时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用 被引量：19

1

作者 李静 李培武 +3 位作者 张奇 丁小霞 张文 张兆威 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期256-262,共7页

采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品... 采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品瓶建立的检测技术。时间分辨荧光速测仪可内置标准曲线,直接输出检测结果。对6种油料饼粕做黄曲霉毒素B1添加回收率实验,回收率在70%~120%之间,批间、批内变异系数〈15%。在实际样品的检测中,时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术与液相色谱-串联质谱法相比,检测结果相对误差〈15%。时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术测定快速、准确,技术稳定、可靠,设备经济、小型,适用于大批量油料饼粕样品的快速检测和风险评估。 展开更多

关键词 油料饼粕 黄曲霉毒素B1 时间分辨荧光免疫层析试纸条 时间分辨荧光速测仪 定量检测

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石墨烯吸附材料及其在真菌毒素检测中的应用 被引量：12

2

作者 喻理 李培武 +5 位作者 张奇 丁小霞 张文 张兆威 张良晓 毛劲 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1204-1212,共9页

石墨烯类纳米材料作为一种近十年来兴起的新型吸附材料,被广泛应用于各种有毒有害物质的去除和检测研究。真菌毒素是污染粮油食品的主要危害因子之一,其检测技术研究常常受样品前处理方法的限制。该文介绍了目前作为吸附剂的石墨烯类纳... 石墨烯类纳米材料作为一种近十年来兴起的新型吸附材料,被广泛应用于各种有毒有害物质的去除和检测研究。真菌毒素是污染粮油食品的主要危害因子之一,其检测技术研究常常受样品前处理方法的限制。该文介绍了目前作为吸附剂的石墨烯类纳米材料及其样品前处理技术,总结了其在真菌毒素检测中的最新应用进展。 展开更多

关键词 石墨烯 吸附剂 真菌毒素 样品前处理技术 应用 综述

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量子点标记荧光免疫法检测花生中黄曲霉毒素B_1 被引量：17

3

作者 李园园 李培武 +3 位作者 张奇 张文 丁小霞 张兆威 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期438-442,共5页

建立了基于量子点标记二抗的间接竞争荧光免疫吸附测定方法(indirect competitive fluorescence-linked immunosorbent assay,cFLISA),并研究检测花生中黄曲霉毒素B1的可行性。采用谷胱甘肽为稳定剂,在水相中直接合成碲化镉(CdTe)量子点... 建立了基于量子点标记二抗的间接竞争荧光免疫吸附测定方法(indirect competitive fluorescence-linked immunosorbent assay,cFLISA),并研究检测花生中黄曲霉毒素B1的可行性。采用谷胱甘肽为稳定剂,在水相中直接合成碲化镉(CdTe)量子点,并利用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)与兔抗鼠二抗进行共价偶联,以黄曲霉毒素B1的单克隆抗体建立cFLISA方法。结果表明,该方法的灵敏度和最低检测限值分别为0.023ng/mL和0.001ng/mL,与传统的有机染料FITC-二抗法比较,灵敏度提高了30倍,花生样品加标0.1、0.05和0.025ng/g,回收率范围在88%～116%之间,变异系数均小于10%。建立的cFLISA方法可以较好的检测花生中黄曲霉毒素B1,并为其它真菌毒素的检测提供参考。 展开更多

关键词 碲化镉量子点 荧光免疫测定 黄曲霉毒素B1 花生

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农产品中赭曲霉毒素A免疫层析试纸条快速检测技术研究 被引量：10

4

作者 李鑫 李培武 +3 位作者 张奇 张文 丁小霞 唐晓倩 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期648-652,共5页

基于胶体金免疫层析原理建立了一种快速检测赭曲霉毒素A(ochrotaxin A,OTA)的胶体金试纸条的研制方法,包括胶体金的制备、金标记探针的制备、试纸条各条件参数的测试和优化等。试纸条检测OTA的肉眼可视检测限为0.25ng/mL,检测时间为10m... 基于胶体金免疫层析原理建立了一种快速检测赭曲霉毒素A(ochrotaxin A,OTA)的胶体金试纸条的研制方法,包括胶体金的制备、金标记探针的制备、试纸条各条件参数的测试和优化等。试纸条检测OTA的肉眼可视检测限为0.25ng/mL,检测时间为10min,试纸条能特异性识别OTA而不与赭曲霉毒素B及其他真菌毒素发生交叉反应,使用简单、方便、成本低,重复性好,保质期长,尤其适用于农产品中OTA的现场快速筛查。 展开更多

关键词 赭曲霉毒素A 胶体金 免疫层析 试纸条 快速检测

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能力验证中粮油真菌毒素检测技术研究进展 被引量：10

5

作者 王秀嫔 李培武 +3 位作者 张奇 马飞 张文 赵汗青 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期650-656,共7页

完善的实验室能力验证体系是确保真菌毒素检测机构出具准确检测结果的重要前提。本文重点阐述了国内外真菌毒素实验室能力验证的现状,详细介绍了在真菌毒素能力验证中使用的检测技术研究进展。以Z比分数法评价由比利时联邦药物和农业化... 完善的实验室能力验证体系是确保真菌毒素检测机构出具准确检测结果的重要前提。本文重点阐述了国内外真菌毒素实验室能力验证的现状,详细介绍了在真菌毒素能力验证中使用的检测技术研究进展。以Z比分数法评价由比利时联邦药物和农业化学研究中心(CODA-CERVA)组织的粮油多种真菌毒素含量测定的国际比对结果,分析粮油样品中多种真菌毒素的测定情况。 展开更多

关键词 粮油样品 真菌毒素 能力验证 Z比分数法

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农产品与饲料中T-2毒素免疫亲和柱净化-液相色谱串联质谱检测技术研究 被引量：7

6

作者 李静 马飞 +3 位作者 李培武 张奇 丁小霞 张文 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1095-1101,共7页

利用T-2毒素单克隆抗体2G7和CNBr活化的Sepharose 4B研制出T-2免疫亲和柱，考察了T-2免疫亲和柱的最佳应用条件。利用免疫亲和柱，建立了农产品与饲料中T-2毒素免疫亲和柱净化/液相色谱-串联质谱（ IAC/LC-MS/MS）确证性检测技术，并考... 利用T-2毒素单克隆抗体2G7和CNBr活化的Sepharose 4B研制出T-2免疫亲和柱，考察了T-2免疫亲和柱的最佳应用条件。利用免疫亲和柱，建立了农产品与饲料中T-2毒素免疫亲和柱净化/液相色谱-串联质谱（ IAC/LC-MS/MS）确证性检测技术，并考察该方法的准确度和精密度。结果表明，T-2毒素在0.5-500.0 ng/g范围内线性关系良好，相关系数为0.9997，检出限为0.05 ng/g，定量下限为0.17 ng/g。大米、玉米、饲料样品在T-2毒素10，50，100 ng/g的加标水平下，回收率为92.9％-109.7％，相对标准偏差为2.1％-8.3％。对市售36份农产品与饲料样品进行测定，检测结果的相对标准偏差均小于10.0％。 展开更多

关键词 T-2毒素 免疫亲和柱 定量分析 农产品与饲料

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黄曲霉毒素B_1标准替代物的制备及其在花生样品检测中的应用 被引量：4

7

作者 管笛 李培武 +2 位作者 张奇 张文 丁小霞 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期503-506,共4页

以抗黄曲霉毒素B1(AFB1)单克隆抗体的F(ab')2片段为抗原免疫兔子,得到AFB1抗独特型抗体。经过酶联免疫吸附法(ELISA)条件的优化,建立AFB1抗独特型抗体最佳竞争抑制曲线。该曲线与AFB1竞争抑制曲线相比较可知,AFB1抗独特型抗体与AFB... 以抗黄曲霉毒素B1(AFB1)单克隆抗体的F(ab')2片段为抗原免疫兔子,得到AFB1抗独特型抗体。经过酶联免疫吸附法(ELISA)条件的优化,建立AFB1抗独特型抗体最佳竞争抑制曲线。该曲线与AFB1竞争抑制曲线相比较可知,AFB1抗独特型抗体与AFB1之间存在指数增长关系,且相关性系数R为0.999 8。以AFB1抗独特型抗体浓度与其相应的抑制率作标准曲线,ELISA法测定花生中AFB1添加回收率,范围在90.4%～100.2%之间。综上,AFB1抗独特型抗体可以作为AFB1无毒替代标准品。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 抗独特型抗体 替代物 花生

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基于碳纳米材料的黄曲霉毒素电化学检测方法研究现状 被引量：4

8

作者 喻理 马飞 +3 位作者 赵安顺 白艺珍 李董 李培武 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期281-290,共10页

黄曲霉毒素是已知真菌毒素中毒性最强的一类。与传统检测方法相比,电化学检测方法因仪器简单、易操作、灵敏度高、选择性好、响应快等优点更受研究者青睐。早期黄曲霉毒素电化学检测方法在抗体固定、信号传输等方面存在不足,为此,碳纳... 黄曲霉毒素是已知真菌毒素中毒性最强的一类。与传统检测方法相比,电化学检测方法因仪器简单、易操作、灵敏度高、选择性好、响应快等优点更受研究者青睐。早期黄曲霉毒素电化学检测方法在抗体固定、信号传输等方面存在不足,为此,碳纳米材料在过去几年被广泛应用其中,具有提升电子传输和界面电催化性能、固定生物识别分子等多重作用,大大改进分析性能。该文总结了当前应用在黄曲霉毒素电化学检测上的三类主要碳纳米材料(石墨烯、碳纳米管和碳颗粒)及应用通用模式,将碳纳米材料与贵金属、电活性物质(如离子液体或导电聚合物)、生物识别材料(抗体或适配体)的一种或多种结合沉积到电极上,通过不同电信号响应建立检测方法。该文总结了现有研究的不足并展望了未来的研究方向,旨在为选择合适的碳纳米材料及其应用方式以提升分析性能提供参考。 展开更多

关键词 碳纳米材料 黄曲霉毒素 电化学 检测 应用

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液相芯片及其在粮油主要真菌毒素同步检测中的应用 被引量：4

9

作者 李鑫 李培武 +2 位作者 张奇 张文 张兆威 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期449-454,共6页

液相芯片整合了分子生物学、免疫学、高分子材料、微流控技术、高速数字信号处理、计算机分析等多方面技术,可实现少量样本高通量定性定量检测。本文主要阐述液相芯片定性与定量分析的基本原理、特点及其在分析领域的应用现状,探讨液相... 液相芯片整合了分子生物学、免疫学、高分子材料、微流控技术、高速数字信号处理、计算机分析等多方面技术,可实现少量样本高通量定性定量检测。本文主要阐述液相芯片定性与定量分析的基本原理、特点及其在分析领域的应用现状,探讨液相芯片在小分子高通量分析中的工作模式及其当前技术难点,分析黄曲霉毒素等粮油主要真菌毒素免疫分析研究进展,指出液相芯片在粮油主要真菌毒素检测中将有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 液相芯片 粮食油料 真菌毒素 高通量 同步检测

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氯化钙对花生中黄曲霉毒素B_1提取及其快速检测结果的影响 被引量：3

10

作者 李敏 陈冉 +4 位作者 李培武 张奇 张文 王督 李冉 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期117-121,共5页

以氯化钙为蛋白沉淀剂、黄曲霉毒素B1为靶标,探究了70%甲醇水(V/V)提取液中不同含量氯化钙对花生中黄曲霉毒素提取及其免疫检测结果的影响;采用样品加标回收的方法,研究比较了五种不同含量氯化钙对胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测结果... 以氯化钙为蛋白沉淀剂、黄曲霉毒素B1为靶标,探究了70%甲醇水(V/V)提取液中不同含量氯化钙对花生中黄曲霉毒素提取及其免疫检测结果的影响;采用样品加标回收的方法,研究比较了五种不同含量氯化钙对胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测结果的影响。研究结果表明,样品经含1%CaCl2(m/V)的甲醇水处理后,用胶体金免疫层析试纸条检测时,试纸条T线颜色梯度变化,不同浓度加标回收率等参数均得到明显改善,前处理效果显著;选取20份花生实际样品,经过这种前处理之后,进行胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测,同时将其检测结果与免疫亲和层析高效液相色谱法(IAC-HPLC)进行比对,胶体金免疫层析试纸条与IAC-HPLC检测结果符合率为90%,间接竞争ELISA与IAC-HPLC检测结果相关系数达0.996,表明本研究所改进的样品前处理方法能提高免疫检测准确度,具有很好的应用性。 展开更多

关键词 花生 黄曲霉毒素B1 氯化钙 胶体金免疫层析 ELISA

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量子点探针应用于粮油中黄曲霉毒素免疫检测的研究 被引量：5

11

作者 许琳 张兆威 +2 位作者 李培武 张奇 张文 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期119-123,共5页

为改良检测技术,拓宽量子点探针在农产品安全领域的应用范围,制备了用于粮油中黄曲霉毒素检测的2种量子点探针,即碳量子点(CQD)探针和石墨烯量子点(GQD)荧光免疫探针,研究2种探针应用于黄曲霉毒素检测中的可行性。采用绿色合成方法,发现... 为改良检测技术,拓宽量子点探针在农产品安全领域的应用范围,制备了用于粮油中黄曲霉毒素检测的2种量子点探针,即碳量子点(CQD)探针和石墨烯量子点(GQD)荧光免疫探针,研究2种探针应用于黄曲霉毒素检测中的可行性。采用绿色合成方法,发现以0.375g/m L柠檬酸水溶液中获得的石墨烯量子点荧光强度最强。利用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCL)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),将碳量子点和GQD与抗黄曲霉毒素的单克隆抗体1C11进行共价偶联,发现偶联前后量子点的荧光光谱变化趋势一致,而且偶联后均保持了较好的荧光特性,因此均可作为黄曲霉毒素免疫检测的探针,且与抗体偶联后的碳量子点的荧光特性优于石墨烯量子点。 展开更多

关键词 碳量子点 石墨烯量子点 荧光免疫探针 黄曲霉毒素

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中国花生黄曲霉毒素风险评估中膳食暴露非参数概率评估方法 被引量：31

12

作者 丁小霞 李培武 +2 位作者 白艺珍 周海燕 印南日 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期402-408,共7页

基于2009年、2010年对全国13个花生主产省155个县市2 571份代表性花生样品检测分析获得的12 855个黄曲霉毒素检测数据,以及卫生部2002年、2004年中国居民营养与健康状况调查报告中膳食消费数据,采用Monte Carlo模拟和Bootstrap抽样方法... 基于2009年、2010年对全国13个花生主产省155个县市2 571份代表性花生样品检测分析获得的12 855个黄曲霉毒素检测数据,以及卫生部2002年、2004年中国居民营养与健康状况调查报告中膳食消费数据,采用Monte Carlo模拟和Bootstrap抽样方法量化人群花生黄曲霉毒素膳食暴露量的变异度和不确定度,构建了中国花生黄曲霉毒素风险评估中膳食暴露非参数概率评估模型,依据年龄段、地区间和收入水平差异的人群花生黄曲霉毒素膳食暴露量,分析了各暴露量分布的指标统计量和90%置信区间。评估结果显示,2～5岁儿童为花生黄曲霉毒素膳食摄入的高暴露人群,其高端暴露量(P97.5)中位值为每千克体重每天1.342ng(表示为ng.kg-1.d-1,下同),四分位间距为0.151ng.kg-1.d-1;18～45岁成人中,城市人群花生黄曲霉毒素膳食暴露量高于农村,其高端暴露量(P97.5)中位值为0.695ng.kg-1.d-1,四分位间距为0.078ng.kg-1.d-1;中等收入水平人群花生黄曲霉毒素膳食暴露量最高,其高端暴露量(P97.5)中位值为0.874ng.kg-1.d-1,四分位间距为0.086ng.kg-1.d-1。花生黄曲霉毒素膳食暴露非参数概率评估方法克服了点评估方法不能定量评估结果变异度和不确定度的缺点,结果更为精确。 展开更多

关键词 花生 黄曲霉毒素 非参数概率模型 膳食暴露 风险评估

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在线固相萃取富集-高效液相色谱法快速测定牛奶中黄曲霉毒素M_1 被引量：27

13

作者 丁俭 李培武 +2 位作者 李光明 王秀嫔 马飞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第10期289-293,共5页

目的:建立在线固相萃取富集-高效液相色谱法(On-line SPE-HPLC)测定牛奶中黄曲霉毒素M1。方法:固相萃取富集柱填料为SB-C18,上样溶剂和淋洗溶剂均为纯水,转移溶剂为乙腈-水(20:80,V/V),分析测定溶剂为乙腈-水(15:85,V/V)。结果:黄曲霉毒... 目的:建立在线固相萃取富集-高效液相色谱法(On-line SPE-HPLC)测定牛奶中黄曲霉毒素M1。方法:固相萃取富集柱填料为SB-C18,上样溶剂和淋洗溶剂均为纯水,转移溶剂为乙腈-水(20:80,V/V),分析测定溶剂为乙腈-水(15:85,V/V)。结果:黄曲霉毒素M1检测的线性方程为Y=2.52746X 0.067,相关系数为0.99906;检出限为0.04μg/kg;定量限为0.10μg/kg;基质4个水平添加回收率(n=6)在98%～105.7%;6次加标回收相对标准偏差在0.79%～2.56%。结论:此方法简便、准确、重现性好,能够满足对日常牛奶中黄曲霉毒素M1的定量检测。 展开更多

关键词 在线固相萃取富集 牛奶 高效液相色谱法 黄曲霉毒素M1

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胶体金免疫层析法快速定量分析粮油农产品中黄曲霉毒素B_1 被引量：18

14

作者 王督 张文 +4 位作者 李培武 张奇 张兆威 丁小霞 姜俊 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期529-532,共4页

采用自主研制的黄曲霉毒素B1胶体金免疫定量检测卡，建立花生、玉米、大米、小麦等粮油农产品中黄曲霉毒素B1的定量分析方法，4种样品检测的线性范围为1．0～20．0μg/kg，R2＞0．97，方法的定量限为1．0μg/kg，样品加标回收率为75％～... 采用自主研制的黄曲霉毒素B1胶体金免疫定量检测卡，建立花生、玉米、大米、小麦等粮油农产品中黄曲霉毒素B1的定量分析方法，4种样品检测的线性范围为1．0～20．0μg/kg，R2＞0．97，方法的定量限为1．0μg/kg，样品加标回收率为75％～106％，RSD＜20％。胶体金免疫层析法与免疫亲和柱净化-HPLC 法相比，相对误差＜15％，具有简便快速、灵敏度高、重现性好等特点，适用于粮油农产品及制品中黄曲霉毒素B1筛查，样品检测时间只需15min，检测成本低于其他方法。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 胶体金免疫层析 定量检测 单光谱成像

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花生黄曲霉毒素污染臭氧脱毒技术研究 被引量：14

15

作者 陈冉 李培武 +3 位作者 马飞 丁小霞 张文 张奇 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期92-96,共5页

研制了一种花生黄曲霉毒素污染臭氧脱毒专用装置,分析花生黄曲霉毒素污染的臭氧脱毒技术和脱毒效果,包括通气方式、臭氧浓度、处理时间和花生水分含量对脱毒的影响等。结果表明,下部通入臭氧气体,上部排气的方式下,臭氧浓度6.0mg/L、处... 研制了一种花生黄曲霉毒素污染臭氧脱毒专用装置,分析花生黄曲霉毒素污染的臭氧脱毒技术和脱毒效果,包括通气方式、臭氧浓度、处理时间和花生水分含量对脱毒的影响等。结果表明,下部通入臭氧气体,上部排气的方式下,臭氧浓度6.0mg/L、处理时间30min、花生水分含量为5%时脱毒效果最佳。在此条件下,花生中黄曲霉毒素总量和B1脱毒百分率分别为65.88%和65.90%,脱毒效果显著。花生黄曲霉毒素污染臭氧脱毒装置和技术操作简单、重现性好、环境友好,适用于花生及粮油制品黄曲霉毒素脱毒。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素 脱毒 装置 臭氧 花生 水分含量

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应用暴露限值法评估中国花生黄曲霉毒素风险 被引量：12

16

作者 白艺珍 丁小霞 +2 位作者 李培武 周海燕 印南日 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期211-216,共6页

应用暴露限值法(MOE,margin of exposure)评估黄曲霉毒素暴露风险。在取样检测我国产后花生黄曲霉毒素污染浓度数据和收集整理花生消费数据以及毒理学资料基础上,应用MOE法评估我国不同地区(城市和农村)、不同年龄组人群膳食摄入黄曲霉... 应用暴露限值法(MOE,margin of exposure)评估黄曲霉毒素暴露风险。在取样检测我国产后花生黄曲霉毒素污染浓度数据和收集整理花生消费数据以及毒理学资料基础上,应用MOE法评估我国不同地区(城市和农村)、不同年龄组人群膳食摄入黄曲霉毒素的致癌风险。评估结果显示:城市和农村人群膳食摄入黄曲霉毒素致癌风险无显著差异,儿童属于高风险人群。与低剂量外推方法相比,MOE法计算结果更便于后期应用。MOE法值得在黄曲霉毒素等遗传毒性致癌物风险评估中推广应用。 展开更多

关键词 花生 黄曲霉毒素 暴露限值法 风险评估

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粮油产品真菌毒素抗体制备研究进展 被引量：13

17

作者 王海彬 李培武 +1 位作者 张奇 张文 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期336-342,共7页

本文简要综述了粮油真菌毒素抗体制备的发展情况,包括真菌毒素免疫原的制备、抗体的制备以及真菌毒素常用免疫学检测方法,同时介绍了我国真菌毒素抗体研究过程中面临的问题,并对未来真菌毒素抗体技术的发展前景进行了展望。

关键词 粮油 真菌毒素 免疫分析 抗体制备

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多组分免疫亲和柱净化-高效液相色谱串联质谱法同步测定植物油中7种真菌毒素 被引量：8

18

作者 朱建国 李培武 +5 位作者 张奇 张文 张兆威 杨青青 王秀嫔 王素君 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期658-665,共8页

为提高植物油中真菌毒素的检测效率,研制免疫亲和柱,建立检测方法。以纯化的抗黄曲霉毒素（AFT,包括AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）、抗玉米赤霉烯酮毒素（ZEA）、抗T-2毒素、抗伏马B1毒素（FB1）的四种单克隆抗体为特异性抓捕元件,通过研究... 为提高植物油中真菌毒素的检测效率,研制免疫亲和柱,建立检测方法。以纯化的抗黄曲霉毒素（AFT,包括AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）、抗玉米赤霉烯酮毒素（ZEA）、抗T-2毒素、抗伏马B1毒素（FB1）的四种单克隆抗体为特异性抓捕元件,通过研究比较3种载体材料和2种抗体偶联方法,成功制备出以CNBr-activated Crystarose4B作为固相载体材料的真菌毒素多组分免疫亲和柱。同时研究比较了提取溶剂、提取方式和上样缓冲液等条件,并结合高效液相色谱串联质谱技术（HPLC-MS/MS）,建立了植物油中7种真菌毒素的同步免疫亲和净化——HPLC-MS/MS检测方法。结果表明,该方法对7种真菌毒素的检测线性范围宽,线性回归方程相关系数（R2）均不低于0.992;对AFB1、AFB2、AFG1、AFG2四种真菌毒素的检出限为0.02~0.08μg/kg,对ZEA、T-2、FB1三种真菌毒素的检出限为0.10~0.50μg/kg;添加回收实验中,低、中、高三个不同加标水平下的平均回收率为80.22%~106.10%,相对标准偏差为1.05%~6.56%。该方法操作简便、净化彻底、回收率高、有机溶剂消耗量少,为食用植物油中真菌毒素多组分同步确证性检测提供了一种高效、准确、灵敏的技术。 展开更多

关键词 真菌毒素 多组分免疫亲和柱 高效液相色谱串联质谱 同步检测 植物油

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酶联免疫吸附法(ELISA)测定黄曲霉毒素B_1的样品基质效应研究 被引量：11

19

作者 张宁 李敏 +3 位作者 李培武 张奇 张文 李冉 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期404-408,共5页

为了探寻与免疫分析相配套的简易前处理方法,以黄曲霉毒素B1(AFB1)为靶标,花生样品为对象,研究了可能影响ELISA测定结果的样品前处理方法;采用实际样品加标回收的方法,研究比较了4种不同浓度(5%、10%、20%和30%)甲醇稀释的样品基质同源E... 为了探寻与免疫分析相配套的简易前处理方法,以黄曲霉毒素B1(AFB1)为靶标,花生样品为对象,研究了可能影响ELISA测定结果的样品前处理方法;采用实际样品加标回收的方法,研究比较了4种不同浓度(5%、10%、20%和30%)甲醇稀释的样品基质同源ELISA灵敏度。结果表明,甲醇稀释度越小基质效应越明显;样品前处理中除油处理可显著提高回收率;样品前处理中免疫亲和柱净化后可消除相当一部分基质效应的影响,提高了回收率。研究结果为进一步开发简单快速的前处理方法提供了借鉴。 展开更多

关键词 花生 黄曲霉毒素B1 ELISA 基质效应

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基于异源策略的黄曲霉毒素B_1酶联免疫(ELISA)分析方法的建立 被引量：7

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作者 李敏 马飞 +6 位作者 李培武 张奇 张文 周海燕 印南日 王恒玲 吴慧 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期802-807,共6页

为提高黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)酶联免疫分析灵敏度,建立了基于异源策略的间接竞争酶联免疫分析(IC-ELISA)方法。首先采用黄曲霉毒素B1与羟基乙酸(glycolic acid,GA)进行衍生化反应,生成缩醛(AFB2-GA),即AFB1半抗原,质谱鉴定结... 为提高黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)酶联免疫分析灵敏度,建立了基于异源策略的间接竞争酶联免疫分析(IC-ELISA)方法。首先采用黄曲霉毒素B1与羟基乙酸(glycolic acid,GA)进行衍生化反应,生成缩醛(AFB2-GA),即AFB1半抗原,质谱鉴定结果为ESI-MS:388.07[M+H]+,表明半抗原合成成功。然后采用活泼酯法,将AFB1半抗原羧基与牛血清白蛋白(BSA)的氨基经脱水反应实现化学共价偶联,得到AFB1人工抗原AFB2-GA-BSA。紫外扫描结果表明人工抗原AFB1特征吸收峰与BSA和AFB1的特征吸收峰有明显差异,BSA与黄曲霉毒素B1成功偶联,摩尔结合比分别为8.45∶1。最后将黄曲霉毒素B1人工抗原AFB2-GA-BSA作为包被原,利用黄曲霉毒素B1高特异性3G1抗体,建立了基于异源策略的IC-ELISA方法。利用该方法测定了3G1抗体的灵敏度,检测灵敏度达到0.3ng/m L,比同源ELISA方法检测灵敏度(1.6ng/m L)提高了81.25%,并将方法应用于花生中黄曲霉毒素的实际检测。测定结果与高效液相色谱法结果进行比对,结果符合曲线y=1.044 4x+0.090 2,R2=0.975 1,说明该方法能满足花生中黄曲霉毒素快速筛查的测定准确度的要求。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 人工抗原 合成鉴定 ELISA 异源策略

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