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牛诺瓦病毒和牛轮状病毒双重RAA-LFD快速检测方法的建立及应用
被引量：
3
1
作者
李惠惠
董可儿
+6 位作者
刘馨博
张春晓
马超
陈利苹
钟旗
姚刚
马雪连
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期406-412,共7页
为建立能同时检测牛诺瓦病毒(bovine norovirus,BNoV)和牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)的重组酶辅助扩增-侧流层析试纸条(recombinase aided amplification-lateral flow dipstick,RAA-LFD)快速检测方法。本试验按照RAA引物探针设计...
为建立能同时检测牛诺瓦病毒(bovine norovirus,BNoV)和牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)的重组酶辅助扩增-侧流层析试纸条(recombinase aided amplification-lateral flow dipstick,RAA-LFD)快速检测方法。本试验按照RAA引物探针设计原则,分别针对BNoV RdRp基因和BRV VP7基因的保守区设计引物和探针,制备标准重组质粒,建立并优化RAA-LFD反应体系,同时对该检测方法进行特异性、敏感性及重复性评估,用建立的RAA-LFD法与PCR法、qPCR法分别对采集的168份腹泻犊牛的临床样本进行平行检测。结果显示,该方法可在20 min,39℃的条件下扩增目标片段,对BNoV和BRV敏感度均为103 copies·μL^(-1),与PCR的检测结果基本一致,且与牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)无交叉反应,虽低于qPCR检测结果,但可通过肉眼直接观察试纸条的检测结果。综上所述,RAA-LFD法灵敏度较高、且简便、快速、同时不依赖于仪器、专业操作人员,适用于现场检测。
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关键词
牛诺瓦病毒
牛轮状病毒
重组酶介导扩增
侧向流试纸条
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职称材料
题名
牛诺瓦病毒和牛轮状病毒双重RAA-LFD快速检测方法的建立及应用
被引量：
3
1
作者
李惠惠
董可儿
刘馨博
张春晓
马超
陈利苹
钟旗
姚刚
马雪连
机构
新疆农业大学
动物
医学学院
动物保健与畜产品质量安全研究实验室
乌鲁木齐市
动物
园
深圳市真瑞生物有限公司
新疆畜牧科学院兽医
研究
所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期406-412,共7页
基金
国家自然科学基金(32002251)
肉生高效健康饲养技术集成研究与示范(2021A02003-1)。
文摘
为建立能同时检测牛诺瓦病毒(bovine norovirus,BNoV)和牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)的重组酶辅助扩增-侧流层析试纸条(recombinase aided amplification-lateral flow dipstick,RAA-LFD)快速检测方法。本试验按照RAA引物探针设计原则,分别针对BNoV RdRp基因和BRV VP7基因的保守区设计引物和探针,制备标准重组质粒,建立并优化RAA-LFD反应体系,同时对该检测方法进行特异性、敏感性及重复性评估,用建立的RAA-LFD法与PCR法、qPCR法分别对采集的168份腹泻犊牛的临床样本进行平行检测。结果显示,该方法可在20 min,39℃的条件下扩增目标片段,对BNoV和BRV敏感度均为103 copies·μL^(-1),与PCR的检测结果基本一致,且与牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)无交叉反应,虽低于qPCR检测结果,但可通过肉眼直接观察试纸条的检测结果。综上所述,RAA-LFD法灵敏度较高、且简便、快速、同时不依赖于仪器、专业操作人员,适用于现场检测。
关键词
牛诺瓦病毒
牛轮状病毒
重组酶介导扩增
侧向流试纸条
Keywords
bovine norovirus
bovine rotavirus
recombinant enzyme-mediated amplification
lateral flow test strips
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
牛诺瓦病毒和牛轮状病毒双重RAA-LFD快速检测方法的建立及应用
李惠惠
董可儿
刘馨博
张春晓
马超
陈利苹
钟旗
姚刚
马雪连
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
3
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