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鸭甲肝病毒基因A型和C型双重RT-PCR检测方法的建立
被引量:
12
1
作者
黄秋雪
汤承
+1 位作者
聂培婷
岳华
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期120-123,共4页
为建立同时检测基因A型和C型鸭甲肝病毒(DHAV-A,DHAV-C)的双重RT-PCR方法,本实验根据GenBank中DHAV-A和DHAV-C全基因组序列,针对DHAV-A的3C、3D和DHAV-C的2C区域分别设计了2对引物,通过对反应体系和反应条件的优化及特异性、灵敏度评价...
为建立同时检测基因A型和C型鸭甲肝病毒(DHAV-A,DHAV-C)的双重RT-PCR方法,本实验根据GenBank中DHAV-A和DHAV-C全基因组序列,针对DHAV-A的3C、3D和DHAV-C的2C区域分别设计了2对引物,通过对反应体系和反应条件的优化及特异性、灵敏度评价,建立了检测DHAV-A和DHAV-C的双重RT-PCR方法。该方法能够分别从DHAV-A、DHAV-C阳性样本中扩增出DHAV-A(259 bp)和DHAV-C(194 bp)的特异片段,而不与其它被检的无关病原发生非特异反应;对DHAV-A和DHAV-C的最低检出限分别为4.98×104拷贝/μL、1.68×104拷贝/μL;对2009年8月至2011年7月送检病料检出DHAV-A和DHAV-C的阳性率分别为20%(14/70)、70%(49/70);随机抽取的DHAV-C PCR阳性样本的病毒分离结果与双重RT-PCR检测结果的符合率为100%(16/16)。本研究结果显示,建立的双重RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于临床DHAV的快速鉴别诊断。
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关键词
鸭甲肝炎病毒
基因A型
基因C型
双重RT-PCR
鉴别诊断
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职称材料
新城疫病毒HN基因功能结构域的原核表达
被引量:
3
2
作者
俞宁
张兆敏
岳华
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第8期89-92,共4页
本研究对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分离株sc05的HN基因进行了克隆、序列测定,在此基础上将其C端功能结构域76-571aa片段亚克隆到pET32a(+)表达载体上,构建重组表达质粒pET32a-HN,鉴定正确后转化进BL21plysS(DE3)细胞,筛...
本研究对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分离株sc05的HN基因进行了克隆、序列测定,在此基础上将其C端功能结构域76-571aa片段亚克隆到pET32a(+)表达载体上,构建重组表达质粒pET32a-HN,鉴定正确后转化进BL21plysS(DE3)细胞,筛选出阳性克隆,用1mmol/L IPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS-PAGE电泳结果显示,HN基因功能结构域片段在BL21plysS(DE3)细胞中实现融合表达,表达产物大小约为76ku,Western blotting试验证实其能与NDV阳性血清反应。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。
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关键词
NDV
HN基因
克隆
功能结构域
原核表达
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职称材料
1株犬源致病性黑曲霉菌的分子鉴定及生物学特性研究
被引量:
1
3
作者
李必富
王晓佳
+1 位作者
杨金福
汤承
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期188-191,共4页
从患皮肤病犬患病部位分离出1株真菌,对其培养特性、形态特征、致病性等生物学特性以及核糖体转录间隔区(rDNA-ITS)的分子特征进行研究.结果表明,该分离株具有曲霉菌的典型菌落和形态特征;经皮肤和腹腔接种途径感染免疫抑制小鼠,均出现...
从患皮肤病犬患病部位分离出1株真菌,对其培养特性、形态特征、致病性等生物学特性以及核糖体转录间隔区(rDNA-ITS)的分子特征进行研究.结果表明,该分离株具有曲霉菌的典型菌落和形态特征;经皮肤和腹腔接种途径感染免疫抑制小鼠,均出现与自然感染病例相似的皮肤病变;基于rDNA-ITS序列的分子鉴定证实该分离株为黑曲霉菌.
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关键词
犬
皮肤病
真菌病
黑曲霉
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职称材料
副猪嗜血杆菌灭活疫苗佐剂的筛选
被引量:
8
4
作者
罗添添
岳华
汤承
《四川畜牧兽医》
2010年第11期26-28,共3页
为了评价铝胶、蜂胶及白油佐剂对副猪嗜血杆菌的免疫增强效果,我们将铝胶、蜂胶和白油3种佐剂分别与副猪嗜血杆菌血清5型菌株联合制备灭活疫苗,然后接种雄性成年家兔,采用ELSIA方法分别检测3种灭活苗在免疫期间副猪嗜血杆菌P5蛋白的抗...
为了评价铝胶、蜂胶及白油佐剂对副猪嗜血杆菌的免疫增强效果,我们将铝胶、蜂胶和白油3种佐剂分别与副猪嗜血杆菌血清5型菌株联合制备灭活疫苗,然后接种雄性成年家兔,采用ELSIA方法分别检测3种灭活苗在免疫期间副猪嗜血杆菌P5蛋白的抗体效价。结果显示:3次免疫后,白油佐剂免疫组的平均效价为1∶4000,铝胶佐剂免疫组的平均效价为1∶700,蜂胶佐剂免疫组的平均效价为1∶100,无佐剂对照组的平均效价为1∶100。说明这3种佐剂中免疫增强效果最好的为白油,铝胶次之。
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关键词
副猪嗜血杆菌
灭活疫苗
佐剂
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职称材料
一株犬源近平滑念珠菌的分子鉴定及部分生物学特性试验
被引量:
1
5
作者
王晓佳
杨金福
+2 位作者
岳华
汤承
杨松沛
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第4期60-64,共5页
应用核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列分析技术从47株临床分离的犬源真菌中鉴定出一株近平滑念珠菌,对其部分生物学特性进行研究。结果显示,该菌株在沙堡氏培养基上形成白色奶油状菌落,菌体呈典型酵母菌形态。腹腔接种小鼠出现脏器病变...
应用核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列分析技术从47株临床分离的犬源真菌中鉴定出一株近平滑念珠菌,对其部分生物学特性进行研究。结果显示,该菌株在沙堡氏培养基上形成白色奶油状菌落,菌体呈典型酵母菌形态。腹腔接种小鼠出现脏器病变并回收到该菌,而皮肤接种小鼠未出现病变。药敏试验显示,该菌株对制霉菌素高度敏感,对两性霉素B、伊曲康唑和酮康唑中度敏感,对氟康唑耐药。ITS区基因序列分析表明,该菌株与人源近平滑念珠菌高度同源;系统进化分析表明,该菌与日本的人源分离株遗传关系较近。
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关键词
近平滑念珠菌
转录间隔区
人工感染
药敏试验
犬
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职称材料
题名
鸭甲肝病毒基因A型和C型双重RT-PCR检测方法的建立
被引量:
12
1
作者
黄秋雪
汤承
聂培婷
岳华
机构
西南民族大学生命科学与技术学院
动物
医学
四川省
高等院校
重点
建设
实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期120-123,共4页
基金
四川省科技条件平台建设项目--四川省兽医微生物资源整理及标准化
文摘
为建立同时检测基因A型和C型鸭甲肝病毒(DHAV-A,DHAV-C)的双重RT-PCR方法,本实验根据GenBank中DHAV-A和DHAV-C全基因组序列,针对DHAV-A的3C、3D和DHAV-C的2C区域分别设计了2对引物,通过对反应体系和反应条件的优化及特异性、灵敏度评价,建立了检测DHAV-A和DHAV-C的双重RT-PCR方法。该方法能够分别从DHAV-A、DHAV-C阳性样本中扩增出DHAV-A(259 bp)和DHAV-C(194 bp)的特异片段,而不与其它被检的无关病原发生非特异反应;对DHAV-A和DHAV-C的最低检出限分别为4.98×104拷贝/μL、1.68×104拷贝/μL;对2009年8月至2011年7月送检病料检出DHAV-A和DHAV-C的阳性率分别为20%(14/70)、70%(49/70);随机抽取的DHAV-C PCR阳性样本的病毒分离结果与双重RT-PCR检测结果的符合率为100%(16/16)。本研究结果显示,建立的双重RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于临床DHAV的快速鉴别诊断。
关键词
鸭甲肝炎病毒
基因A型
基因C型
双重RT-PCR
鉴别诊断
Keywords
duck hepatitis A virus
genotype A
genotype C
duplex RT-PCR
differential diagnosis
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
新城疫病毒HN基因功能结构域的原核表达
被引量:
3
2
作者
俞宁
张兆敏
岳华
机构
成都农业科技职业学院
西南民族大学生命科学与技术学院
高密市畜牧局
动物
医学
四川省
高等院校
重点
建设
实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第8期89-92,共4页
基金
"十一五"国家科技支撑计划项目(2006BAD06A11)
文摘
本研究对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分离株sc05的HN基因进行了克隆、序列测定,在此基础上将其C端功能结构域76-571aa片段亚克隆到pET32a(+)表达载体上,构建重组表达质粒pET32a-HN,鉴定正确后转化进BL21plysS(DE3)细胞,筛选出阳性克隆,用1mmol/L IPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS-PAGE电泳结果显示,HN基因功能结构域片段在BL21plysS(DE3)细胞中实现融合表达,表达产物大小约为76ku,Western blotting试验证实其能与NDV阳性血清反应。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。
关键词
NDV
HN基因
克隆
功能结构域
原核表达
Keywords
NDV
HN gene
clone
function domain
prokaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
1株犬源致病性黑曲霉菌的分子鉴定及生物学特性研究
被引量:
1
3
作者
李必富
王晓佳
杨金福
汤承
机构
西南民族大学生命科学与技术学院
出处
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期188-191,共4页
基金
四川省自然科技条件平台建设项目(四川省兽医微生物资源整理整合及标准化)
文摘
从患皮肤病犬患病部位分离出1株真菌,对其培养特性、形态特征、致病性等生物学特性以及核糖体转录间隔区(rDNA-ITS)的分子特征进行研究.结果表明,该分离株具有曲霉菌的典型菌落和形态特征;经皮肤和腹腔接种途径感染免疫抑制小鼠,均出现与自然感染病例相似的皮肤病变;基于rDNA-ITS序列的分子鉴定证实该分离株为黑曲霉菌.
关键词
犬
皮肤病
真菌病
黑曲霉
Keywords
dogs
dermatosis
mycoses
Aspergillus niger
分类号
R519 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
副猪嗜血杆菌灭活疫苗佐剂的筛选
被引量:
8
4
作者
罗添添
岳华
汤承
机构
西南民族大学生命科学与技术学院
动物医学四川省高等院校重点实验室
出处
《四川畜牧兽医》
2010年第11期26-28,共3页
基金
"十一五"国家科技支撑计划重大项目(2006BAD06A11)
文摘
为了评价铝胶、蜂胶及白油佐剂对副猪嗜血杆菌的免疫增强效果,我们将铝胶、蜂胶和白油3种佐剂分别与副猪嗜血杆菌血清5型菌株联合制备灭活疫苗,然后接种雄性成年家兔,采用ELSIA方法分别检测3种灭活苗在免疫期间副猪嗜血杆菌P5蛋白的抗体效价。结果显示:3次免疫后,白油佐剂免疫组的平均效价为1∶4000,铝胶佐剂免疫组的平均效价为1∶700,蜂胶佐剂免疫组的平均效价为1∶100,无佐剂对照组的平均效价为1∶100。说明这3种佐剂中免疫增强效果最好的为白油,铝胶次之。
关键词
副猪嗜血杆菌
灭活疫苗
佐剂
Keywords
Haemophilus parasuis
Inactivated vaccine
Adjuvant
分类号
S852.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
一株犬源近平滑念珠菌的分子鉴定及部分生物学特性试验
被引量:
1
5
作者
王晓佳
杨金福
岳华
汤承
杨松沛
机构
西南民族大学生命科学与技术学院
动物医学四川省高等院校重点实验室
四川省
兽药监察所
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第4期60-64,共5页
基金
国家科技基础条件平台项目(2005DKA21205-11)
文摘
应用核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列分析技术从47株临床分离的犬源真菌中鉴定出一株近平滑念珠菌,对其部分生物学特性进行研究。结果显示,该菌株在沙堡氏培养基上形成白色奶油状菌落,菌体呈典型酵母菌形态。腹腔接种小鼠出现脏器病变并回收到该菌,而皮肤接种小鼠未出现病变。药敏试验显示,该菌株对制霉菌素高度敏感,对两性霉素B、伊曲康唑和酮康唑中度敏感,对氟康唑耐药。ITS区基因序列分析表明,该菌株与人源近平滑念珠菌高度同源;系统进化分析表明,该菌与日本的人源分离株遗传关系较近。
关键词
近平滑念珠菌
转录间隔区
人工感染
药敏试验
犬
Keywords
Candida parapsilosis
internal transcribed spacer
artificial infection
drug sensitivity test
canine
分类号
Q949.32 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸭甲肝病毒基因A型和C型双重RT-PCR检测方法的建立
黄秋雪
汤承
聂培婷
岳华
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
12
在线阅读
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职称材料
2
新城疫病毒HN基因功能结构域的原核表达
俞宁
张兆敏
岳华
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
1株犬源致病性黑曲霉菌的分子鉴定及生物学特性研究
李必富
王晓佳
杨金福
汤承
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
副猪嗜血杆菌灭活疫苗佐剂的筛选
罗添添
岳华
汤承
《四川畜牧兽医》
2010
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
5
一株犬源近平滑念珠菌的分子鉴定及部分生物学特性试验
王晓佳
杨金福
岳华
汤承
杨松沛
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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