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鸡源携带多黏菌素耐药基因mcr-1大肠杆菌耐药性与毒力基因相关性分析
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作者 戴婷婷 陈海玉 +10 位作者 段楚楚 刘荣昌 李宇蓉 严淑涵 陈梦诗 刘露薇 包银莉 程艳青 林炜明 黄翠琴 郑新添 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1393-1404,共12页
【目的】分析福建省鸡源携带多黏菌素耐药基因mcr-1大肠杆菌的耐药性与毒力基因之间的相关性,并对mcr-1耐药基因质粒转移特性进行研究。【方法】以临床分离的87株鸡源携带mcr-1基因大肠杆菌为研究对象,通过微量肉汤稀释法检测其对6大类1... 【目的】分析福建省鸡源携带多黏菌素耐药基因mcr-1大肠杆菌的耐药性与毒力基因之间的相关性,并对mcr-1耐药基因质粒转移特性进行研究。【方法】以临床分离的87株鸡源携带mcr-1基因大肠杆菌为研究对象,通过微量肉汤稀释法检测其对6大类11种抗菌药物的敏感性,利用PCR方法检测分离株耐药基因、毒力基因和质粒类型,分析mcr-1基因阳性菌耐药表型和耐药基因以及耐药基因和毒力基因之间的相关性;利用质粒接合试验,探究mcr-1基因的转移情况。【结果】药敏试验结果显示,96.55%(85/87)分离株为多重耐药菌,其中对四环素类的耐药最严重,多西环素和四环素耐药率分别为88.51%(77/87)和82.76%(72/87)。分离株中检出11种耐药基因,其中以四环素类耐药基因tet(A)检出率最高,为95.40%(83/87);共检测出18种毒力基因,其中侵袭素类mat为优势毒力基因,检出率为85.06%(74/87);部分耐药基因和耐药表型、耐药基因与毒力基因之间具有相关性。分离株携带12种质粒,主要类型为IncFIB(77.01%,67/87)。接合试验结果显示,共有42株分离菌接合成功,接合转移率为48.28%(42/87),IncI2、IncHI2、IncX4质粒均成功转移至接合子中,其中IncI2质粒检出率最高(57.14%)。【结论】87株鸡源携带mcr-1基因大肠杆菌多重耐药严重,其耐药基因检出率高,毒力基因种类多样,且部分耐药基因和耐药表型、毒力基因之间存在相关性;48.28%(42/87)菌株的mcr-1基因可以利用IncI2、IncHI2、IncX4质粒作为载体进行传播。研究结果为深入了解福建省鸡源mcr-1基因阳性大肠杆菌的多重耐药情况、毒力特性以及传播机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 多黏菌素 mcr-1基因 耐药性 毒力基因 接合试验
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华南虎源产碱普罗威登斯菌的分离鉴定及致病性研究
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作者 李雨琪 朱智豪 +16 位作者 郑欣 许癸宗 蔡思思 周娴静 靳雨欣 刘璐 许静茹 陈芳婷 薛梦如 康娅莉 薛羽希 陈腾腾 林锡潘 林开雄 谭聪灵 张敏 范克伟 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1320-1328,共9页
【目的】分离鉴定导致华南虎急性死亡的病原菌,确定其致病性及药物敏感性,为今后该病的防控提供科学依据。【方法】利用形态学、分子生物学确定分离菌株种类,并对其进行小鼠致病性试验、药敏试验。【结果】从死亡华南虎幼虎肠道中分离到... 【目的】分离鉴定导致华南虎急性死亡的病原菌,确定其致病性及药物敏感性,为今后该病的防控提供科学依据。【方法】利用形态学、分子生物学确定分离菌株种类,并对其进行小鼠致病性试验、药敏试验。【结果】从死亡华南虎幼虎肠道中分离到1株细菌。分离菌在鲜血琼脂平板上呈现灰白色菌落,在麦康凯平板上呈现白色菌落;镜检为革兰阴性杆菌,命名为FJ/Tiger201802。结合16S rRNA测序结果,确定其为产碱普罗威登斯菌。遗传进化分析显示,FJ/Tiger201802与鱼源分离株HXM38(MZ734428.1)位于同一进化分支,亲缘关系较近,16S rRNA基因核苷酸相似性为99.5%。分离菌株接种试验小鼠,发病小鼠出现精神萎靡、被毛松乱、扎堆、眼角出现分泌物等症状,分离菌株对小鼠的半数致死量(LD50)为1×108.2CFU,病理剖检及病理组织学结果表明,FJ/Tiger201802的致病性较强,主要侵害小鼠的肝脏、肺脏、肠等组织器官。药敏试验结果表明,氨苄西林、氨曲南、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢曲松、头孢吡肟、头孢他啶、头孢西叮、氧氟沙星、链霉素、妥布霉素和庆大霉素对分离菌株具有较强的体外生长抑制作用,对头孢唑林、头孢噻吩不敏感。【结论】本研究分离到1株华南虎源产碱普罗威登斯菌,可引起小鼠感染发病。研究结果可为产碱普罗威登斯菌病的临床诊断和治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 华南虎 产碱普罗威登斯菌 分离鉴定 致病性
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肉鸡圆圈病毒3型和A型多杀性巴氏杆菌混合感染的检测与分析 被引量:1
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作者 庄丽云 雷天宇 +8 位作者 戴婷婷 吴玲玲 朱金玲 廖悦辰 牛群 包银莉 黄翠琴 戴爱玲 郑新添 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期18-23,共6页
为查明福建省龙岩市某鸡场肉鸡消瘦、呼吸困难、病死率升高原因,对发病鸡进行细菌分离鉴定、16S rDNA鉴定、荚膜分型检测、药物敏感试验等分析;以及进行病毒核酸PCR检测、遗传进化分析。结果显示,从病鸡中分离的细菌在血平板上形成圆形... 为查明福建省龙岩市某鸡场肉鸡消瘦、呼吸困难、病死率升高原因,对发病鸡进行细菌分离鉴定、16S rDNA鉴定、荚膜分型检测、药物敏感试验等分析;以及进行病毒核酸PCR检测、遗传进化分析。结果显示,从病鸡中分离的细菌在血平板上形成圆形、微突起、表面光滑、奶油状的菌落;分离菌16S rDNA核苷酸序列与GenBank中公布的多杀性巴氏杆菌的同源性达到99.9%以上,菌株荚膜为A型;该菌对哌拉西林、头孢氨苄、庆大霉素等药物均表现为高度敏感;从病鸡中检测出圆圈病毒3型(GyV3)VP2基因,与GenBank(登录号MK089248)GyV3同源性最高(99.9%)。结果表明,该鸡场发生圆圈病毒3型和A型多杀性巴氏杆菌引起的混合感染病例。 展开更多
关键词 圆圈病毒3型 多杀性巴氏杆菌 混合感染 病原学分析
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一只流浪犬体表寄生蜱的种类鉴定及其携带病原体的检测与分析
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作者 朱金玲 林俊宏 +2 位作者 包银莉 黄剑梅 黄翠琴 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4465-4475,共11页
【目的】鉴定一只来自浙江嘉兴的流浪犬体表寄生的蜱种类及其携带病原体情况,了解血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus)的生活史及其携带的病原体对人和动物的危害,为后续防治相关疾病提供措施。【方法】分别采用光学显微镜观察和PCR... 【目的】鉴定一只来自浙江嘉兴的流浪犬体表寄生的蜱种类及其携带病原体情况,了解血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus)的生活史及其携带的病原体对人和动物的危害,为后续防治相关疾病提供措施。【方法】分别采用光学显微镜观察和PCR方法对蜱进行形态学和分子种类鉴定;同时分别针对梨形虫目和巴贝斯虫属的18S rRNA、斑点热群立克次氏体ompA、埃立希体dsb和伯氏疏螺旋体5S~23S rRNA基因进行PCR扩增,检测蜱携带病原体情况。【结果】从该流浪犬体表采集的82只蜱均为血红扇头蜱,其中24只蜱携带泰勒虫属,阳性率为29.27%(24/82);4只携带Colpodella sp.,阳性率为4.88%(4/82);2只携带巴贝斯虫属,阳性率为2.44%(2/82);21只携带斑点热群立克次氏体,阳性率为25.61%(21/82);15只携带埃立希体,阳性率为18.29%(15/82);未发现有蜱携带伯氏疏螺旋体。在单只蜱中检出的病原体数量和种类都各不同,其中有24只蜱仅携带1种病原体;12只蜱同时携带2种病原体;6只蜱同时携带3种病原体;有40只蜱未携带所检病原体。【结论】该流浪犬体表寄生的蜱为血红扇头蜱,其携带了泰勒虫属、巴贝斯虫属、斑点热群立克次氏体、埃立希体多种病原体,可对人和动物造成较大的威胁,应加强对该地区蜱的防控,尤其是加强对流浪犬的管理。 展开更多
关键词 流浪犬 血红扇头蜱 梨形虫 埃立希体 伯氏疏螺旋体 斑点热群立克次氏体
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微小扇头蜱P0基因的克隆及其编码蛋白的生物信息学分析
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作者 李中波 杨甜 +1 位作者 罗世民 黄翠琴 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第8期1800-1810,共11页
为探究微小扇头蜱P0基因序列特征,预测P0蛋白的理化性质和二、三级结构,筛选出P0蛋白的B、T优势抗原表位,本研究克隆了微小扇头蜱P0基因,运用Clustal X软件分析P0基因序列特征,用在线软件EXPASY、PRABI和SWISS-MODEL预测P0蛋白的理化性... 为探究微小扇头蜱P0基因序列特征,预测P0蛋白的理化性质和二、三级结构,筛选出P0蛋白的B、T优势抗原表位,本研究克隆了微小扇头蜱P0基因,运用Clustal X软件分析P0基因序列特征,用在线软件EXPASY、PRABI和SWISS-MODEL预测P0蛋白的理化性质和二、三级结构,用在线软件ABCpred Prediction、Scratch、IEDB和NetCTL筛选P0蛋白的B、T优势抗原表位。试验结果显示:微小扇头蜱P0基因全长957 bp,碱基A含量为24.0%,T含量为20.3%,G含量为27.5%,C含量为28.2%,A+T含量为44.3%,G+C含量为55.7%,共编码318个氨基酸;P0蛋白分子量为34 ku,理论等电点(pI)为5.86,平均亲水系数为-0.153,不稳定指数为38.15;P0蛋白的二级结构含163个α螺旋(占比51.25%),130个无规卷曲(占比40.88%),25个延伸链(占比7.86%),其中以α螺旋为主要结构;P0蛋白的三级结构以α螺旋的含量最高,该蛋白的全局模型质量评估(global model quality estimation, GMQE)、定性模型能量分析(qualitative model energy analysis, QMEAN)值分别为0.49和0.52±0.05,无信号肽和跨膜结构域,但存在40个磷酸化位点和1个糖基化位点;P0蛋白有13个B淋巴细胞优势抗原表位和6个T淋巴细胞优势抗原表位。综上所述,微小扇头蜱P0基因序列呈GC偏好,P0蛋白是以α螺旋为主要结构成分的亲水性酸蛋白,具有B、T淋巴细胞优势抗原表位,是今后研制防控微小扇头蜱疫苗的理想靶标。 展开更多
关键词 微小扇头蜱 P0基因 P0蛋白 抗原表位
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肺炎克雷伯菌肝脓肿小鼠模型的建立
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作者 陈紫怡 路佳臻 +6 位作者 万兆丰 温慧雅 韦婧芸 张欣怡 曾旭健 黄翠琴 包银莉 《福建农业科技》 CAS 2024年第10期29-35,共7页
为构建稳定可靠的肺炎克雷伯菌肝脓肿(KPLA)动物模型,选取18 g左右健康ICR小鼠,以高毒力动物源肺炎克雷伯菌临床分离株KP001为造模菌株,分别从接种方式(灌胃、滴鼻和腹腔注射,接种菌数为1×10^(7) CFU)和接种剂量进行摸索,并对造模... 为构建稳定可靠的肺炎克雷伯菌肝脓肿(KPLA)动物模型,选取18 g左右健康ICR小鼠,以高毒力动物源肺炎克雷伯菌临床分离株KP001为造模菌株,分别从接种方式(灌胃、滴鼻和腹腔注射,接种菌数为1×10^(7) CFU)和接种剂量进行摸索,并对造模成功小鼠的血清样品进行谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、白蛋白、乳酸脱氢酶、总胆红素等生化指标的测定。结果表明:灌胃小鼠存活率100%,但肝脏未出现脓肿;滴鼻小鼠死亡率100%,肺脏病变明显,40%死亡小鼠肝脏出现脓肿;腹腔注射1×10^(6) CFU细菌后,小鼠存活率为75%以上,且存活小鼠肝脏均出现脓肿,成模率100%。病理切片显示造模成功小鼠肝细胞排列紊乱,中央静脉周围有大量炎性细胞浸润。生化指标检测显示,与对照小鼠相比,造模成功小鼠的血清样品中γ-谷氨酰转移酶极显著升高(P<0.01),碱性磷酸酶极显著下降(P<0.01),谷丙转氨酶、白蛋白显著下降(P<0.05)。综上分析表明,通过腹腔注射方式,接种1×10^(6) CFU KP001菌株后可成功构建KPLA小鼠模型,γ-谷氨酰转移酶和碱性磷酸酶等生化指标可用于评估模型建立效果。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 肝脓肿 动物模型 生化指标
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杭州地区宠物衣原体流行病学调查 被引量:1
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作者 郑永慧 郑智杰 +2 位作者 梁孝本 薛观宏 吴海冲 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3294-3302,共9页
【目的】了解杭州地区宠物衣原体的流行情况。【方法】采用PCR和间接血凝试验(IHA)对杭州某动物医院238份宠物犬眼结膜拭子、556份宠物猫眼结膜拭子、98份宠物鸟血清样本和花鸟市场264份鹦鹉血清样本进行衣原体检测,并对阳性样本进行核... 【目的】了解杭州地区宠物衣原体的流行情况。【方法】采用PCR和间接血凝试验(IHA)对杭州某动物医院238份宠物犬眼结膜拭子、556份宠物猫眼结膜拭子、98份宠物鸟血清样本和花鸟市场264份鹦鹉血清样本进行衣原体检测,并对阳性样本进行核苷酸序列测定。利用SPSS 25.0软件分析动物的年龄、性别对衣原体感染有无统计学意义;利用Clustal W和Mega 11.0软件将流行株的主要毒力基因与已发表的参考序列进行相似性比对、进化关系分析。【结果】与宠物猫相比,动物医院中宠物犬和鸟不易感染衣原体,宠物猫检测出阳性样本13份,阳性率为2.34%。幼猫(<1岁)的感染率(3.57%)最高,公猫的感染率(2.70%)略高于母猫(2.02%),差异均不显著(P>0.05)。13份猫阳性样本测序分析显示,均为猫衣原体(Chlamydia felis),与猫衣原体Fe/C-56 ompA基因相似性在99.2%~99.7%之间。花鸟市场鹦鹉检测出阳性样本14份,阳性率为5.30%。受感染的鹦鹉中幼鸟(<1岁)的感染率(9.78%)最高,雌鸟感染率(6.25%)高于雄鸟(4.41%),差异均不显著(P>0.05)。花鸟市场的鹦鹉感染率(5.30%)高于动物医院的鸟(0),14份鹦鹉阳性样本测序分析显示,均为鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci),与鹦鹉热衣原体6BC ompA基因相似性在99.4%~99.5%之间。【结论】本研究首次对杭州地区宠物衣原体流行情况进行调查,结果表明杭州市宠物猫和花鸟市场鹦鹉存在衣原体的感染,给人类健康带来了潜在威胁,因此,应当提高对宠物衣原体感染的重视,采取适当的饲养管理措施防控衣原体感染,避免人兽共患。 展开更多
关键词 衣原体 宠物 流行病学
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