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猪细小病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立
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作者 仇德洋 郑佳 +8 位作者 曹志 李铭凯 巩立媛 姚方方 杜建才 李国超 赵欣如 李占坤 吕延飞 《中国动物检疫》 2025年第10期109-114,共6页
为创建一种快速准确的猪细小病毒(PPV)检测方法,根据PPV NS1基因保守序列设计引物与探针,建立了特异、敏感且可绝对定量的TaqMan实时荧光定量PCR方法。该方法的检测Ct值与标准质粒浓度(1.08×10^(7)~1.08×10^(1)copies/μL)具... 为创建一种快速准确的猪细小病毒(PPV)检测方法,根据PPV NS1基因保守序列设计引物与探针,建立了特异、敏感且可绝对定量的TaqMan实时荧光定量PCR方法。该方法的检测Ct值与标准质粒浓度(1.08×10^(7)~1.08×10^(1)copies/μL)具有良好的线性关系,Y=-3.4475x+35.057,相关系数R^(2)=0.9975;灵敏度高,对PPV质粒最低检测限为1.08×10~1 copies/μL;重复性好,对1.08×10^(7)、1.08×10^(4)、1.08×10^(2)copies/μL标准质粒批内与批间重复性试验变异系数均低于1%;特异性强,不与猪瘟病毒(CFSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)发生交叉反应;与巢式PCR方法同步检测临床样品的总符合率为99%。结果表明,本试验建立的方法特异性强、敏感性高,为PPV感染的实验室诊断及流行病学调查提供了重要的技术支持。 展开更多
关键词 猪细小病毒 NS1蛋白 TaqMan实时定量荧光PCR
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