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猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定: 1; 作者赵婷芳高翠翠 +9 位作者唐青海赵铖蔡林娜侯鑫军刘婷全飞杨胡意刘会敬杨灿杨海《湖南畜牧兽医》 2023年第1期38-43,共6页; 为制备猪圆环病毒2a型(PCV2a)和2b型(PCV2b)Cap蛋白,用生物信息学软件优化PCV2a Cap基因和PCV2b Cap基因密码子、克隆至pET28a载体中、转化BL21(DE3)、构建重组蛋白表达菌株,通过优化原核表达的温度、IPTG浓度等条件进行蛋白表达,采用SD... 展开更多; 关键词猪圆环病毒2型 CAP蛋白原核表达诱导包涵体; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪CD163基因的克隆及截短原核表达: 2; 作者刘雪晴张可 +6 位作者唐青海薛姣雄隆泽桧高翠翠刘之睿苏荣唐斯萍《湖南畜牧兽医》 2023年第2期30-36,共7页; (目的)研究旨在克隆猪CD163 (pCD163)基因、体外表达CD163蛋白。(方法)采用RT-PCR扩增猪CD163基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列,将猪CD163的两个截短基因片段(1-1749 bp和1717-3348 bp)克隆至原核表达载体pGEX-4T-1... 展开更多; 关键词猪CD163蛋白进化分析诱导表达包涵体; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白的原核表达与纯化被引量：1: 3; 作者刘之睿黄嘉瑶 +4 位作者苏荣陈濛濛彭春婷唐青海唐斯萍《湖南畜牧兽医》 2023年第5期30-36,共7页; 为制备高致病性的TGEV毒株重组S蛋白,试验将重组质粒pET28a-TGEV-S2、pET28a-TGEV-S3,转化至E.coli BL21(DE3)表达菌株,设置不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时长对其进行表达条件的优化,并使用纯化试剂盒将其纯化,采用SDS-PAGE和Western... 展开更多; 关键词猪传染性胃肠炎病毒原核表达蛋白鉴定纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪表皮生长因子的原核表达及纯化: 4; 作者刘庭汤慧 +6 位作者唐青海刘莎薛姣雄吴广艳马洁赵婷芳唐斯萍《湖南畜牧兽医》 2022年第2期45-50,共6页; [目的]:提高重组猪表皮生长因子(pEGF)的表达量和纯化量,为后续研究pEGF对仔猪生长发育的影响奠定基础。[方法]:将人工合成的pEGF基因克隆至pEGF4T-1载体,转化至大肠杆菌Rossetta(DE3)中,得到重组菌株Rossetta(DE3)-pGEX-pEGF,IPTG诱导... 展开更多; 关键词猪表皮生长因子诱导表达 GST标签蛋白纯化条件优化融合表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定: 1; 作者赵婷芳高翠翠唐青海赵铖蔡林娜侯鑫军刘婷全飞杨胡意刘会敬杨灿杨海; 机构衡阳师范学院生命科学学院南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室; 出处《湖南畜牧兽医》 2023年第1期38-43,共6页; 基金湖南省自然科学基金面上项目(2021JJ30060)。; 文摘为制备猪圆环病毒2a型(PCV2a)和2b型(PCV2b)Cap蛋白,用生物信息学软件优化PCV2a Cap基因和PCV2b Cap基因密码子、克隆至pET28a载体中、转化BL21(DE3)、构建重组蛋白表达菌株,通过优化原核表达的温度、IPTG浓度等条件进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果显示:重组PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白的分子量约为30 kDa,在不同温度下都以包涵体形式存在,在37℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达的Cap蛋白表达量最高。试验成功制备了PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白,为制备PCV2二价疫苗及其诊断方法的研究提供了基础材料。; 关键词猪圆环病毒2型 CAP蛋白原核表达诱导包涵体; Keywords Porcine circovirus type 2 Cap protein Prokaryotic expression To induce Body of inclusion; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪CD163基因的克隆及截短原核表达: 2; 作者刘雪晴张可唐青海薛姣雄隆泽桧高翠翠刘之睿苏荣唐斯萍; 机构衡阳师范学院生命科学学院; 出处《湖南畜牧兽医》 2023年第2期30-36,共7页; 基金国家级大学生创新创业训练计划项目(202110546001,“互联网+”[2021]-24号) 湖南省自然科学基金面上项目(2021JJ30060) +2 种基金湖南省重点研发计划(2021NK2026) 2022年中央引导地方科技发展资金项目(2022ZYC091)。; 文摘 (目的)研究旨在克隆猪CD163 (pCD163)基因、体外表达CD163蛋白。(方法)采用RT-PCR扩增猪CD163基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列,将猪CD163的两个截短基因片段(1-1749 bp和1717-3348 bp)克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体,转化Transetta(DE3)菌株,IPTG诱导蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。(结果)结果表明,pCD163开放阅读框为3348 bp(GenBank:OM321546),编码1116 aa,蛋白分子量为120.5 kDa,该基因与已经测定的人、绿猴、牛、狼的CD163的核苷酸相似性依次为87.8%、88%、87.4%和88%,pCD163基因与抹香鲸和牛的CD163基因亲缘关系最近,与人、狼和绿猴的亲缘关系相对较近;pCD163截短片段1-1749蛋白分子量为92 kDa,截短片段1717-3348蛋白分子量为85 kDa,均以包涵体形式表达。(结论)试验成功克隆了pCD163基因,两个截短基因片段在原核细胞中均以包涵体形式表达,为后续开展该蛋白生物学功能研究提供了基础材料。; 关键词猪CD163蛋白进化分析诱导表达包涵体; Keywords Porcine CD163 protein evolutionary analysis induced express inclusions; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白的原核表达与纯化被引量：1: 3; 作者刘之睿黄嘉瑶苏荣陈濛濛彭春婷唐青海唐斯萍; 机构衡阳师范学院化学与材料科学学院; 出处《湖南畜牧兽医》 2023年第5期30-36,共7页; 基金国家级大学生创新创业训练计划项目(202210546002) 湖南省重点研发计划(2021NK2026) +1 种基金动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室。; 文摘为制备高致病性的TGEV毒株重组S蛋白,试验将重组质粒pET28a-TGEV-S2、pET28a-TGEV-S3,转化至E.coli BL21(DE3)表达菌株,设置不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时长对其进行表达条件的优化,并使用纯化试剂盒将其纯化,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组TGEV毒株S蛋白的分子量分别约为28 kDa、30 kDa,在不同诱导条件下均以包涵体形式存在,在28℃条件下以终浓度为1 mmoL·L^(-1)IPTG诱导4 h表达量达到最高。结果表明:试验成功制备了TGEV重组S蛋白,为TGEV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗、检测试剂的研究奠定了基础。; 关键词猪传染性胃肠炎病毒原核表达蛋白鉴定纯化; Keywords Porcine transmissible gastroenteritis virus prokaryotic expression identification purification; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪表皮生长因子的原核表达及纯化: 4; 作者刘庭汤慧唐青海刘莎薛姣雄吴广艳马洁赵婷芳唐斯萍; 机构衡阳师范学院生命科学与环境学院\南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室\动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室; 出处《湖南畜牧兽医》 2022年第2期45-50,共6页; 基金湖南省教育厅科学研究项目重点项目(21A0442) 湖南省自然科学基金面上项目(2021JJ30060) +1 种基金湖南省重点研发计划(2021NK2026) 国家级大学生创新创业训练计划项目(202110546001)。; 文摘 [目的]:提高重组猪表皮生长因子(pEGF)的表达量和纯化量,为后续研究pEGF对仔猪生长发育的影响奠定基础。[方法]:将人工合成的pEGF基因克隆至pEGF4T-1载体,转化至大肠杆菌Rossetta(DE3)中,得到重组菌株Rossetta(DE3)-pGEX-pEGF,IPTG诱导表达,进行表达条件的优化,用GST-tag亲和层析纯化方法进行纯化。[结果]:pEGF基因大小为159 bp,融合表达蛋白分子量为32k Da,最佳诱导表达条件为IPTG浓度0.01mmol/L、诱导温度15℃和诱导时间24h。流穿液和洗涤液中目的蛋白含量极少,洗脱液得到了高纯度的GST-pEGF融合蛋白,纯化较为成功。[结论]:成功构建了pEGF表达菌株,得到了最优的诱导表达条件和最优的纯化工艺,为pEGF相关产品的开发以及应用奠定了基础。; 关键词猪表皮生长因子诱导表达 GST标签蛋白纯化条件优化融合表达; Keywords Porcine epidermal growth factor Induced expression GST tag Protein purification Conditions optimization Fusion expression; 分类号 S831.4 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定	赵婷芳高翠翠唐青海赵铖蔡林娜侯鑫军刘婷全飞杨胡意刘会敬杨灿杨海	《湖南畜牧兽医》	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪CD163基因的克隆及截短原核表达	刘雪晴张可唐青海薛姣雄隆泽桧高翠翠刘之睿苏荣唐斯萍	《湖南畜牧兽医》	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白的原核表达与纯化	刘之睿黄嘉瑶苏荣陈濛濛彭春婷唐青海唐斯萍	《湖南畜牧兽医》	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪表皮生长因子的原核表达及纯化	刘庭汤慧唐青海刘莎薛姣雄吴广艳马洁赵婷芳唐斯萍	《湖南畜牧兽医》	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料