四川地区一株PCV2的分离鉴定及基因组序列分析 被引量：1

1

作者 陈劲松 郭紫晶 +2 位作者 黄雄挺 张志东 李彦敏 《四川畜牧兽医》 2024年第2期23-27,共5页

为了解猪圆环病毒2型(PCV2)当前流行分离株的基因型和进化特征,本研究对PCV2阳性临床样品进行分离鉴定,并对分离毒株进行全基因组序列扩增、测序及遗传进化分析,利用MegAlign7.0和DNAstar软件对分离株ORF2基因编码的Cap蛋白进行氨基酸... 为了解猪圆环病毒2型(PCV2)当前流行分离株的基因型和进化特征,本研究对PCV2阳性临床样品进行分离鉴定,并对分离毒株进行全基因组序列扩增、测序及遗传进化分析,利用MegAlign7.0和DNAstar软件对分离株ORF2基因编码的Cap蛋白进行氨基酸变异分析和抗原指数预测分析。测序结果显示,PCV2分离株(SMU-2022)的全基因组序列长度为1 767 nt。全基因组和Cap蛋白的遗传进化树结果均显示分离株属于PCV2d基因型,与国内外46株参考毒株的相似性在91.8%~99.1%之间,其中与QZ1410毒株的相似性最高,亲缘关系最接近。关键氨基酸位点变异分析表明,在Cap蛋白上有2个氨基酸特异性突变位点,分别是V30L和T232K。抗原指数分析发现,分离株的Cap蛋白抗原指数与4株疫苗株相比差异较大,主要集中在第20-30、40-75、90-100、130-140、195-205、210-220位氨基酸这6个区域。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) ORF2基因型 CAP蛋白 抗原指数 遗传进化分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

基因C型鸭甲肝病毒实验感染雏鸭的组织病理学及病毒分布 被引量：2

2

作者 张焕容 皮晋魁 黄志宏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期622-628,共7页

旨在研究基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)感染导致雏鸭的组织病理学变化和病毒的组织分布,为该病毒的致病机理研究奠定基础。本研究以基因C型鸭甲肝病毒感染SPF雏鸭,感染后不同时间点采取雏鸭10个不同组织器官制备组织切片,通过HE染色和免疫... 旨在研究基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)感染导致雏鸭的组织病理学变化和病毒的组织分布,为该病毒的致病机理研究奠定基础。本研究以基因C型鸭甲肝病毒感染SPF雏鸭,感染后不同时间点采取雏鸭10个不同组织器官制备组织切片,通过HE染色和免疫酶组织化学染色对感染雏鸭的组织病理学变化及病毒抗原免疫组化定位进行观察。结果表明:DHAV-C感染导致雏鸭的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、胸腺、胰脏、大脑和法氏囊共10个组织器官均发生了不同程度的病变,同时在这些器官中均有病毒抗原检出,在10个检测组织器官中,以肝脏、脾脏、肾脏、法氏囊、胸腺和胰脏等器官的组织病变和抗原检出最为明显,病变的严重程度与病毒抗原检出量成正相关。DHAV-C广泛分布到受检组织器官中,它导致的组织病理学变化严重程度与病毒抗原的检出量成正相关,推测DHAV-C入侵导致肝、肾和免疫器官的损害,是其急性感染发病的根本原因。 展开更多

关键词 基因C型鸭甲肝病毒 组织病理学 免疫组化 病毒分布

在线阅读 下载PDF 职称材料

反刍动物溶血性曼氏杆菌病的诊断与防控

3

作者 贡嘎次仁 格桑卓嘎 +1 位作者 郑林香 张焕容 《四川畜牧兽医》 2023年第10期57-58,共2页

溶血性曼氏杆菌常存在于牛、羊等反刍动物的上呼吸道中,正常情况下不易导致动物发病,为条件性致病菌,但在应激因素影响下,如气候变化、长途运输或者存在病毒、支原体、多杀性巴氏杆菌混合感染导致免疫力降低时,可引起牛地方流行性肺炎... 溶血性曼氏杆菌常存在于牛、羊等反刍动物的上呼吸道中,正常情况下不易导致动物发病,为条件性致病菌,但在应激因素影响下,如气候变化、长途运输或者存在病毒、支原体、多杀性巴氏杆菌混合感染导致免疫力降低时,可引起牛地方流行性肺炎、奶牛急性胸膜肺炎、犊牛多发性血管炎、山羊肺炎、绵羊乳房炎和羔羊急性败血症等多种疾病,且其引发乳房炎的能力可能强于金黄色葡萄球菌。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 条件性致病菌 急性败血症 反刍动物 乳房炎 胸膜肺炎 长途运输 混合感染

在线阅读 下载PDF 职称材料

SOCS2对山羊鼻甲骨细胞增殖、周期及凋亡的影响 被引量：2

4

作者 李秋云 田芯源 +5 位作者 廖文圣 张焕容 任玉鹏 杨发龙 朱江江 向华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2226-2240,共15页

细胞因子信号转导抑制因子2 (suppressor of cytokine signaling 2,SOCS2)在动物体内参与调节多种生理和病理过程,如细胞凋亡、细胞增殖、细胞周期、肿瘤和炎症反应等。本研究在首次克隆山羊SOCS2基因的基础上,研究过表达和干扰SOCS2表... 细胞因子信号转导抑制因子2 (suppressor of cytokine signaling 2,SOCS2)在动物体内参与调节多种生理和病理过程,如细胞凋亡、细胞增殖、细胞周期、肿瘤和炎症反应等。本研究在首次克隆山羊SOCS2基因的基础上,研究过表达和干扰SOCS2表达对山羊鼻甲骨细胞增殖、周期及凋亡的影响。以1周岁的健康简州大耳羊(6只)的心、肝、脾、肺、肾、瘤胃、大肠、小肠和山羊鼻甲骨细胞共9个样本为模板,采用反转录PCR技术克隆山羊SOCS2基因CDS区序列,并进行序列分析。利用RT-qPCR技术检测SOCS2基因在不同组织中的表达。将克隆得到的SOCS2基因CDS区连接载体构建真核表达载体pcDNA3.1-SOCS2。根据山羊SOCS2基因序列设计合成并筛选有效siRNA。利用Lipofectamine^(TM) 3000试剂将pcDNA3.1-SOCS2和siRNA片段分别转染至鼻甲骨细胞,采用蛋白免疫印迹技术检测SOCS2蛋白表达,MTT法检测SOCS2对细胞增殖的影响,流式细胞术检测SOCS2对细胞周期和凋亡的影响,并利用RT-qPCR技术检测细胞周期相关基因p21、CDK2和凋亡相关基因Caspase3、Caspase7、PARP1、p53、Bax、BCL2L11和Bcl-2的转录水平。结果显示,成功扩增山羊SOCS2基因序列,总长为1 065 bp, CDS区长为597 bp,编码198个氨基酸残基。SOCS2基因在肝中表达水平最高;SOCS2可以抑制细胞增殖。成功构建真核表达载体pcDNA3.1-SOCS2,且该基因在鼻甲骨细胞内成功表达。SOCS2过表达可导致G2/M+S期细胞数量显著增加,且下调CDK2和p21基因的mRNA表达;促进细胞凋亡,且上调Caspase3、Caspase7、Bax、p53、BCL2L11、Bcl-2基因的mRNA表达,PARP1表达水平无显著变化。而干扰SOCS2表达后,G0/G1期细胞数量显著升高,且CDK2和p21基因的mRNA表达上调;细胞凋亡被抑制,且Caspase3、Bax、p53、PARP1基因的mRNA表达下调,Caspase7、BCL2L11、Bcl-2基因表达水平无显著变化。综上所述,SOCS2可将细胞周期阻滞在G2/M+S期,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。研究结果为全面揭示山羊SOCS2功能提供试验数据。 展开更多

关键词 山羊 SOCS2 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

添加牛樟芝多糖和锌对麻黄肉鸡屠宰性能、肉品质及肌肉抗氧化能力的影响 被引量：2

5

作者 蓝咫林 王韩可 +4 位作者 赖世雄 郑玉才 李志雄 唐林 饶开晴 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期690-697,共8页

本研究旨在探究饲粮中添加牛樟芝多糖和锌对麻黄肉鸡生长性能、屠宰性能及肌肉品质、抗氧化能力的影响,为牛樟芝多糖和锌在肉鸡生产中的应用提供理论依据。选取35日龄健康的麻黄肉鸡公鸡180羽,随机分为如下3组:饲喂基础饲粮的对照、饲... 本研究旨在探究饲粮中添加牛樟芝多糖和锌对麻黄肉鸡生长性能、屠宰性能及肌肉品质、抗氧化能力的影响,为牛樟芝多糖和锌在肉鸡生产中的应用提供理论依据。选取35日龄健康的麻黄肉鸡公鸡180羽,随机分为如下3组:饲喂基础饲粮的对照、饲喂添加500 mg/kg牛樟芝多糖(ACP)的基础饲粮组(ACP处理)、饲喂添加500 mg/kg牛樟芝多糖+100 mg/kg锌的基础饲粮组(ACP+锌处理),每组设6个重复,每个重复设10羽鸡。试验期为28 d,其间记录鸡的生长性能相关指标;63日龄时,每个重复分别选取1~2羽鸡屠宰、采样,测定与屠宰性能、肉品质及肌肉抗氧化性能相关的指标。结果显示,与对照相比,ACP、ACP+锌处理胸肌在屠宰后45 min测量所得pH值(pH45 min值)显著升高(P<0.05),且滴水损失率显著降低(P<0.05)。与对照、ACP+锌处理相比,ACP处理胸肌的咀嚼性显著升高(P<0.05)。与对照相比,ACP、ACP+锌处理胸肌中的丙二醛含量均显著降低(P<0.05)。由结果看出,在饲料中单独添加牛樟芝多糖或联合添加牛樟芝多糖+锌均可以减少肉鸡胸肌的滴水损失,调节其pH值,提高肌肉品质和肉鸡胸肌的抗氧化能力。 展开更多

关键词 牛樟芝 麻黄肉鸡 屠宰性能 肉品质 抗氧化能力

在线阅读 下载PDF 职称材料

饲料中添加酶制剂和抗菌肽对藏鸡生产性能、抗氧化能力及免疫性能的影响 被引量：1

6

作者 魏盼琪 杨佳 +4 位作者 郑玉才 李志雄 倪建华 冯卫东 饶开晴 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第10期1882-1890,共9页

本研究在饲料中分别添加非淀粉多糖复合酶制剂、抗菌肽及二者联合添加,探究其对藏鸡生产性能、抗氧化能力及免疫性能的影响。挑选240羽14日龄健康藏鸡(公母各半),将藏鸡随机分为4组:基础饲料组(CK)、基础饲料添加300 mg/kg复合酶制剂组(... 本研究在饲料中分别添加非淀粉多糖复合酶制剂、抗菌肽及二者联合添加,探究其对藏鸡生产性能、抗氧化能力及免疫性能的影响。挑选240羽14日龄健康藏鸡(公母各半),将藏鸡随机分为4组:基础饲料组(CK)、基础饲料添加300 mg/kg复合酶制剂组(NSP处理)、基础饲料添加200 mg/kg抗菌肽组(AMPs处理)及基础饲料添加300 mg/kg复合酶制剂+200 mg/kg抗菌肽的酶肽组(NSP+AMPs处理)。在42日龄、63日龄于每个重复中选取2只体重相近的藏鸡统计生产性能相关指标。结果表明,(1)与CK相比,NSP处理、AMPs处理及NSP+AMPs处理均能显著增加21~42日龄藏鸡平均日采食量(P<0.05);NSP+AMPs处理能显著提升藏鸡平均日增重(P<0.05)。(2)NSP+AMPs处理可显著降低42日龄、63日龄藏鸡血清中丙二醛(MDA)含量(P<0.05),显著提高超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05)。NSP处理可显著降低42日龄及63日龄藏鸡血清中MDA含量,提升42日龄及63日龄藏鸡血清中GSH-Px的活性(P<0.05)。AMPs处理可显著提升42日龄藏鸡血清中GSH-Px活性及63日龄藏鸡血清中SOD活性(P<0.05),可显著降低63日龄藏鸡血清中MDA含量;NSP+AMPs处理可显著降低42日龄及63日龄藏鸡肝脏中MDA含量(P<0.05),可显著提高GSH-Px活性(P<0.05)。NSP处理可显著降低42日龄藏鸡肝脏中MDA含量,显著提高GSH-Px活性(P<0.05),各处理均可提升42日龄及63日龄藏鸡肝脏中SOD活性(P<0.05)。(3)AMPs处理与NSP+AMPs处理能显著提升42日龄藏鸡的法氏囊指数(P<0.05),且NSP+AMPs处理能显著提升63日龄藏鸡法氏囊指数(P<0.05),所有试验组均能显著提升42日龄、63日龄藏鸡血清新城疫抗体效价(P<0.05);AMPs处理与NSP+AMPs处理均显著提升42日龄、63日龄藏鸡血清中免疫球蛋白Y(IgY)含量(P<0.05)。饲料中酶制剂与抗菌肽联合添加可显著提高藏鸡的抗氧化能力与免疫性能,且显著提高藏鸡的生产性能,酶制剂与抗菌肽联合添加效果优于酶制剂或抗菌肽单独添加。 展开更多

关键词 藏鸡 酶制剂 抗菌肽 抗氧化 免疫

在线阅读 下载PDF 职称材料

工程益生菌的研究进展 被引量：1

7

作者 叶忠明 李琬仪 +3 位作者 且华敏 余青婷 帅戟 王远微 《四川畜牧兽医》 2024年第10期38-42,共5页

工程益生菌是基因编辑技术创造出的一种新型微生物,是对原有益生菌性能的改良。随着基因编辑工具的不断发展和技术的进步,益生菌的工程改造正变得越来越多样化。本文主要论述近年来工程益生菌的构建方法,基因重组技术在工程益生菌中的应... 工程益生菌是基因编辑技术创造出的一种新型微生物,是对原有益生菌性能的改良。随着基因编辑工具的不断发展和技术的进步,益生菌的工程改造正变得越来越多样化。本文主要论述近年来工程益生菌的构建方法,基因重组技术在工程益生菌中的应用,工程益生菌在疾病防治方面的应用进展,以期为新型工程益生菌的构建提供参考。 展开更多

关键词 工程益生菌 基因重组 抗炎 抗肿瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

饲粮中添加酶制剂和抗菌肽对藏鸡肠道内源酶活性的影响

8

作者 王韩可 冯卫东 +3 位作者 郑玉才 李志雄 倪建华 饶开晴 《天津农学院学报》 CAS 2024年第5期46-51,共6页

试验旨在探究饲粮中添加非淀粉多糖(Non-starch polysaccharides,NSP)复合酶制剂、抗菌肽及酶肽复合剂对21~63日龄藏鸡小肠内源酶活性的影响。选取体重相近的14日龄藏鸡240只,随机分为4组,即基础饲粮组(对照组)、酶制剂组、抗菌肽组和... 试验旨在探究饲粮中添加非淀粉多糖(Non-starch polysaccharides,NSP)复合酶制剂、抗菌肽及酶肽复合剂对21~63日龄藏鸡小肠内源酶活性的影响。选取体重相近的14日龄藏鸡240只,随机分为4组,即基础饲粮组(对照组)、酶制剂组、抗菌肽组和酶肽复合组。预饲7天,42、63日龄采集藏鸡十二指肠、空肠、回肠肠道内容物,检测各组食糜中α-淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶活性。结果显示,与对照组相比,在42日龄时,酶肽复合添加显著提高了藏鸡小肠α-淀粉酶、糜蛋白酶活性及十二指肠和回肠脂肪酶活性(P<0.05);酶制剂显著提高了藏鸡十二指肠、回肠α-淀粉酶活性和空肠、回肠脂肪酶活性(P<0.05);在63日龄时,酶肽复合添加显著提高了藏鸡小肠糜蛋白酶活性,显著提高了十二指肠和回肠α-淀粉酶活性及十二指肠、空肠脂肪酶活性(P<0.05);酶制剂显著提高了藏鸡小肠脂肪酶活性及十二指肠、回肠α-淀粉酶活性(P<0.05);而抗菌肽对藏鸡小肠内源酶活性无显著影响(P>0.05)。结果表明,酶制剂单独添加及酶制剂和抗菌肽联合添加均能显著增强藏鸡小肠内源酶活性,且联合添加效果优于酶制剂单独添加。 展开更多

关键词 酶制剂 抗菌肽 藏鸡 肠道内源酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

羊口疮、小反刍兽疫、羊痘病毒三重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及应用

9

作者 朱成 田芯源 +4 位作者 陈易 余燕岐 王宪军 朱江江 向华 《四川畜牧兽医》 2024年第10期33-37,40,共6页

为建立一种羊口疮病毒(ORFV)、山羊痘病毒(GTPV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)三种病原的联合共检方法,以ORFV、GTPV和PPRV基因序列为模板,克隆得ORFV-B2L、GTPV-p32、PPRV-N基因序列,并构建三种病原核酸标准品,设计三对探针,建立ORFV、GTPV和... 为建立一种羊口疮病毒(ORFV)、山羊痘病毒(GTPV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)三种病原的联合共检方法,以ORFV、GTPV和PPRV基因序列为模板,克隆得ORFV-B2L、GTPV-p32、PPRV-N基因序列,并构建三种病原核酸标准品,设计三对探针,建立ORFV、GTPV和PPRV三重TaqMan荧光定量PCR方法,然后对方法的检测条件进行优化及质量评价,并作临床初步验证。结果显示:所建立的ORFV、GTPV和PPRV三重TaqMan荧光定量PCR方法的特异性好,ORFV、PPRV和GTPV最低检测限值分别为2.98×101、3.81×101、6.68×10^(1)copies/μL;稳定性好,与商品化检测试剂盒和OIE标准相比具有较高的检测符合率;对279份临床样本作检测,ORFV、PPRV和GTPV的阳性检出率分别为34%、4.3%、2.5%,ORFV和GTPV的混合感染率为2.5%。 展开更多

关键词 羊口疮病毒(ORFV) 小反刍兽疫病毒(PPRV) 羊痘病毒(GTPV) 多重TaqMan荧光定量PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

川西北牦牛3种病毒性腹泻病血清学调查 被引量：22

10

作者 何美琳 张焕容 +3 位作者 王永 王言轩 王远微 汤承 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期248-251,共4页

本研究旨在了解川西北牦牛病毒性腹泻病的流行情况,为防制这类疫病提供一定科学依据。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对来源于川西北阿坝州8县的1070份牦牛血清中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛冠状病毒(bovine ... 本研究旨在了解川西北牦牛病毒性腹泻病的流行情况,为防制这类疫病提供一定科学依据。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对来源于川西北阿坝州8县的1070份牦牛血清中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCV)和牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)进行了抗体检测。结果显示,BVDV、BCV和BRV抗体平均阳性率分别为44.3%、84.1%和94.4%。结果表明,BVDV、BCV和BRV感染在川西北牦牛中普遍存在,需进一步加强该地区牦牛病毒性腹泻疾病的综合防制。 展开更多

关键词 牦牛 牛病毒性腹泻病毒 牛冠状病毒 牛轮状病毒 抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸡源奇异变形杆菌的分离鉴定及系统进化分析 被引量：11

11

作者 周芳 冉丹丹 +2 位作者 刘飞 汤承 岳华 《动物医学进展》 北大核心 2015年第7期29-32,共4页

从四川成都某大型养鸡场发病雏鸡的肝脏中分离到2株细菌,并对其进行细菌形态学观察、生化反应、16SrRNA扩增和药敏试验等。结果显示,该分离菌为奇异变形杆菌;药敏试验证实该菌对多种抗菌药物具有抗性,并且呈现多重耐药性;人工感染试验... 从四川成都某大型养鸡场发病雏鸡的肝脏中分离到2株细菌,并对其进行细菌形态学观察、生化反应、16SrRNA扩增和药敏试验等。结果显示,该分离菌为奇异变形杆菌;药敏试验证实该菌对多种抗菌药物具有抗性,并且呈现多重耐药性;人工感染试验复制出与自然感染相同的病例,主要表现为腹泻和脑炎,并从肝、脑等实质器官回收到奇异变形杆菌,证明该菌是引起雏鸡发病的主要原因。系统发育分析表明国内鸡源的奇异变形杆菌分为不同的两大支,本试验从同一鸡场分离的2株菌聚在两个不同的分支,表明同一鸡场的奇异变形杆菌分离株也存在着遗传多样性,同时与人、牛、鹅等其他来源的奇异变形杆菌存在密切的遗传关系,其公共卫生学意义值得注意。 展开更多

关键词 鸡 奇异变形杆菌 分离鉴定 系统进化分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于基因C型鸭甲肝病毒VP1重组蛋白的鸭甲肝病毒抗体ELISA检测方法的建立 被引量：5

12

作者 杨发龙 张焕容 +2 位作者 程方明 岳华 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1148-1153,共6页

以纯化的基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1重组蛋白作为包被抗原,建立检测DHAV-C抗体的间接ELISA方法。结果表明,试验的最佳条件:用pH9.6、0.05 mol·L-1的碳酸盐缓冲液将包被抗原稀释成5μg·mL-1,4℃包被过夜,抗体稀释度为1∶100... 以纯化的基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1重组蛋白作为包被抗原,建立检测DHAV-C抗体的间接ELISA方法。结果表明,试验的最佳条件:用pH9.6、0.05 mol·L-1的碳酸盐缓冲液将包被抗原稀释成5μg·mL-1,4℃包被过夜,抗体稀释度为1∶100,HRP酶标羊抗鸭IgG稀释度为1∶5 000,封闭液为含10%脱脂乳的0.01mol·L-1 PBS,37℃封闭2h,血清稀释液为含1%BSA的PBS,抗体反应时间为60min,酶标羊抗鸭IgG反应时间为30min,底物作用时间为15min,临界值为OD450nm≥0.474。该方法重复性好,批内变异系数为2.03%~2.95%,批间变异系数为3.28%~7.38%,与鸭圆环病毒(DUCV)、鸭乙型肝炎病毒(DHBV)、鸭瘟病毒(DPV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、鸭抗大肠杆菌、鸭抗金黄色葡萄球菌、鸭抗沙门菌、鸭抗禽多杀性巴氏杆菌以及鸭疫里默杆菌阳性血清无交叉反应,而与基因A型鸭甲肝病毒(DHAV-A)阳性血清有交叉反应,表明该方法可以作为检测DHAV-C和DHAV-A抗体的通用ELISA方法。与中和试验相比,阳性血清检测符合率为80%,阴性血清检测符合率为100%。初步临床应用表明:该方法可用于雏鸭母源抗体和免疫后抗体消长的检测。本研究基于DHAV-C VP1重组蛋白建立的间接ELISA方法可用于基因A型和C型鸭甲型肝炎的血清流行病学调查和抗体检测。 展开更多

关键词 基因C型鸭甲肝病毒 VP1蛋白 间接ELISA 抗体检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

基因C型鸭甲肝病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立 被引量：5

13

作者 何美琳 张焕容 +2 位作者 程方明 杨晓农 岳华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期211-215,共5页

为建立检测基因C型鸭甲肝病毒（DHAV-C）血清抗体的方法,本研究以纯化的DHAV-C作为包被抗原,抗DHAV-C单克隆抗体（MAb）5E3-9与待检血清竞争结合抗原,采用方阵法确定包被抗原、MAb及待检血清的最佳工作浓度,经过对反应条件的优化,建立了... 为建立检测基因C型鸭甲肝病毒（DHAV-C）血清抗体的方法,本研究以纯化的DHAV-C作为包被抗原,抗DHAV-C单克隆抗体（MAb）5E3-9与待检血清竞争结合抗原,采用方阵法确定包被抗原、MAb及待检血清的最佳工作浓度,经过对反应条件的优化,建立了DHAV-C抗体的竞争ELISA检测方法。该方法仅对DHAV-C血清检测为阳性,与DHAV-A、鸭圆环病毒、鸭乙型肝炎病毒等相关病原的鸭阳性血清无交叉反应。敏感性试验表明,标准阳性血清1：128倍稀释时,检测结果仍为阳性,比中和试验灵敏性更高。批内批间变异系数分别为4.64%~5.21%和6.02%~8.68%,具有良好的重复性。与中和试验比较,阳性符合率为100%（15/15）,阴性符合率为77.8%（14/18）。本研究基于纯化的DHAV-C及其特异性MAb建立的MAb竞争ELISA检测方法可以用于DHAV-C流行病学调查以及抗体的检测。 展开更多

关键词 基因C型鸭甲肝病毒 单克隆抗体 竞争ELISA 抗体检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

成都市区犬猫狂犬病病毒和弓形虫感染的调查 被引量：7

14

作者 张焕容 程方明 +1 位作者 杨发龙 杨金福 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第4期129-131,共3页

为了解四川省成都市区家养犬、猫狂犬病病毒及弓形虫的感染情况,采用商品化狂犬病病毒和弓形虫抗原快速检测试纸卡,对2010年8～10月间来自成都市区的103份家养犬以及75份家猫的唾液和血液样品进行检测;同时采用文献报道的PCR方法对家养... 为了解四川省成都市区家养犬、猫狂犬病病毒及弓形虫的感染情况,采用商品化狂犬病病毒和弓形虫抗原快速检测试纸卡,对2010年8～10月间来自成都市区的103份家养犬以及75份家猫的唾液和血液样品进行检测;同时采用文献报道的PCR方法对家养犬血液样品中的弓形虫核酸进行检测。结果显示,103份家养犬唾液样品狂犬病病毒抗原均为阴性,而75份家猫唾液样品中,检出阳性样品5份(阳性率6.7%),可疑样品7份;103份家养犬血液样品弓形虫抗原阳性样品33份(32.0%),可疑样品22份,75份家猫血液样品中,检出阳性样品2份(阳性率2.7%),可疑样品3份。弓形虫核酸PCR检测结果显示,96份家养犬血液样品弓形虫核酸阳性样品57份(阳性率59.4%),与弓形虫抗原阳性和可疑样品总和所占比例基本一致(53.4%)。提示应重视源于家猫的狂犬病病毒和家养犬弓形虫对人的威胁。 展开更多

关键词 犬 猫 狂犬病 弓形虫

在线阅读 下载PDF 职称材料

川西北牦牛传染性鼻气管炎血清学调查 被引量：7

15

作者 何美琳 张冰 +2 位作者 王远微 汤承 张焕容 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第1期130-132,共3页

旨在了解川西北地区牦牛传染性鼻气管炎的流行情况,为制定合理的防疫措施提供一定的科学依据。应用竞争性酶联免疫吸附试验(c-ELISA)对川西北阿坝州6县的460份牦牛血清中传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗体进行了检测。结果表明,460份牦牛血... 旨在了解川西北地区牦牛传染性鼻气管炎的流行情况,为制定合理的防疫措施提供一定的科学依据。应用竞争性酶联免疫吸附试验(c-ELISA)对川西北阿坝州6县的460份牦牛血清中传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗体进行了检测。结果表明,460份牦牛血清样品中,共检测出IBRV抗体阳性血清356份,平均阳性率为77.4%(356/460)。说明川西北地区牦牛感染IBRV普遍,需引起高度重视并采取有效的防治措施。 展开更多

关键词 牛传染性鼻气管炎 酶联免疫吸附试验 抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺炎支原体P109蛋白质分子特征、原核表达及其免疫反应性 被引量：8

16

作者 谢珊珊 黄金 杨发龙 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期824-828,共5页

为了研究绵羊肺炎支原体P109蛋白质的结构与功能,本试验对p109基因进行生物信息学分析,并对其部分基因片段进行了PCR扩增、克隆和原核表达,采用Western-blot方法对其免疫反应性进行分析。结果显示,P109基因与猪肺炎支原体黏附相关基因mh... 为了研究绵羊肺炎支原体P109蛋白质的结构与功能,本试验对p109基因进行生物信息学分析,并对其部分基因片段进行了PCR扩增、克隆和原核表达,采用Western-blot方法对其免疫反应性进行分析。结果显示,P109基因与猪肺炎支原体黏附相关基因mhp384高度同源。重组蛋白质在大肠杆菌Rosetta(DE3)工程菌中成功获得表达,以包涵体的形式存在;经纯化的重组蛋白质与山羊抗绵羊肺炎支原体全菌血清发生结合反应,表明P109蛋白质是绵羊肺炎支原体的免疫原之一。 展开更多

关键词 绵羊肺炎支原体 P109蛋白质 原核表达 免疫反应性

在线阅读 下载PDF 职称材料

藏系绵羊源沙门菌和产志贺毒素大肠埃希菌的分离与PCR鉴定 被引量：5

17

作者 张冰 张焕容 +1 位作者 汤承 王永 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第4期13-18,18+17,共6页

为研究外观健康藏系绵羊携带沙门菌和产志贺毒素大肠埃希菌情况,对采自外观健康藏系绵羊的19份肛门拭子进行大肠埃希菌和沙门菌分离鉴定。用选择性培养基及普通PCR方法共分离鉴定出1株沙门菌和13株大肠埃希菌,其中产志贺毒素大肠埃希菌4... 为研究外观健康藏系绵羊携带沙门菌和产志贺毒素大肠埃希菌情况,对采自外观健康藏系绵羊的19份肛门拭子进行大肠埃希菌和沙门菌分离鉴定。用选择性培养基及普通PCR方法共分离鉴定出1株沙门菌和13株大肠埃希菌,其中产志贺毒素大肠埃希菌4株,3株含有产志贺毒素基因Stx 1,1株含有产志贺毒素基因Stx 2,沙门菌invA基因和产志贺毒素大肠埃希菌Stx基因同源性分析表明,分离株沙门菌的invA与NCBI上已登录的5种血清型沙门菌核苷酸序列同源性为99.8%,4株产志贺毒素大肠埃希菌与NCBI上已登录菌株的核苷酸序列同源性都大于95%。本研究结果为高原地区藏系绵羊源沙门菌和产志贺毒素大肠埃希菌的流行病学调查奠定了基础。 展开更多

关键词 藏系绵羊 大肠埃希菌 产志贺毒素大肠埃希菌 沙门菌 分离与鉴定 PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

基因C型鸭甲肝病毒VP1基因的克隆及原核表达 被引量：3

18

作者 皮晋魁 聂培婷 +2 位作者 黄秋雪 岳华 张焕容 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期740-742,共3页

为原核表达基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1重组蛋白,本研究通过设计套式PCR引物,RT-PCR扩增DHAV-C VP1全基因,约为720 bp,将其亚克隆至pET-32a(+)载体中构建重组表达质粒pET-VP1。将其转化E.coli Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达了约47 k... 为原核表达基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1重组蛋白,本研究通过设计套式PCR引物,RT-PCR扩增DHAV-C VP1全基因,约为720 bp,将其亚克隆至pET-32a(+)载体中构建重组表达质粒pET-VP1。将其转化E.coli Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达了约47 ku的重组蛋白。Western blot分析表明,该重组蛋白可以与兔抗DHAV-C阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。 展开更多

关键词 基因C型鸭甲肝病毒 VP1基因 原核表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

禽传染性喉气管炎病毒体内外感染模型中鸡Toll样受体21 mRNA转录水平的研究 被引量：2

19

作者 张焕容 陈世界 +3 位作者 皮晋魁 岳华 刘征鑫 汤承 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期965-969,共5页

为研究病毒与机体的相互作用,本研究参考GenBank中鸡Toll样受体21(ChTLR21)的基因序列设计实时定量PCR特异性引物,以鸡核糖体蛋白L4(RPL4)为内参基因,建立检测ChTLR21 mRNA相对转录水平的实时定量PCR方法,分析ChTLR21在禽传染性喉气管... 为研究病毒与机体的相互作用,本研究参考GenBank中鸡Toll样受体21(ChTLR21)的基因序列设计实时定量PCR特异性引物,以鸡核糖体蛋白L4(RPL4)为内参基因,建立检测ChTLR21 mRNA相对转录水平的实时定量PCR方法,分析ChTLR21在禽传染性喉气管炎病毒(ILTV)感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)中和感染SPF雏鸡免疫器官脾脏、法氏囊和胸腺组织中的转录水平。结果显示:ILTV感染CEF后2 h、4 h、8 h和18 h时间点ChTLR21 mRNA转录水平分别为未感染对照细胞的1 540.53、0.98、1.19和3.70倍。但仅在ILTV感染2 h时引起ChTLR21转录水平升高,与对照组相比差异显著(p<0.05)。ILTV感染SPF雏鸡后6 h、24 h和30 h脾脏中ChTLR21 mRNA转录水平分别为未感染对照的56.34、59.85和3.61倍;法氏囊中分别为0.03、25.98和3.08倍;胸腺中分别为2.52、50和7.32倍。在感染初期,脾脏中ChTLR21转录量显著升高,随后有所降低,但均高于未感染对照(p<0.05);法氏囊中仅在感染6 h时呈显著抑制(p<0.01);胸腺中呈波动性转录水平升高,但与对照组无统计学差异(p>0.05)。本研究证明ChTLR21参与了鸡体对ILTV感染的应答,并在体内外感染模型中呈现不同的表达规律。 展开更多

关键词 禽传染性喉气管炎病毒 鸡Toll样受体21 鸡胚成纤维细胞 SPF雏鸡 实时荧光定量PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

4种佐剂对绵羊肺炎支原体的免疫辅佐效力研究 被引量：5

20

作者 费磊 岳华 汤承 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期220-223,共4页

不同种类的佐剂对同种抗原的免疫辅佐效力不同。为筛选绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)灭活疫苗的理想佐剂,本研究制备了4种不同佐剂的MO灭活疫苗,分别免疫成年家兔,用MO间接血凝试剂盒测定免疫后1～9周血清抗体效价。检... 不同种类的佐剂对同种抗原的免疫辅佐效力不同。为筛选绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)灭活疫苗的理想佐剂,本研究制备了4种不同佐剂的MO灭活疫苗,分别免疫成年家兔,用MO间接血凝试剂盒测定免疫后1～9周血清抗体效价。检测结果显示,4种疫苗在免疫后都能迅速产生抗体,其中用MO Buonavoglial’s和ISA-760佐剂疫苗免疫家兔,产生抗体均于免疫后第3周达到高峰((5.67±0.70)log2,6.00log2),到第9周时维持抗体高峰(6.00log2,(6.00±1.00)log2);MO ISA-206和白油佐剂疫苗免疫抗体均于免疫后第4周达到高峰((4.33±0.57)log2,5.00log2),至第9周下降约1个滴度。统计学分析结果显示,ISA-760、Buonavoglial’s佐剂对MO的免疫增强效力显著优于ISA-206和白油佐剂(P<0.05),是MO灭活疫苗的理想候选佐剂,为高效MO灭活疫苗的研发提供了科学依据。 展开更多

关键词 绵羊肺炎支原体 灭活疫苗 免疫效力 佐剂

在线阅读 下载PDF 职称材料