定精准有效的猪场生物安全防控措施,采用实时荧光定量PCR方法,对采集自河南省信阳市某空置6个月猪场的366份环境样品进行了PEDV核酸检测。结果显示,该猪场环境样品中有124份PEDV核酸阳性,总体阳性率为33.88%;不同区域PEDV检出率由高到低依次为排污系统50.00%(4/8)、猪舍环境33.92%(116/342)、洗消中心25.00%(4/16);值得注意的是,洗消中心的减速带、猪舍环境内的漏粪地板及排污系统的粪沟检出率均为100%。结果表明,该猪场清洗消毒空置6个月后仍有大量PEDV核酸残留。总体来说,研究发现了猪场清洗消毒的部分盲区,讨论了病毒残留点和猪场建设规划,以及空气、饲料和环境等因素间的关系,指出了猪场现有清洗流程的漏洞,为猪场建立完善的生物安全防控体系提供了参考。 展开更多
关键词 空置猪场 猪流行性腹泻病毒 猪场环境 清洗消毒盲区
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