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题名家蝇溶菌酶1基因的克隆、序列分析及原核表达
被引量：3
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作者
王梅梅
万玲
孔令聪
裴志花
刘树明
马红霞
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机构
吉林农业大学生命科学学院
吉林农业大学动物科学科技学院
动物生产与产品质量安全教育部重点实验室(吉林农业大学)
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出处
《中国兽药杂志》
2014年第3期10-14,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目(31140026)
教育部新世纪优秀人才项目(NCET-10-0174)
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文摘
采用cDNA末端快速扩增技术(RACE),对鸡致病性大肠杆菌诱导家蝇幼虫抑制性消减文库(SSH)中筛选得到家蝇溶菌酶1基因((Musca domestica lysozyme-1,MdL-1)进行扩增,测序分析得到一个全长为537 bp的cDNA片段,其开放阅读框(ORF)432 bp,与Genbank中登录号为AY344589.1基因同源性为96%。构建重组表达质粒pET-32a-MdL-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示,表达产物大小约为34 kD,与预期蛋白大小一致。结果表明,利用RACE技术克隆得到MdL-1全长基因并在大肠杆菌中获得了表达,为进一步研究该蛋白的生物学及免疫学活性奠定了基础。
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关键词
家蝇
家蝇溶菌酶1
克隆
序列分析
原核表达
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Keywords
Musca do mestica
Md-lysozyme 1
clone
sequence analysis
prokaryotic expression
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分类号
S852.743
[农业科学—基础兽医学]
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